Laboratorní pomůcky a zařízení Mgr. Jana Gottwaldová Základní laboratorní technika lPatří k základnímu vybavení laboratoře lJejí použití je jednoduché, ale vyžaduje dodržování stanovených pracovních postupů lPři provádění automatizovaných metod je její použití minimální lNezbytné je při provádění speciálních analýz Laboratorní odměrné sklo lSlouží k odměřování objemů kapalin • •Nádoby kalibrované na vylití – kádinky, odměrné válce lSlouží pouze pro orientační odměřování objemů lOznačeny „V“, „Ex“ Instr Instr Laboratorní odměrné sklo l nádoby kalibrované na dolití – odměrné baňky •obsahují přesně udané množství kapaliny při doplnění po rysku •používají se k přípravě roztoků o přesných koncentracích •pro přesné odměřování objemů kapaliny je nutné dodržet teplotu, pro kterou je odměrná nádoba kalibrována (20 ºC) •„D“, „In“ l l Instr Pipety lSkleněné l- z důvodu bezpečnosti práce se téměř nepoužívají l- nesmí se pipetovat ústy, pouze pomocí balónků a pístů, které po nasazení na konec pipety vytváří podtlak l- umožňují pipetovat s přesností na 100 μl l l Pipetovací balónky l lVhodný pro pipety do 50 ml lDva pracovní body Pipetovací nástavce l lVákuové nástavce Pipetovací nástavce -elektronické l lDávkování objemu 1-100 ml lNapájení pomocí baterie GCMS_SKH_AAK_Labsklo_centrifugy 072 Pipety lAutomatické pístové - nasátí a dávkování objemu zajišťuje pohyb teflonového pístu, slouží pro přesné pipetování objemu v rozsahu 5 – 1000 µl, k pipetování se používají jednorázové vyměnitelné špičky •s nastavitelným objemem (5-200 µl, 200 – 1000 µl) •S fixním objemem •Osmikanálové pipety • • • l l Pipety s fixním objemem Pipety s nastavitelným objemem Osmikanálové pipety Elektronické pipety Pipetovací špičky l Dávkovače, dispenzory lSlouží pro opakované dávkování větších objemů činidel l lPrincip: do vyměnitelné stříkačky se vyzvednutím pístu nasaje požadovaná kapalina a opakovaným stisknutím se postupně dávkuje nastavený objem l Dispenzor – ruční dávkovač Ruční dávkovač s krokovým mechanismem l Dávkovač s teflonovými ventily a písty pro fixní nebo nastavitelný objem GCMS_SKH_AAK_Labsklo_centrifugy 063 Dávkovač s celoskleněným pístem a ventilem pro nastavitelný objem Automatické dilutory lFy Hamilton představuje světovou špičku, její dávkovače a pipetory se používají ve všech automatických analyzátorech, lPro přesné dávkování velmi malých objemů, při provádění stopových analýz, v plynové a kapalinové chromatografii lDávkování velmi malých objemů od desetin mikrolitrů, velmi nízká spotřeba vzorku l GCMS_SKH_AAK_Labsklo_centrifugy 093 Automatický dilutor fy Hamilton používaný v kapalinové chromatografii princip práce diluteru Krok 1: Levá stříkačka se naplní naprogramovaným množstvím rozpouštědla (ředidla) ze zásobníku. Krok 2: Pomocí pravé stříkačky se nasaje do koncové části ruční sondy naprogramované množství koncentrovaného vzorku. Krok 3: Do vialky se nadávkuje patřičné množství vzorku i rozpouštědla. Funkce automatického programovatelného dilutoru Laboratorní váhy lVážení vzhledem k používání firemních diagnostických souprav nepatří k častým činnostem v laboratoři lUplatňuje se při přípravě standardů pro speciální analýzy lTypy vah (dle přesnosti vážení): •Předvážky •Analytické váhy Laboratorní váhy lPředvážky lVáží s přesností na setinu gramu, v rozsahu 10 –100 g lSlouží