Méně často vyšetřované tělní tekutiny • Punktát • Stolice • Sliny • Pot • Slzy Punktát (výpotek) • Zmnožená tekutina v tělesných dutinách • Peritoneální – v dutině břišní (ascites) Pleurální – v dutině hrudní Perikardiální – v dutině srdeční Kloubní(synoviální) Typy punktátu: Transsudát – ultrafiltrát plasmy • Proti plasmě nižší koncentrace bílkovin, enzymů (součástí srtuktury jsou bílkoviny), látek na bílkoviny navázaných – lipidy • Vzniká při zvýšeném filtračním tlaku v kapilárách nebo sníženém onkotickém tlaku v plasmě Exsudát – tekutina zánětlivého původu • Koncentrace bílkovin a látek na ně vázaných se blíží plasmě • Leukocyty a baktérie snižují koncentraci glukosy, přemění ji na laktát (jeho konc. se zvýší) • Zvýšené koncentrace enzymů • Vzniká při poškození výstelky tělesných dutin zánětem nebo karcinomem, při zvýšené permeabilitě kapilár Odlišení typu tělní tekutiny pomocí laboratorních vyšetření: Odlišení transsudátu a exsudátu Odlišení moče v břišní dutině (močová píštěl) od ascitu: • moč má proti ascitu vysokou ureu, kreatinin, kalium Odlišení likvoru od tělní tekutiny z nosu, ucha, krku: • Likvor obsahuje ß2- transferin (elektroforeticky) Stanovení punktátu: • Stejné metody jako v séru či v moči • Nejčastěji stanovované parametry: urea, kreatinin, bilirubin, amylasa, laktátdehydrogenáza, cholesterol, triacylglyceridy, celková bílkovina, albumin, Na, K, Cl, pH, tumormarkery Peritoneální tekutina- příklady vyšetření fyziologicky 50 ml • ALP – při poranění střev bývá několikrát zvýšená proti hodnotám v séru • NH[3] – konc.vyšší než 176 mmol/l svědčí o perforaci duodenálního vředu, apendixu, střev • Amy – výrazně zvýšená proti sérovým hodnotám u akutní pankreatitidy • Bil – zvýšené hodnoty ukazují na problém biliárního systému • hCG – vyšší než v séru při mimoděložním těhotenství • LD – výrazně zvýšené po zranění jater • Leu – zvýšené při zánětech Pleurální tekutina - příklady vyšetření Fyziologicky 15 ml Výpotek se objevuje při chorobách srdce, karcinomech, při zánětu po plicní embolii • LD, Chol – hodnota pomůže rozlišit transsudát od exsudátu • Alb - transsudát – menší než 12 g/l, exsudát větší než 12 g/l • Amy, lipasa – zvýšení při akutní pankreatitidě • CEA – výrazně vyšší již v počátku maligních onemocnění Perikardiální tekutina - příklady vyšetření • Triacylglyceroly – hodnoty vyšší než v séru ukazují na přítomnost lymfy ( po operaci může dojít k porušení hrudního mízovodu) Synoviální tekutina - příklady vyšetření Významná pro revmatologické vyšetření • pH - norma 7,31-7,64, zánět 7,25-7,54 • CB – zvýšené hodnoty při terminální artritidě • Lakt – zvýšené hodnoty při zánětu • Glu - snížené hodnoty při zánětu Stolice: • Hnědé zbarvení způsobují produkty odbourávání bilirubinu – sterkobilirubin • Zápach tvoří sirné sloučeniny tvořené anaerobními bakteriemi Vyšetření: • Test na okultní (skryté) krvácení ve stolici • Stanovení elastázy • Mikroskopické vyšetření Test na OK - stolice Vyšetření přítomnosti krve - doporučený screening v ČR – po 50r. věku každé dva roky Příklady souprav na stanovení okultního krvácení: a.) Klasický test s guajakem, forma psaníčka– imunologický test např. HemoCare (firma Care diagnostica) • Pacient nanese vzorky z různých míst stolice na tři políčka psaníčka, odběr provede ve třech stolicích po sobě • V laboratoři se ze zadní strany psaníčka na vysušené vzorky v testovacím políčku impregnovaném guajakem kápne peroxid vodíku • V přítomnosti volného hemoglobinu (positivní test) proběhne pseudoperoxidázová reakce s guajakem, vzniká modré zbarvení • Test může být