Koprologické metody Mgr. Radka Pecková MVDr. Ivona Foitová, Ph.D. MU, PřF, Oddělení botaniky a zoologie Koprologie usoubor metod používaných v parazitologii k diagnostice parazitárních infekcí z trusu zvířete nebo ze stolice člověka ujedná se o základní, jednoduchou, neinvazivní, časově nenáročnou a velmi efektivní formu diagnostiky (monitorování zdraví u divokých zvířat) uprincipem je detekce vajíček helmintů, jejich larev či dospělců a exogenních vývojových stádií (oocyst, cyst, spor…) parazitárních protistů ve vzorcích trusu/stolice upřestože u řady parazitů neprobíhá vývojový cyklus v zažívacím traktu hostitele, opouští vývojová stádia tělo parazitovaného jedince trusem/stolicí Sběr a uchovávání vzorků učerstvý fekální materiál (z důvodu možného zkreslení výsledku vzhledem k omezení životaschopnosti trofozoitů parazitických prvoků nebo rychlému vývoji a líhnutí L1 larev některých nematod během několika málo hodin či dnů) uvzorky sbíráme do čistých nádob (sáčků), označíme druhem zvířete, datem odběru, lokalitou, věkem zvířete (důležité pro určování parazita) uoptimální množství materiálu je cca 10 g uvzorky ihned zpracováváme nebo uchováme v chladnu či fixujeme (chemické směsi obsahující např. etanol, formaldehyd, k. octovou, k. propionovou, dichroman draselný, glutaraldehyd) Makroskopická diagnostika uslouží k detekci dospělců (škrkavek, roupů aj.) nebo jejich částí (článků tasemnic) uzjištění neobvyklého vzhledu, barvy a konzistence, případně příměsi krve a hlenu v trusu může napovědět přítomnost parazitů Nativní preparát upřímá prohlídka stolice v kapce fyziologického roztoku, případně se přidává Lugolův roztok na obarvení cyst prvoků upřítomnost pohyblivých stádií bičíkovců, nálevníků a měňavek uidentifikace na základě velikosti, tvaru, povrchových struktur a typického pohybu umůže se nechat zaschnout, u fixovat a barvit (à zvýraznění u bezbarvých parazitů) u Dekantace uresuspendování ve zvoleném objemu vody, sedimentace (desítky minut, případně centrifugovat), případně přefiltrování přes cedník, gázu nebo jiný síťovaný materiál upro lepší orientaci v nativním preparátu uopakováním se docílí pročištění vzorku, přičemž parazitární útvary neustále procházejí síty a klesají ke dnu nádoby u Tlustý roztěr udiagnostika vajíček helmintů udo kapky vody se rozmíchá určité množství stolice; usměs se rozetře na sklíčku (vrstva má být tak silná, aby přes ni nebylo možno číst); uroztěr se nechá zaschnout Koncentrační metody u1) Flotace u umetoda využívající rozdílných hustot parazitárních útvarů a použitého flotačního roztoku (vyšší hustota), takže parazitární útvary vyplavou na hladinu, odkud se sbírají a přenášejí na mikroskopické sklíčko upreparáty se ihned prohlížejí udetekce menších vajíček a larev hlístic, tasemnic a oocyst kokcidií unapř. Sheatherova metoda Koncentrační metody uFlotace u Koncentrační metody u2) McMasterova kvantifikační metoda u uumožňuje vypočítat intenzitu infekce unavazuje na flotační metodu, tekutina z hladiny se vlije do McMasterovy komůrky, pomocí čtverců v ní obsažených se vypočítá množství vývojových stádií parazitů v gramu trusu u Koncentrační metody u3) Sedimentace u umetody využívající gravitace a hustoty roztoku k tomu, že těžká vajíčka a cysty sedimentují na dno zkumavky upro zvýšení rychlosti sedimentace se často používá centrifugace za použití různých sedimentačně-koncentračních roztoků (složení použitých směsí umožňuje sedimentaci a čistí koprologický materiál od balastu, který ztěžuje prohlížení) udetekce cyst prvoků a vajíček helmintů (motolic) a některých hlístic u Koncentrační metody uSedimentace PRAKTICKÉ POUŽITÍ V TERÉNU Orangutan Health Project oParasites diversity oParasites seasonality oComplex interactions of animal – diseases – environment oFeeding strategy oSelf-medical behaviour dominant male.JPG