Závěrečné práce

Mgr. Kateřina Schmidtová

Konjugáty benzo[a]pyrenu a jejich použití při imunizaci

Benzo[a]pyrene conjugates and their use in imunization of animals

Anotace: Benzo[a]pyren je environmentální polutant a pravděpodobný karcinogen. Práce byla zaměřena na přípravu konjugátů polyaromátů pyrenbutanové kyseliny a benzo[a]pyrenu s nosným proteinem (hovězí sérový albumin) a enzymem (křenová peroxidasa) a optimalizaci enzymové imunoanalýzy (ELISA metody). Konjugát albuminu lze použít k imunizaci pokusného zvířete za účelem vývoje monoklonálních protilátek. Konjugát s enzymem lze použít v ELISA měřeních jako převodní systém. Byla také provedena optimalizace ELISA metody ke stanovení polyaromátů pyrenbutanové kyseliny a benzo[a]pyrenu v přímém a nepřímém uspořádání. Daný systém byl také testován, do jaké míry je ovlivnitelný druhem a objemem organického rozpouštědla. …víceméně

Abstract: Benzo[a]pyrene is environmental pollutant and probably also carcinogenic compound. The thesis was concentrated to form conjugates of carrier protein (bovine serum albumin) and enzyme (horseradish peroxidase) with polycyclic aromatic hydrocarbons (benzo[a]pyrene and pyrenebutyric acid) and optimalization of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Albumin conjugate can be used for immunization of laboratory animal to gain monoclonal antibodies. Enzyme conjugate was used as a signal molecule in ELISA. The ELISA optimalization to assignment of pyrenebutyric acid and benzo[a]pyrene was carried out in direct and indirect lay-out. Also influence of organic solvent ( type and volume) was tested for a ELISA system. …víceméně

benzo[a]pyren 4-pyrenbutanová kyselina ELISA konjugace křenová peroxidasa hovězí sérový albumin

Zadání: Cílem diplomové práce je příprava a charakterizace konjugátů benzo[a]pyrenu s nosičovými proteiny či fragmenty DNA a jejich využití při přípravě specifických protilátek, tj. při imunizaci zvířat. V druhé části diplomové práce budou připravené protilátky chrakterizovány metodou ELISA a s použitím biosensorů. Případně budou využity při zobrazování poškození individuálních molekul DNA. Student má možnost pracovat na vědecky atraktivním tématu a přitom si zkusit všechny činnosti prováděné biotechnologickými firmami při vývoji nových imunochemických stanovení. Projekt bude řešen ve spolupráci s firmou Exbio Praha, a.s. (imunizace zvířat, izolace protilátek). Seznam odborné literatury:
M. Suchanek, T. Scharnweber, M. Fisher, D. Knopp, R. Niessner, Monoclonal Antibodies Specific to Polynuclear Aromatic Hydrocarbons, Folia Biologica 47, 106-7, 2001.

J.R. Crowther, ELISA Guidebook, Humana Press, 2001.

N. H. Thomson, S. Kasas, B. Smith, H. G. Hansma, and P. K. Hansma, Reversible Binding of DNA to Mica for AFM Imaging, Langmuir, 12 (24), 5905 -5908, 1996. …víceméně

Jazyk práce: čeština