ovlivněn některými léky, velkým množstvím vitamínu C atd. • Vyžaduje tedy přípravu pacienta Význam testu – stolice na OK • Zjištění positivity může zabránit vzniku karcinomu tlustého střeva (patří k nejrozšířenějším příčinám úmrtí v ČR), nebo přispět k jeho včasnému odhalení • Positivita testu může ukazovat na přítomnost polypů na střevě • Možnost vývoje v karcinom • Polypy se dají snadno odstranit neinvazivní metodou Test na OK - stolice b) Jednokrokový test na okultní krvácení ve stolici - imunochemický test ( firma Hemosure, DINONA atd.) • Test je specifický, nevyžaduje žádná dietní opatření • Pacient nabere stolici pomocí spirálového aplikátoru z 5-6 různých částí a umístí do přiloženého pufru • Vyhodnocení se provede kápnutím vzniklého roztoku na speciální testovací kazetku – positivní dva proužky, negativní jeden proužek • Test má vysokou citlivost – pro preventivní vyšetření není příliš vhodný, velký počet falešně positivních pacientů, vhodný pro sledování po zákroku – zachytí první změnu Stanovení pankreatické elastázy ve stolici • Elastáza patří mezi enzymy používané pro vyšetření činnosti pankreatu • Odběr stolice provádí pacient do zkumavky s extrakčním pufrem • Vlastní stanovení je založeno na metodice ELISA – na reakci polyklonální protilátky proti lidské pankreatické elastáze • Stanovení slouží k posouzení funkce pankreatu a hodnocení míry pankreatické insuficience Mikroskopické vyšetření stolice • Vyšetřuje se nativní a barvená stolice (barvivo Sudan III a Lugolův rozok KJ + J2) • Zjišťujeme přítomnost svalových vláken, škrobových zrn a tukových kapének • Svalová vlákna jsou dobře viditelná, možno pozorovat i příčné pruhování • Tuky se barví s barvivem Sudan III červeně • Škroby modře s Lugolovým roztokem • Positivní nálezy ukazují na onemocnění pankreatu, poruchy resorpce Sliny: Vyšetření se provádí zřídka Příklady: • Alkohol – viz přednáška alkohol • Kortizol • Stanovení estrogenů, IgA, drog atd. Stanovení kortizolu ve slinách Výhody proti stanovení v krvi a moči • Je neinvazivní a kortizol je zde přítomen pouze ve formě volné (biologicky aktivní) • Není vázán na transportní proteiny • Stanovení volného kortizolu v séru je náročné a rutinně se neprovádí • Stanovení volné frakce v moči – sběr za 24 hod - se provádí po extrakci • Stanovení ve slinách výhodné při potvrzení diagnózy Cushingův syndrom, typické zvýšené koncentrace v nočních hodinách (kortizol má výrazný cirkadiánní rytmus) Koncentrace ve slinách - 3 – 5% celkového kortizolu v séru Provedení stanovení: • Speciální zkumavky (Salivette od firmy Sarstedt) se smotkem vaty • Smotek pacient žvýká • Poté ho vrátíme do zkumavky a zcentrifugujeme • Získané sliny použijeme pro imunochemické stanovení Pot : Provádí se stanovení Cl (případně Na) Stanovení Cl: • Pot se zachytí do čtverečku filtračního papíru po stimulaci pilokarpinem (pilokarpinová iontoforéza) • Vážkově se stanoví celková hmotnost potu • Po eluci se stanoví koncentrace chloridů fotometricky nebo coulometricky • Vyšetření slouží jako screening pro diagnózu cystické fibrózy (Cl zvýšené) • Na positivní screening navazuje genová analýza • Cystická fibróza je nejčastější dědičná choroba mezi Indoevropany • Vede k recidivující bronchopneumonii, příčina předčasné smrti Slzy: • Při zánětech spojivek – možnost stanovení IgE , LD Bronchoalveolární laváž – výplach plic fyziologickým roztokem: • Posuzuje makroskopický vzhled, hemoglobin diagnostickým použkem, kvantitativní cytologie (rozlišují se ery a non-ery), CB, Alb a imunoglobuliny • Používá se při posuzování plicních zánětů