Postup při měření spekter na UV/VIS spektrometru UNICAM 8625 s PC 1. Zapneme spektrometr síťovým vypinačem (pravý bok) a PC (pravý bok), Pozn.: spektrometr by měl být před zahájením měření nejméně 30 minut zapnutý pro stabilizaci světelného toku. 2. Na stavové řádce Norton Commanderu napíšeme příkaz SPEKTRA (proběhne inicializace potřebných programů), na monitoru se objeví základní menu ovládání spektrometru. 3. Potvrdíme volbu SCAN. 4. Funkční klávesou F8 inicializujeme propojení spektrometru s PC. 5. Potvrdíme volbu SCAN. 6. Vyplníme tabulku „SCAN“ podle následujícího schematu +--------------------------------------------------------------------------------------------+ |· SCAN TYPE |pomocí šipky a Enter zvolíme | | | | | |BACKGROUND při měření refenčního vzorku, např. | | |destilovaná voda, | | | | | |nebo | | | | | |SAMPLE při měření vzorku | |----------------------------------+---------------------------------------------------------| |· START |z klávesnice zadáme počáteční vlnovou délku | | | | | |(pro úlohu 6a = 350 nm) | |----------------------------------+---------------------------------------------------------| |· STOP |z klávesnice zadáme konečnou vlnovou délku | | | | | |(pro úlohu 6a = 720 nm) | |----------------------------------+---------------------------------------------------------| |· DATA INTERVAL |šipkou získáme nabídku 1,2,5,10 nm, (pro | | |úlohu 6a = 5 nm) | |----------------------------------+---------------------------------------------------------| |· HIGH-LOW (rozměr grafu) |obvykle 1,5 Abs – 0 Abs | |----------------------------------+---------------------------------------------------------| |· OVERLAY, PEAK LIST, DATA,|nedostupné -OFF | |PRINT OUT | | |----------------------------------+---------------------------------------------------------| |· OPERATOR |nepovinné, lze vyplnit z klávesnice bez diakritiky | +--------------------------------------------------------------------------------------------+ 7. Do držáku spektrometru vložíme kyvetu s referenčním vzorkem (obvykle destilovaná voda), (v tabulce SCAN musí být předvoleno „SAMPLE BACKGROUND“. 8. Po ukončení vyplňování tabulky SCAN pomocí F8 odstartujeme dialog pro měření. 9. Tlačítkem ENTER na panelu spektrometru odstartujeme měření. 10. Po skončení měření spektra referenčního vzorku tuto kyvetu zaměníme za kyvetu se vzorkem. 11. Pomocí F5 se vrátíme do SCAN MENU, v tabulce SCAN zvolíme SCAN TYPE – SAMPLE a s jinak stejnými parametry opět odstartujeme měření spektra vzorku (F8-F8-Enter na panelu spektrometru). Manipulace s daty, postup pro export a ukládání naměřených spekter (spektrum referenčního vzorku není nutno pro účely předepsaného vyhodnocení ) ukládat. Všechna naměřená spektra lze ukládat ve specifickém formátu ovládacího programu (přípona DAT) nebo exportovat a ukládat v ASCII tvaru (přípona ASP) na přiložené, speciálně naformátované disketě v disketové mechanice A. S takto exportovanými daty lze pracovat a vizualizovat např. pomocí EXCELU. Pozn: Export dat do ASCII je možný pouze po předcházejícím uložení spektra na disketu. Ukládání naměřených spekter 1. Po skončení měření spektra vzorku se pomocí klávesy HOME vrátíme do základního menu a LIBRARY MENU - Enter 2. Z nabídky funkcí pomocí kurzorové šipky najedeme na SAVE SPECTRUM a potvrzením Enter otevřeme SAVE DIALOG, 3. Z klávesnice doplníme požadované údaje +--------------------------------------------------------------------------------------------+ |NAME - Jméno souboru |Max. 5, systém doplní pořadové číslo a příponu automaticky | |--------------------------+-----------------------------------------------------------------| |MEMO |Volný text – komentář, v rozsahu rezervovaného prostoru v dialogu| |--------------------------+-----------------------------------------------------------------| |OPERATOR |Volné v rozsahu prostoru v dialogu | +--------------------------------------------------------------------------------------------+ Pozn.: vše je třeba vyplňovat abecedou bez diakritiky 4. Klávesou F8 se soubor uloží. Export naměřených spekter do ASCII tvaru Spektra uložená na disketě je možné exportovat do ASCII tvaru pro další zpracování. POSTUP: 1. Ze základní nabídky ( pomocí HOME) zvolíme LIBRARY MENU. 2. Zvolíme Spectral index (disketa musí již být zasunutá v disketové mechanice). 3. Pomocí kurzorových šipek si vybereme hledaný soubor, přečteme jej klavesou Enter potvrdíme položku Current Area klávesou Enter. 4. Klávesou F7 FULL DETAILS zobrazíme údaje o souboru. 5. Klávesou F7 SAVE AS ASCII provedeme vlastní export požadovaného souboru, spektrum pak bude uloženo ve tvaru NAME.ASP oproti původnímu NAME.DAT. 6. Návrat do modu měření klávesou „Home“, další měření dle návodu „Postup…“ od bodu 8, str. 1. Konec měření a vypnutí spektrometru 1. Návrat do hlavního menu pomocí klávesy HOME. 2. F3 –konec programu a návrat do DOSu. 3. Případně síťovými vypínači vypnout dle potřeby spektrometr a/nebo PC. Struktura souboru NAME.ASP +--------------------------------------------------------------------------------------------+ |1.ř |pracovní údaj | |-------------+------------------------------------------------------------------------------| |2.ř. |počáteční vlnová délka | |-------------+------------------------------------------------------------------------------| |3.ř |konečná vlnová délka | |-------------+------------------------------------------------------------------------------| |4. a 5. ř. |pracovní údaje | |-------------+------------------------------------------------------------------------------| |6. ř. |zvolený interval vlnových délek, krok měření absorbancí | |-------------+------------------------------------------------------------------------------| |7. ř. a další|hodnoty absorbancí při vlnových délkách daných mezemi a zvoleným intervalem, | | |např. 5 nm | +--------------------------------------------------------------------------------------------+ Pozn.: s obsahem diskety lze manipulovat pomocí běžných programových prostředků, např. pomocí Norton Commanderu, po ukončení činnosti spektrometru. Po exportu do Excelu (oddělovač je čárka, začátek importu od ř.1, typ souboru Windows ANSI, textový kvalifikátor – žádný, formát dat ve sloupcích - obecný) je vhodné ke sloupci hodnot absorbancí vygenerovat sloupec vlnových délek pomocí známé počáteční a konečné hodnoty vlnových délek pomocí funkce Úpravy-Vyplnit-Řady a pak hlavičku souboru vymazat.