Gramnegativní fakultativně anaerobní tyčinky Čeleď •Enterobacteriacae •Vibrio •Pasteurella •Haemophilus Čeleď Enterobacteriacae •Gram-negativní nesporulující tyčinky •Délka 2-3µm, tloušťka 0,5-0,8µm •Fakultativně anaerobní mikroby •Odolné vůči prostředí •Biochemicky aktivní •Komplexní antigenní struktura –Tělové O antigeny –Bičíkové H antigeny –Kapsulární K antigeny Čeleď Enterobacteriacae •Výskyt ve střevě obratlovců –Komenzálové –Saprofyté –Patogeny •Mimo střevo patogeny –Urogenitální systém –Dýchací systém –Rány –Sepse (urosepse) –Meningitidy – – • – Enterobacteriacae faktory patogenity •Endotoxin –Ukotven ve vnější membráně, uvolňuje se po rozpadu buňky •Fimbrie –Schopnost adheze •Exotoxiny –Hemolyziny –Enterotoxiny – Enterobacteriacae laboratorní průkaz •Mikroskopie •Kultivace •Biochemická identifikace –Selektivní diagnostické půdy –Chromogenní agary –Biochemické testy •Antigenní analýza Enterobacteriacae epidemiologie •Přenos fekálně-orální cestou •Přenos potravinami •Endogenní infekce •Původci nozokomiálních infekcí Rody •Yersinia •Salmonella •Shigella •Escherichia •Escherichia •Enterobacter •Klebsiella •Serratia •Proteus •Citrobacter • Yersinia sp. •Obligátně patogenní •Gramnegativní tyčinky pohyblivá při nižších teplotách (25°C) •Množení při chladničkové teplotě •Kultivace půda CIN •Biochemické určení – štěpení močoviny •Antigenní struktura – určení typu O antigenů • • Yersinia enterocolitica •Původce průjmů •Zdroj nejčastěji vepřové maso •Nejčastější sérotyp O3 Yersinia •CIN agar F:\DCIM\100OLYMP\P2121743.JPG Yersinia pseudotuberculosis •Afinita k lymfatickým tkáním kolem střeva •Imitace apendicitidy – bolesti břicha, horečky •Častěji u chlapů Yersinia pestis •Kultivačně nenáročná •Původce moru –Dýmějový mor – po štípnutí blechou morovou,zvětšené a kolikvované lymfatické uzliny – bubony, dýměje –Plícní mor – po vdechnutí yersinií –Septická forma – hematogenní šíření •Úmrtnost 75 – 95% Rod Salmonella •Primárně antropopatogenní salmonely –S.Typhi –S.Paratyphi A, B, C •Primárně zoopatogenní salmonely –S.Typhimurium –S.Enteritidis –S.Infantis –atd., atd., atd. Antropopatogenní salmonely •Původce břišního tyfu a paratyfu •Vstupní brána GIT •Septické teploty •Bolesti hlavy (hlavnička) •Růžové skvrny na kůži •Průkaz přímý: hemokultivace •Průkaz nepřímý : Widalova reakce •Nosičství: žlučník Zoopatogenní salmonely •Nejčastější původce bakteriálních střevních nákaz •Velká odolnost vůči zevním vlivům •Inkubace 12 – 15 hodin •Časté průjmy bez krve •K infekci nutná vysoká infekční dávka (105-108). Diagnostika salmonelózy •Biochemické vlastnosti: štěpení manitolu, využívání citrátu, produkce H2S, štěpení glukózy za tvorby plynu •Kultivace – běžné půdy •Selektivně diagnostické půdy: biochemický klín,Endova půda, XLD, MAL,Hajnova půda •Pomnožení v selenitovém bujónu •Sklíčková aglutinace – určení sérovaru (pro epidemiologické studie) • Salmonella a E.coli na XLD agaru F:\DCIM\100OLYMP\P2111728.JPG Enterobacteriaceae Kultivace •Švejcarova půda = biochemický klín –Selektivní pro gramnegativní bakterie –Průkaz štěpení laktózy –Průkaz produkce sirovodíku –Průkaz tvorby plynu –Průkaz štěpení urey –Průkaz štěpení manitolu –Průkaz štěpení sacharózy Rod Salmonella C:\Users\41730\Documents\P5310268.JPG Rod