BLKHM0422c Histopatologické vyšetřovací metody II

Lékařská fakulta
jaro 2016
Rozsah
10 h/semestr. 3 kr. Ukončení: zk.
Vyučující
MUDr. Jitka Kyclová (přednášející)
PhDr. Květoslava Matulová (cvičící)
Michaela Gregorovičová (pomocník)
Jarmila Jelínková (pomocník)
Garance
prof. MUDr. Jirka Mačák, CSc.
Ústav patologie – Společná pracoviště s Fakultní nemocnicí Brno - pracoviště Nemocnice Bohunice a Porodnice – Lékařská fakulta
Kontaktní osoba: MUDr. Jitka Kyclová
Dodavatelské pracoviště: Ústav patologie – Společná pracoviště s Fakultní nemocnicí Brno - pracoviště Nemocnice Bohunice a Porodnice – Lékařská fakulta
Předpoklady
BLKHM0321c Histopat. vyšetř. metody I
Omezení zápisu do předmětu
Předmět je určen pouze studentům mateřských oborů.
Mateřské obory/plány
Cíle předmětu
Kurs je věnován aplikaci histologických metodik v praktické patomorfologické diagnostice (bioptické a nekroptické). Student se seznámí s praktickým provozem histopatologické laboratoře a získá praktické dovednosti pro znázornění jednotlivých tkáňových komponent pomocí histologických, histochemických a imunohistochemických metod i některých molekulárně biologických postupů. V rámci kursu se student seznámí s moderními metodami histopatologické diagnostiky nádorů a dalších patomorfologických jednotek.
Osnova
  • Odběr materiálu pro histologické vyšetření. Fixace – fyzikální a chemické fixační prostředky.
  • Odvodňování, projasňování, zalití do parafínu a zalévání do celoidinu, krájení na sáňkovém a rotačním mikrotomu, krájení na kryostatu.
  • Barvení histologických řezů: důvody, druhy histologických barviv a druhy barvení. Přehledná barvení: barvení hematoxylinem – eozínem (HE), barvení Weigert - van Gieson, trichromy, AZAN, barvení podle Malloryho, (barvení ručně a pomocí barvicího automatu). Impregnační metody, průkaz anorganických látek, retikula, pigmentů.
  • Elektronový mikroskop. Odběr materiálu pro elektronovou mikroskopii. Fixační prostředky v elektronové mikroskopii. Zalévání pro EM, pryskyřice, Durcupan, Araldit. Polosilné a ultratenké řezy, ultramikrotom. Kontrastování řezů.
  • Struktura a práce ústavu patologie. Členění laboratorního úseku patologie. Vybavení příjmové laboratoře, bioptická průvodka.
  • Druhy bioptických odběrů. - peroperační biopsie, trepanobiopsie, transport bioptického materiálu, mikroexcize a punkční biopsie.
  • Proces přikrajování (úprava tkáňového materiálu, blokování), autotechnikony, registrace vzorků, časové relace pro expedici bioptických nálezů.
  • Autopsie, struktura a pracovní náplň autoptického úseku patologie. Didaktický úsek ústavu patologie.
  • Cytodiagnostika (význam, výhody, nevýhody), druhy cytologických odběrů. Zhotovování cytologických preparátů, nátěry, cytobloky, cytospin. Cytologická diagnostika děložního čípku. Cytologická diagnostika v pneumologii, cytologický skríning.
  • Histochemie, základní typy reakcí. Odběr materiálu, možnosti fixace, hluboké zmrazení, kryostatové řezy pro histochemické reakce (enzymy, lipidy, glycidy).
  • Histochemické znázornění enzymů, základní typy reakcí. Průkaz enzymů u malabsorpčního syndromu a v myopatologii.
  • Klasifikace a histochemie lipidů, základní barvení, extrakční metody k rozlišení polárních a nepolárních lipidů. Aplikace – steatóza, střádací choroby.
  • Klasifikace a histochemie glycidů, PAS reakce, barvení alciánovou modří, aplikace na biopsie gastrointestinálního traktu, glykogenózy. Histochemické znázornění amyloidu, Cu, a Fe.
  • Princip a základy imunohistochemických reakcí, mono- a polyklonální protilátky.
  • Střední filamenta (cytokeratiny, vimentin, desmin, GFAP, neurofilamenta), význam pro určení základních typů tkání a jejich nádorových derivátů. Kroky diagnostického postupu v imunohistochemické diagnostice nádorů.
  • CD antigeny a protilátky, aplikace v hematologii a při diagnostice maligních lymfomů.
  • Molekulárně patologické metody v diagnostice. Princip fluorescenční in situ hybridizace (FISH), využití této metodiky.
  • Princip PCR. Hlavní výhody a nevýhody této metody. Rozdíly (v provedení a v informacích, které poskytují) mezi imunohistochemickou analýzou a imunoblotingem.
Literatura
  • Theory and practice of histological techniques. Edited by John D. Bancroft - Marilyn Gamble. 5th ed. Edinburgh: Churchill Livingstone. xiii, 796. ISBN 0443064350. 2003. info
  • VACEK, Zdeněk. Histologie a histologická technika. 1. vyd. Brno: Institut pro další vzdělávání pracovníků ve zdravotnictví. 184 s. ISBN 80-7013-202-7. 1995. info
Výukové metody
Výuka probíhá v laboratořích patologického ústavu formou demonstrací a praktického provedení vybraných histopatologických vyšetřovacích metod.
Metody hodnocení
Zkouška je ústní, studenti si losují 4 otázky z těchto oblastí: základní histologické metody a elektronová mikroskopie, histochemické a imunohistochemické metody, cytologické metody, molekulárně patologické metody.
Další komentáře
Studijní materiály
Předmět je vyučován každoročně.
Výuka probíhá každý druhý týden.
Všechny formy kontaktní výuky předmětu vyjma přednášek jsou povinné.
Předmět je zařazen také v obdobích jaro 2011, jaro 2012, jaro 2013, jaro 2014, jaro 2015, jaro 2017, jaro 2018, jaro 2019, jaro 2020.