Odběr a transport biologického materiálu do mikrobiologické laboratoře Jana Juránková OKM FN Brno Specifika odběrů pro bakteriologická vyšetření lSprávný výsledek mikrobiologického vyšetření začíná správným odběrem biologického materiálu a jeho správným transportem do mikrobiologické laboratoře Odběr biologického materiálu lZe správného místa – např. z okraje rány, z místa akutně probíhajícího zánětu apod. lVe správnou dobu – např. hemokultury při třesavce, před podáním antibiotik lOpakovaně – zvýší se pravděpodobnost záchytu infekčního agens lZabránění kontaminace Odběr biologického materiálu lOdběry do komerčních odběrových souprav lPro různé materiály různé odběrové soupravy lSprávná identifikace materiálu Identifikace materiálu lŽádanka, průvodka –Údaje o pacientovi lJméno, rodné číslo, číslo lUžívaná antibiotika lAlergie lDůvod mikrobiologického vyšetření lKontakt s přenosnou chorobou lNosičství Identifikace materiálu – –Údaje o materiálu lDruh materiálu lMísto odběru lČas odběru l Identifikace materiálu lOznačení odběrové souprava –Údaje o pacientovi lJméno, rodné číslo –Údaje o materiálu lDruh materiálu lMísto odběru –Musí být shoda s údaji na žádance Stěry a výtěry l lVýtěr z krku, nosu, ucha, oka, z rány, z kůže, z konečníku, z uretry, z pochvy atd. lSterilní tampon lSuchý – zpracování do 2 hodin po odběru lV transportní půdě –Bez aktivního uhlí –S aktivním uhlím –Možnost uchování až 24 hodin při pokojové teplotě Odběrová souprava P1010155 108 116 Odběrové soupravy – výtěry a stěry – klasické řešení ltyčinka (dřevo, plast, kov) lnamotaný tampón lbez / s transportní půdou –Transportní půda s/bez aktivního uhlí – – – l •Zdroj:Koncept "Liquid Based Microbiology„ (LBM) – TRIOS_Logo Odběrové soupravy – výtěry a stěry - moderní řešení lVýtěry, stěry –Flockované tampony lNylonová vlákna nastřelená na plastovou tyčinky l 108 flocking_process 17SwbClsUp •Zdroj:Koncept "Liquid Based Microbiology„ (LBM) – TRIOS_Logo Duální odběrové soupravy lMožnost vyšetření stěru i mikorskopie při malém množství materiálu lDva tampóny –Stěr pro kultivaci –Stěr pro mikroskopii lOba tampóny zanořené do transportní půdy bez aktivního uhlí Sputum l lOdběr ráno, na lačno, někdy po provokaci expektorace lSterilní široká zkumavka ,,sputovka“ lNe sliny, ale sputum z dolních cest dýchacích lNutno zpracovat do 2 hodin po odběru lUchování při pokojové teplotě Sputum - zpracování lMikroskopie lKultivace semikvantitativní lPostupné ředění sputa lSignifikantní nález v ředění 10-7 l semikvantitativní vyšetření se nehodí sliny – zavádějící výsledek Odběrová souprava _A223328 Sputum - pneumokok Pneumokok_spu Sputum – nehnisavé sliny sputum-nehnisavé-sliny Tracheální aspirát lAspirace do sterilní širší zkumavky lHodnocení semikvantitativní lVětší výpovědní hodnota o infekci dolních cest dýchacích Bronchoalveolární laváž lOdběr ze sterilních podmínek lOdběr do sterilní zkumavky lMikroskopie lZpracování semikvantitativní metodou lSignifikantní nález v množství 104/1ml Odběr moče lOdběr většinou ráno lOdběr za aseptických podmínek po předchozím umytí, případně dezinfekci do sterilní užší zkumavky –První porce při zánětech močové trubice –Střední proud při infekci močového měchýře –Poslední porce při infekcích prostaty a vyšších etáží močové soustavy – Odběr moče l5 – 7 ml moči lUchování při chladničkové teplotě lZpracovat do 2 hod po odběru Zkumavka pro odběr moče _A223325 Odběrové soupravy – moč – moderní řešení IMG_0567 •*Porézní polyurethanová houbička se stabilizátorem •*Nasycení houbičky močí provede pacient nebo ošetřující personál •*Bakteriální buňky jsou jednotlivě zachyceny bakteriostatickou sítí •*Po odstředění je garantován standardní objem vzorku 1 ml (kvantitativní vyšetření!!!) •Zdroj:Koncept "Liquid Based Microbiology„ (LBM) – TRIOS_Logo Odběr moče P1010161 Vyšetření moče lSemikvantitativní lVyočkování kalibrovanou kličkou 1µl lPostupné ředění a vyočkování moče lPřístrojové vyhodnocení množství leukocytů a bakterií lSignifikantní množství 105/1ml Odběr hnisu, punktátu lTekutý materiál vždy, pokud je to možné –Mikroskopie –Širší škála kultivačních půd lOdběr pomocí stříkačky lTransport –Ve stříkačce bez přístupu vzduchu –Ve sterilní zkumavce lUchování při pokojové teplotě l Mikroskopie g+koky ve dvoj v likvoruP1010002 Odběr hnisu P1010156 Odběr tkáně lOdběr za aseptických podmínek lOdběr do sterilní širší zkumavky lUchování při pokojové teplotě Odběr likvoru lOdběr asepticky lumbální punkcí nebo z drénů lTransport ve sterilní zkumavce s pevným uzávěrem lOdběr 2 – 3 ml likvoru lUchování při pokojové teplotě lMožnost odběru a transportu v lahvičce na hemokultury Odběr krve lHemokultivace l lOdběr pro sérologická vyšetření průkazu protilátek Odběr krve na hemokultivaci lDiagnostika sepse lOdběr –při nárůstu teploty, při třesavce –Při kontinuální teplotě kdykoli lVždy venepunkcí –Při přítomnosti katetru zároveň venepunkcí i z katetru, možnost diagnostiky katetrových sepsí lOdběr za aseptických podmínek l Odběr krve pro hemokultivaci lPočet odběrů – 2 – 3x denně lKultivace aerobní a anaerobní l5 – 10 ml krve u dospělých, l0,5 – 3 ml krve u dětí lUchování při pokojové teplotě l Odběr krve na hemokultivaci lVětšinou automatické systémy lVlastní odběrové , transportní a kultivační systémy Lahvičky pro odběr, transport a kultivaci hemokultur lahvičky Odběr hemokultur lLahvičky: –Aerobní FA – světle zelená –K detekci aerobních a fakultativně anaerobních bakterií a hub –5 – 10ml krve –Anaerobní FN – oranžová –K detekci anaerobních bakterií –5-10 ml krve –Pedi PF –žlutá –K detekci aerobních a fakultativně anaerobních bakterií při malém množství materiálu –0,5 – 4 ml krve – l Přístroj BacT/Alert pro kultivaci hemokultur BactAlert 1 Změna barvy při pozitivní kultivaci terčíky Diagnostika kanylové sepse lOdběr krve zároveň z periferie a z podezřelé kanyly lSoučasně odeslat do laboratoře lPrůkaz kanylové sepse: kultivace z kanyly pozitivní o 2 hodiny dříve než kultivace z periferie lNutnost vytáhnout kanylu: Staphylococcus aureus, kvasinky Hemokultury – doba kultivace lCelková doba kultivace negativní hemokultury je 5 dní. l Odběr stolice lVýtěr z konečníku do transportní půdy na obligátní střevní patogeny lKousek stolice pro parazitologické vyšetření do širší zkumavky, nemusí být sterilní lOdběr kousku stolice pro průkaz toxinu Clostridium difficile lLepex – otisk perianálních řas na lepící pásku, průkaz vajíček roupů Transport odběru stolice lVýtěry v transportním mediu – pokojová teplota lStolice na průkaz toxinu C.difficile při ledničkové teplotě l Infekce urogenitálního traktu lVýtěr z uretry lVýtěr z pochvy lVýtěr z cervixu lPři podezření na GO i výtěr z rekta a krku lVýtěr vždy do transportní půdy Infekce urogenitálního traktu lVýtěr do transportní půdy –Běžná aerobní kultivace –Anaerobní kultivace –Kultivace na GO –Diagnostika Ureaplasma urealyticum a Mycoplasma hominis –Kultivace kvasinek Infekce urogenitálního traktu lVýtěr z pochvy doplnit nátěrem na 2 skla –Nátěr zaschnout, nefixovat, nelepit –Mikroskopický průkaz infekce nebo změny ve složení vaginální flóry lPřítomnost leukocytů lPřítomnost laktobacilů lMožnost barvení na Trichomonas vaginalis l Infekce urogenitálního traktu lKultivace Trichomonas vaginalis (zvláštní transportní půda) l –U žen výtěr z pochvy a z uretry –U mužů moč a výtěr z uretry Odběry pro mykologická vyšetření lŠupiny kůže z okraje ložiska sterilním skalpelem do sterilní zkumavky lMokvající plochy – stěr do transportní půdy lNehty – seškrab sterilním skalpelem z okraje ložiska l Pitevní materiál lRychlé provedení, nebezpečí kontaminace lOdběr za aseptických podmínek lStěr do transportní půdy lOdběr části tkáně do sterilní širší zkumavky lUchování při pokojové teplotě Odběr k vyšetření molekulárně – genetickou metodou lTekutý materiál lStěr suchým vatovým tampónem lOdběr bez příměsí chemických látek (heparin, agar) Obecné zásady transportu lCo nejrychleji po odběru do laboratoře –Stěry na suchém tampónu a moče do 2 hodin po odběru lTransportní půdy –Pro stěry a výtěry –Pro hemokultury –Pro hnis a tekutý materiál – materiál sám Uchování materiálu lPokojová teplota –Stěry a výtěry v transportní půdě –Hemokultury –Likvory –Hnisy a punktáty Uchování materiálu lChladničková teplota –4 - 8º C –Moč –Stolice na průkaz toxinu C.difficile –Krev na sérologická vyšetření – Děkuji za pozornost laboratoř 1