Salmonella •Neštěpí laktózu •Produkuje sirovodík •Tvoří plyn •Štěpí manitol •Neštěpí sacharózu C:\Users\41730\Documents\P5310268.JPG Rod Shigella •Čistě lidský patogen •Původce bacilární úplavice •Vodnaté průjmy s křečemi •Stolice obsahuje hlen, hnis i krev •Nízká infekční dávka (asi 100 bakterií) •Inkubační doba 3 – 7 dní Diagnostika shigelóz •Nepohyblivé gram negativní tyčinky •Rostou na běžných půdách •Biochemicky méně aktivní, při štěpení glukózy netvoří plyn •Antigenní identifikace podle O antigenů: –Shigella flexneri –Shigella sonnei –Shigella dysenteriae –Shigella boydii Laktóza pozitivní x negativní na MacConkey agaru C:\Users\41730\Documents\P5310264.JPG Rod Escherichia •Escherichia coli •Escherichia vulneris •Escherichia hermanii Escherichia coli •Dobře kultivovatelné •Biochemicky aktivní •Běžná součást střevní flóry •Symbiont: tvorba vitamínu K, produkce kolicinů •Podmíněně patogenní Diagnostika E.coli •Běžné kultivační půdy •Biochemie: produkce indolu, štěpí laktózu •Antigenní analýza (stolice novorozenců) aglutinací E.coli na Švejcarově půdě F:\DCIM\100OLYMP\P2121747.JPG Escherichia na MIU •Vlastnosti: produkce indolu, pohyb • F:\DCIM\100OLYMP\P2121756.JPG Patogenní působení ve střevě •Enteropatogenní E.coli: novorozenecké průjmy, sérotypy O55, O111, O126 •Enterotoxigenní E.coli: cestovatelské průjmy, produkce enterotoxinů, sekrece vody do střeva – vodnatý průjem •Enteroinvazivní E.coli: invaze do střevního epitele – krvavé průjmy • • Patogenní působení ve střevě •Shiga-like toxigenní E.coli – infekce podobná jako u shigel, vyvolávají krvácení ve střevě, vznik systémové infekce a hemolyticko uremického syndromu. Sérotyp O157:H7.Zdrojem infekce je hovězí dobytek. Antibiotická léčba vede k uvolnění toxinů.Kultivace McConkeyho agar se sorbitolem. • Patogenní působení mimo střevo •Uropatogenní E.coli – nejčastější původce močových infekcí •Kmeny způsobující dýchací infekce •Sepse •Infekce ran •Novorozenecké meningitidy Rod Enterobacter •Součást střevní flóry –Enterobacter cloacae –Enterobacter aerogenes –Enterobacter sakazakii –Pantoea agglomerans •Infekce u oslabených pacientů Rod Klebsiella •Součást střevní flóry •Adaptovaná na život mimo střevo •Často opouzdřené •Časté nemocniční infekce – uroinfekce, infekce dýchacích cest •Polyrezistentní kmeny –Klebsiella pneumoniae –Klebsiella oxytoca Rod Enterobacter – Klebsiella na chromagaru • F:\DCIM\100OLYMP\P2111725.JPG Rod Serratia •Více ve vnějším prostředí •Typický původce nemocničních infekcí (dýchací cesty, infekce ran, sepse) –Serratia marcescens –Serratia rubidea (červený pigment) Rod Proteus •Mohutná biochemická aktivita •Výrazná pohyblivost – plazivý růst na pevných půdách (Raussův fenomén) •Výskyt ve střevní flóře, přizpůsobení k likvidaci organických zbytků •Při dysmikrobii ve střevě původce průjmů •Původce infekcí močových cest, infekce dekubitů, bércových vředů Rody Proteus, Providencia, Morganella •Proteus vulgaris •Proteus mirabilis •Morganella morganii •Providencia stuartii •Providencia alcalifaciens Rod Proteus •Plazivý růst na krevním agaru F:\DCIM\100OLYMP\P2111733.JPG Rod Proteus •Štěpí cukry •Produkuje sirovodík •Štěpí ureu • F:\DCIM\100OLYMP\P2121755.JPG F:\DCIM\100OLYMP\P2121750.JPG Rod Citrobacter •Podmíněný patogen ve