Genetická preventivní vyšetření u vybraných monogenně dědičných onemocnění Fakultní Nemocnice Brno Jihlavská 20, 639 00 Brno Molekulární biologie •Metodiky využívané stále šířeji v laboratorní praxi mnoha oborů • •Využití v klinické genetice je jednou z možností využití metod molekulární biologie Diagnostika chorob na molekulární úrovni •Stále se rozšiřuje počet onemocnění s objasněnou molekulární podstatou • •Stále se zvyšuje počet onemocnění s možností DNA diagnostiky • •Stále se rozšiřuje spektrum metod využívaných v DNA diagnostice - při vyhledávání mutací způsobujících závažná dědičná onemocnění DNA analýza dědičných onemocnění •Přímá – detekce mutací – potvrzuje klinickou diagnosu • •Nepřímá – segregační – nepotvrzuje klinickou diagnosu DNA analýza dědičných onemocnění •Diagnostické testy – potvrzení klinické diagnosy na molekulární úrovni, případně potvrzení segregace patologické alely v rodině • •Prediktivní (presymptomatické) testování – onemocnění s pozdním nástupem klinických příznaků, onkologie • •Prenatální testy • Genetické poradenství a DNA analýza •Vyšetření na molekulární úrovni by vždy mělo doprovázet genetické poradenství • •Diagnostika na molekulární úrovni musí být vždy prováděna s informovaným souhlasem pacienta nebo jeho zákonného zástupce • •Výsledek molekulárně genetického vyšetření by měl být vždy interpretován erudovaným lékařem – klinickým genetikem Molekulárně genetické vyšetření •Protokolární postupy – cílené vyšetření vysoce suspektního onemocnění •Pokud možno přesná klinická dg. •Informovaný souhlas •Interdisciplinární spolupráce • (klinický lékař, klinický genetik, molekulární biolog, pacient) •Genetické poradenství před prováděným molekulárně genetickým vyšetřením a při předání – interpretaci výsledku vyšetření DNA banka •Slouží k uchování biologického materiálu, který bude možno využít v případě zavedení nových metodik, postupů či vyšetření u různých dědičných onemocnění • •Izolace a uložení DNA v DNA bance se souhlasem pacienta nebo rodiny umožňuje zachování vzácného materiálu, který v budoucnu může umožnit rodinám využít diagnostické, presymptomatické či prenatální vyšetření Genetická prevence u monogenních dědičných chorob •časná diagnostika •vyhledávání heterozygotů (AR,XR) •prenatální diagnostika •prediktivní a presymptomatické testy •preventivní léčba před rozvojem příznaků •genetické poradenství Autosomálně Recesivní •Recesivní alela na autosomu •horizontální typ dědičnosti •riziko pro sourozence 25% •poměr pohlaví 1:1 •postižení se objeví pouze u homozygotů •častější u příbuzenských sňatku • •Cystická fibrosa, Fenylketonurie, Kongenitální adrenální hyperplasie,Spinální muskulární dystrofie… • Rodokmen - AR dědičnost • Riziko postižení dalšího dítěte dvou přenašečů 25% bez rozdílu pohlaví • 50% dětí dvou přenašečů jsou zdraví přenašeči přenašečka přenašeč zdravý nemocná přenašeči zdraví Rodokmen - obvyklá situace Rodokmen - obvyklá situace Rodokmen – příbuzní partneři Rodokmen - příbuzní partneři AR dědičná onemocnění příklady •Cystická fibrosa (přenašeči 1/26) •Fenylketonurie (1/40) •Kongenitální adrenální hyperplasie – dříve adrenogenitální syndrom (1/40) •Mnohé dědičné poruchy metabolismu •Nejčastější typ vrozené dědičné nesyndromové hluchoty Cystická fibrosa (CF) •Lokalizace 7q •Frekvence nemocných v ČR cca 1/2000 – 1/4000 a více? •Frekvence přenašečů v ČR cca 1/30 •Gen zmapován v roce 1989 •V roce 2002 známo 1002 mutace •V současnosti známo cca 1600 mutací v CFTR genu •Od 10/2009 v ČR novorozenecký screening Nejčastější mutace v CFTR genu 0 % 0,37% E92X 0,37 % 0,55 % W1282X 1,29 % 0,74 % R347 P 0,37 % 1,11 % 2143 del T 0,37 % 2,04 % 1898+1 G-A 5,56 % 2,22 % G542X 1,11 % 3,02 % N1303K 1,85 % 4,03 % G551D 5,56 % 4,64 % CFTR dele 2,3 70,32 % 68,8 % F508del OLG Brno Czech Republic Mutation Spinální svalová atrofie (SMA) •5q12.2-13.3 - gen SMN1 •typ I, II a III • •vyhledávání homozygotů - nemocných - časná postnatální diagnostika •prenatální diagnostika •vyhledování přenašečů Příbuzenské páry •Riziko především vzácných autosomálně recesivně dědičných onemocnění X- Recesivní •postižený je většinou muž, jeho synové jsou zdraví a dcery jsou přenašečky onemocnění •ženy-přenašečky mají 1/2 synů nemocných a 1/2 dcer přenašeček •vzácně výskyt u žen - dcera postiženého muže a ženy přenašečky, ženy s karyotypem 45,X, 46,XY, female…. Rodokmen X- recesivní dědičnost • Žena přenašečka má 50% nemocných synů a 50% dcer přenašeček • Nemocný muž má všechny syny zdravé a všechny dcery přenašečky X XY XX X XY XR – příklady onemocnění •Hemophilia A and B •Duchenneova/Beckerova svalová dystrofie • • •Syndrom fragilního X chromosomu • (X-vázané onemocnění) Duchenneova/Beckerova svalová dystrofie •XR, lokalizace Xp21 •incidence u chlapců asi 1/3-6 000 •dystrofinopathie - chybění proteinu dystrofin ve svalových buňkách •DMD -progresivní dystrofie, úmrtí kolem 20 roku věku •BMD - pomalá progrese DMD/BMD •molekulárně genetické vyšetření – asi 60% mutací jsou velké delece, cca 10% duplikace (vyšetření metodou MLPA) • •vyhledávání žen přenašeček • •prenatální dg. Hemofílie •časná diagnostika •vyhledávání žen - přenašeček •prenatální diagnostika •specializovaná péče o gravidiní - přenašečku Hemofílie, perninatální péče na specializovaném pracovišti, informovaný ošetřovatelský tým Hemofílie •Hem A - Xq28, deficit f VIII •frekvence cca 1/5 000 chlapců • •Hem B - Xq27.1-27.2, deficit faktoru IX •frekvence cca 1/25-30 000 chlapců Autosomálně Dominantní •dominantní mutace na autosomu •vertikální typ dědičnosti •postižení většinou heterozygoti •riziko opakování pro potomky a sourozence 50% bez rozdílu pohlaví •často nové mutace, variabilní expresivita, neúplná penetrance • Rodokmen - AD dědičnost • 50% riziko pro děti nemocného bez rozdílu pohlaví • • Děti zdravého jsou většinou zdravé zdravý nemocný AD dědičná onemocnění •Myotonická dystrofie I a II •Neurofibromatosa •Huntingtonova choroba •Syndrom prodlouženého QT intervalu – dědičné arytmie srdeční •Leidenská mutace v genu pro f V – dědičné trombofilie Preventivní vyšetření - LQT syndrom •10% nosičů mutace má během života klinické potíže, první projev onemocnění může být náhlá srdeční srmt • •diagnostika •vyhledávání nosičů mutace v rodinách •preventivní terapie positivně testovaných na kardiologii •prenatální diagnostika - málo využívaná Trombofilie •trombembolických příhod a u Preventivní vyšetření v rodinách s positivní anamnesou pacientek s opakovanými fetálními ztrátami • •preventivní vyšetření a dispenzarizace na hematologii, předoperační vyšetření apod., vyšetření příbuzných •Preventivní péče v gynekologii v graviditě Leidenská mutace G1691A f V •frekvence v bílé evropské populaci asi 5 - 9% •AD dědičnost •zvýšení rizika trombembolismu u homozygotů 50-100x, u heterozygotů 5-10x •asociace s rizikem časných fetálních ztrát není potvrzena •zvyšuje riziko fetálních ztrát od konce I. trimestru, ve II. a III. trimestru • G20210A f II Prothrombin •v heterozygotním stavu se mutace vyskytuje asi u 2-3% populace •zvýšení rizika trombembolismu •nosičství je spojeno se zvýšeným rizikem fetálních ztrát, abrupce, preeklampsie, IUGR •riziko časných SA není potvrzeno