k navážce při přípravě pufrů, nebo k přibližnému lodměření vážené látky pro vážení na analytických váhách l lAnalytické váhy lVáží s přesností 0,1 – 0,01 mg v rozsahu několik desítek lgramů. lPoužívají se především k přípravě standardů l GCMS_SKH_AAK_Labsklo_centrifugy 087 GCMS_SKH_AAK_Labsklo_centrifugy 084 Centrifugace lZákladní laboratorní metoda, která slouží k odstředění lvzorku před vlastní analýzou v rámci preanalytické fáze l lV důsledku odstředění dochází k: •Odstranění sraženin •Odstranění buněk •Zakoncentrování buněk •Zahuštění bílkovin (moč, likvor) •Dělení směsi nemísitelných kapalin • Centrifugace lVliv gravitace je nahrazen použitím centrifugy, ve které se lzkumavky pohybují v rotoru po kruhové dráze. Působí tak lna ně odstředivá síla, která je tím větší, čím vyšší je lrychlost a delší dráha po které se zkumavky pohybují. Tato lsíla závisí na poloměru rotoru a na rychlosti se kterou se lrotor otáčí. l l Centrifugace lCentrifugační síla lF= mxrxω2 lF-centrifugační síla, m-hmotnost částice,r –poloměr rotoru, ω2 – úhlová rychlost (2пf, f-frekvence otáček) lRelativní centrifugační síla- vyjadřuje poměr mezi centrifugačním a tíhovým zrychlením (kolikrát se při centrifugaci znásobí tíha částic) lR=rxω2/g lg- tíhové zrychlení preanal_video_2 002 Instr Centrifuga s úhlovým rotorem Instr Centrifuga s výkyvným rotorem Instr Malá stolní centrifuga pro centrifugaci v eppendorfkách Cytocentrifuga l lspeciální držáky s mirkroskop. Sklem ke ktrému je přitlačen filtrační papír s kruhovým otvorem ltekutina je odstředivou silou tlačena proti mikr. sklu, vsakována do filtr. papíru – buň. elementy zůstavají na skle Koncentrační zkumavky l lZahuštění močí, CSF lSpeciální membrána l Míchačky a třepačky lSlouží k urychlení rozpouštění substancí při přípravě roztoků lPro promíchání obsahu zkumavky lK důkladnému šetrnému promíchání biologického materiálu (krev, mozkomíšní mok, moč) lDruhy: třepačka s vibračním pohybem, vibrační třepačka s excentrickým pohybem gumového lůžka (vortex), rotační míchačka s kývavým pohybem… Instr Instr Instr míchačka vortex Třepačka na stojánek Instr_tech_lab Rotační míchačka s kývavým pohybem Instr Vodní lázeň pro temperování vzorků Teploměry lLaboratorní teploměry patří mezi základní pracovní měřidla, která stejně jako pipety (váhy) podléhají zvláštnímu režimu kalibrace a pravidelných kontrol vRtuťové teploměry lPrincip: objemová změna rtuti v závislosti na teplotě vElektrické snímače teploty lPrincip: využívají vlastnosti kovů a polovodičů, u kterých se elektrický odpor mění s teplotou. Používají se zejména měděné, niklové a platinové vodiče, které vykazují největší přesnost a stabilitu. l l Instr Teploměry lElektrická teplotní čidla – jejich výhodou je možnost převedení signálu do digitální podoby a další elektronické zpracování, což umožňuje soustavné monitorování teploty pomocí počítačového programu -důležité je dodržování doporučeného teplotního režimu při skladování BM nebo reagenčních souprav -Běžné je používání elektronických monitorovacích systémů, kde na centrálním monitoru jsou zobrazeny aktuální informace hodnot z teplotních čidel a systém signalizuje akusticky a graficky překročení povolených teplot l Instr_tech_lab Instr_tech_lab Instr_tech_lab displej digit.teploměru větrák pro nucenou cirkulaci vzduchu Děkuji za pozornost