Dobrý den nUpozornění –nemanipulujte, prosím, s mikroskopy –jsou připraveny k práci po prezentaci –dostanete instrukce, jak studovat krevní nátěry Hemo a Globin Krev Sanguis (l.) n Bloodcells Složení krve fig2 Krevní buňky (formované elementy) nČervené krvinky – erytrocyty - 4 – 6 millionů/ 1 ml nBílé krvinky – leukocyty – 5 000 – 9 000 / 1 ml nDestičky – trombocyty – 150 000 – 300 000/ 1 ml wbc_ident krvinka Morfologie krevních tělísek (krvinek) - velikost - tvar - barvitelnost cytoplazmy - (vzhled jádra) - obsah specifických komponent Další charakteristika krvinek - denzita v mikrolitru krve - (% zastoupení) - životnost - funkce - ERYTROCYTY n4 – 6 milionů/μl ntvar: bikonkávní terčík nvelikost: 7,4 μm (normocyt) nstruktura: –plazmalema –cytoplazma + hemoglobin –chybí jádro a buněčné organely nživotnost: 120 dní nfunkce: transport O2 a CO2 redbloodcells 746px-A_red_blood_cell_in_a_capillary,_pancreatic_tissue_-_TEM ANd9GcSMK5q4k4Q9Rz-xA7NLscxyIrqKSjiuZM4RNkAMokaVolFm5ZUBtw Poikilocytóza a anisocytóza spherocyte sicklecell sférocyty drepanocyty anisocytosis různé tvary ery různá velikost ery npolyglobulie, polycytémie, erytrocytóza – zvýšený počet ery nanemie – snížený počet ery n n nosmotická rezistence n – v hypertonickém roztoku – ery se smršťují → echinocyty –v hypotonickém roztoku – ery bobtnají, plazmalema praská - hemolýza ery 4 Retikulocyty nNezralé ery, v periferní krvi 0,5 – 1,5 % nObsahují zbytky organel /polyribosomy, mitochondrie – substantia reticulofilamentosa/ nV ery dozrávají během 24 – 48 hod nZnázornění - brilantkresylová modř retikulocyte réticulocytes LEUKOCYTY nGranulocyty: n - neutrofily n - eozinofily n - bazofily n n polymorfonukleáry n acidofilní cytoplazma n specifická + azurofilní granula nAgranulocyty n - lymfocyty n - monocyty n n n mononukleáry n bazofilní cytoplazma n jenom azurofilní granula n wbc_ident monocyt lymfocyt neutrofilní granulocyt - tyčka neutrofilní granulocyt - segment eosinofilní granulocyt bazofilní granulocyt trombocyt erytrocyty Neutrofilní granulocyty n71 % z DBOK nÆ 10 – 12 mm ncytoplazma: acidofilní nspecifická granula: neutrofilní njádro: tyčka (4 %) nebo segmenty (67 %) nživotnost: několik hodin nebo dní nfunkce: mikrofág S96538-163-f004 HEME001 Eozinofilní granulocyty n1– 4 % z DBOK nÆ 12 – 14 mm ncytoplazma: acidofilní nspecifická granula: eozinofilní njádro: 2 laloky + chromatinov můstek, (činka nebo brýle) nfunkce: fagocytóza antigen-protilátka komplexů blood1.jpg (23030 bytes) n - eozinofilní granulocytóza – alergie, parazitární onemocnění Eozinofilní granulocyt (ELM) OH_img8-6 Bazofilní granulocyty ndo 1 % z DBOK nÆ do 10 mm ncytoplazma: lehce bazofilní nspecifická granula: –bazofilní - heparin, histamin, .. njádro: nepravidelně laločnaté, („tlusté S“) nfunkce: hypersenzitivita HEME005 bazofilní Agranulocyty nobecná charakteristika: -mononukleáry – jádro je sférické, oválné nebo ledvinovité -bazofilní cytoplazma -chybí specifická granula -azurofilní granula s lyzosomálními enzymy lymphocyte monocyte ly106le Lymfocyty n20 -25 % z DBOK ncytoplazma – modrá s azurofilními granuly, četné ribosomy njádro – kulaté, hyperchromatické ntřídění: n - T- a B-lymfocyty n - malé (Æ 8 mm), n střední (Æ 10-12 mm), n velké (Æ 16-18 mm) nFunkce: buněčná imunita n humorální imunita blood5 Monocyty n5 % z DBOK nvelikost: Æ 15 – 20 mm ncytoplazma – objemná, šedomodrá, nespecifická granula a četné ribosomy, njádro – ledvinovité až laločnaté, většinou v excentrické pozici, chromatin je jemně vláknitý nfunkce : makrofág monocyte 20889-004-64D9A2F5 TROMBOCYTY nnejsou buňky, ale fragmenty cytoplazmy megakaryocytů ntvar: primárně vřetenovitý, po aktivaci ð pseudopodie nvelikost: 2 – 4 mm nhyalomera světle modrá periferie ngranulomera červeně zbarvená zrníčka v centru destičky nživotnost: 10-12 dnů nfunkce : hemostáza /zástava krvácení/ Platel1 OH_img8-5 Jak připravit krevní nátěr? Isolated on White Funny Vampire Vector for Halloween Stock Photo - 15759415 medipurpose-surgilance-fingerstick-300px n blood_sampling2 bloodsmear1 bloodsmear3 2 3 bloodsmear4 bloodsmear5 4 5 nkrevní nátěr fixovat (methylalkohol, 3-5 minut) a barvit (speciální panoptické barvení dle Pappenheima) smear Jak studovat krevní nátěr ve SM? nČočka imerzního objektivu /zvětšení 100x/ je ponořena do kapky imerzního oleje a krevní nátěr je připraven ke studiu nZapněte SM nPokud obraz není ostrý, zaostřete pouze pomocí mikrošroubu teacher Pokud se něco nedaří, obraťte se na svého vyučujícího Manipulace se SM nZkuste se dívat oběma očima, regulujte vzdálenost mezi okuláry Olympus06.gif (5474 bytes) špatně dobře Olympus07.gif (4519 bytes) Dioptrická korekce - Nejprve podívat do pravého okuláru a zaostřit - Potom zkontrolovat levým okulárem, pokud není obraz ostrý, otočte kolečkem Jak počítat DBOK? nkrevní nátěr musíte prohlížet systematicky – meandrovitě n n n nebo blood6%5b1%5d start Tabulka 1 2 Neu tyčky / Neu segmenty //// // /// Eos / Baso Ly // //// Mono // 10 10 9 10 výsledky norma // 4 % //// / /// 67 % / // 3 % / 1 % / //// 20 % 5 % 10 10 100 100 % Diferenciální bílý obraz krevní nprůměrné hodnoty n Neutrofily - tyčky 4 % - segmenty 68 % Eozinofily 3 % Bazofily 1 % Lymfocyty 20 % Monocyty 4 % ∑ = 100 % !!! remember Hynkovo číslo n n - sečíst segmenty jader ve 100 neutrofilech n = 270 (obvykle) n - podělit 100 n 270 : 100 = 2,7 n Neutrofily ntyčky : segmenty - 4 % : 68 % →1 : 17 nposun doleva nposun doprava nHynkovo číslo – 2,7 n n n n n n n n tyčka 2 segm. 3 segm. 4 segm. 5 segm. Posun doprava > 2,7 Posun doleva > 2,7 Anomálie DBOK é ê Neutrofily neutrofilní granulocytóza neutrofilní granulocytopenie Eozinofily eozinofilní granulocytóza eozinofilní granulocytopenie Bazofily bazofilní granulocytóza bazofilní granulocytopenie Lymfocyty lymfocytóza lymfocytopenie Monocyty monocytóza monocytopenie Hemo a Globin Světelný mikroskop nokuláry nobjektivy s čočkami nstolek s preparátem nclona non/off nregulace intenzity světla nzdroj světla nmakrošroub nmikrošroub nposun preparátu Olympus01 _wsb_579x463_Platelet DA3C31FF1 Normal platelet function. Important elements in platelet adhesion and aggregation include a platelet shape change; adhesion to subendothelial collagen; aggregation of activated platelets; and release of ADP, thromboxane A2 (TxA2), platelet factor 4 (PF4), and β-thromboglobulin (βTG) to stimulate further platelet activation and aggregation. Thrombin acts as a platelet activator to accelerate the process. von Willebrand factor is essential to the adhesion of the GPIb receptor to collagen, whereas fibrinogen is an essential cofactor in the GPIIb/IIIa aggregation process.