střevě •Infekce močových cest, sepse –Citrobacter freundii –Citrobacter koseri Biochemická identifikace D:\op - Dokumenty\foto\P1010151.JPG Čeleď Vibrionacae Rod Vibrio •Rozšířené ve vodách v teplejším klimatu •Původce průjmových onemocnění (cholera) •Odolné vůči vyšším koncentracím NaCl (halofilní) •Odolné vůči vysokému pH (alkalofilní) pH10, v kyselém prostředí rychle hynou Vibrio cholerae •Původce cholerových průjmů •Pochází z Indie a Číny •Od r. 1962 probíhá 7. pandemie cholery •V našich zemích poslední r.1970 na východním Slovensku •V r.2002 2 importované případy z Indie a Thajska Vibrio cholerae •Krátké gramnegativní tyčinky, zahnuté do tvaru rohlíčku •Antigenní typizace podle O antigenu •Nejčastější O1 a O139 – vyvolávají epidemickou choleru •Všechna jiná vibria se označují jako nonO1/O139, neaglutinující vibria (NAG) Vibrio cholerae •Biotypy – liší se průběhem onemocnění –El Tor – asymptomatické případy, hemolyzuje –Klasický – cholera asiatica •Subtypy – Inaba, Ogawa, Hikojima •V.cholerae O1 způsobuje z plného zdraví objemné vodnaté průjmy s vločkami hlenu a sliznice (rýžová polévka), rychlá dehydratace, acidóza, smrt • – Vibrio cholerae •Diagnostika v akutním stadiu •Růst na běžných půdách – krevní agar •Selektivní půdy s thiosulfátem, citrátem, žlučí a sacharózou (TCŽS agar) •Množí se v alkalické peptonové vodě, růst v povrchové blance již za 6 hodin – mikroskopie •Aglutinace Rod Aeromonas •Izolovány z masa, mléka, ryb a plodů moře, z vody –Aeromonas hydrophila •Způsobují mírný průjem až po onemocnění podobné choleře •Infekce ran po kontaktu s vodou •Kultivačně nenáročná Rod Plesiomonas •Plesiomonas shigeloides •Izolace z vody, sladkovodních i mořských ryb •Způsobují průjmy a sepse Čeleď Pasteurellaceae •Gram negativní krátké tyčinky až koky •Nepohyblivé •Průkaz oxidázy Rod Pasteurella •Pasteurella multocida •Pasteurella aerogenes •Pasteurella canis Pasteurella multocida •Komenzál horních cest dýchacích u domácích zvířat •Lidské infekce spojené se zvířecím pokousáním nebo poškrabáním •Povrchové infekce kůže až abscesy a osteomyelitidy •Kultivace na krevním agaru Rod Haemophilus •Výskyt na sliznici nosohltanu, součást normální flóry •Gramnegativní drobné tyčinky pleomorfní •Fakultativně anaerobní, růst v atmosféře se zvýšeným obsahem CO2 (5-10%) •Závislost na růstových faktorech –X – hemin –V - nikotinamidadenindinukleotid Rod Haemophilus •Růst na půdách s krví – čokoládový agar •Na krevním agaru – růst s čárou Staphylococcus aureus – satelitový fenomén –Haemophilus influenzae –Haemophilus parainfluenzae • Rod Haemophilus Faktor X Faktor V H.influenzae + + H.parainfluenzae + Haemophilus influenzae •Původně považován za původce chřipky •Hlavní faktor virulence – pouzdro. Podle antigenní struktury pouzdra 6 sérotypů a-f. •Nejdůležitější H.influenzae b. Zavedeno očkování •Kolonizuje dýchací cesty, faringitidy, sinusitidy,epiglotitidy, sepse, meningitidy, otitidy, artritidy, perikarditidy Haemophilus influenzae •Diagnostika: •Odběr do transportní půdy, uchování při pokojové teplotě •Čokoládový agar, krevní agar s čárou Staphylococcus aureus •Disk s bacitracinem pro potlačení flóry HCD •Disky s růstovými faktory Haemophilus ducrey •Původce sexuálně přenosné choroby – měkkého vředu (ulcus molle)