Laboratorní vyšetření v alergologii
hellosehat.com
Přehled metod
• relativní a absolutní počet eosinofilů
• ECP (eosinofilní kationický protein)
• celkové IgE
• specifické IgE
• tryptáza
• BAT (test aktivace bazofilů)
Eosinofily
• mají fyziologickou úlohu při obraně před
mnohobuněčnými parazity
• z patologických procesů se uplatňují při alergickém
zánětu
• jejich zvýšená hladina v krvi se vyskytuje u alergických a
parazitárních onemocnění
ECP (eosinofilní kationický protein)
• hlavní produkt aktivovaných eosinofilů
• slouží k monitorování alergického zánětu
• stanovuje se jeho hladina v séru
• norma: 0 - 24 ng/ml
Celkové IgE
• stanovení hladiny celkových IgE protilátek je pouze
pomocným kritériem při diagnostice alergických
onemocnění, zvýšená hladina může být i u jiných
onemocnění a zdravých osob
• normální hodnoty IgE u dospělých jsou do 100 IU/ml
(=0,00024 g/l … 10 000x méně než IgA,IgM či IgG !)
• měří se nefelometricky:
IgE + protilátka anti-IgE  precipitace
Specifické IgE
• důležité alergologické laboratorní vyšetření
(výhodné zejména když nelze provést kožní testy)
• přítomnost specifických protilátek třídy IgE proti určitému
alergenu značí dispozici k alergické reakci 1. typu
• k detekci se používají citlivé imunochemické metody
schopné zachytit velmi malá množství specif. IgE
• vzhledem k různorodým metodám detekce se koncentrace
specif. IgE v séru udává ve standardizovaných třídách RAST
(RadioAllergySorbent Test)
• tř. I (nejnižší) – tř. VI (nejvyšší)
Specifické IgE
• př. chemiluminiscenční detekce - analyzátor Immulite:
• testovaný alergen je navázán na
pevné fázi (kuličky)
• vazba specif. IgE ze séra pacienta
• vazba konjugátu (protilátka
anti-IgE spojená s enzymem)
• enzym přemění substrát na
chemiluminiscenčně aktivní
produkt (adamantyl-dioxethan)
Specifické IgE
• při vyšetření se používají alergenové extrakty
(pyl stromů, trav, potraviny, plísně, epitel zvířat,
roztoči domácího prachu, jed blanokřídlého
hmyzu...)
• extrakt obsahuje směs látek, z nichž jen některé
jsou pravými alergeny
• při pozitivní reakci na některý alergenový
extrakt je možné dále testovat jednotlivé
alergenové komponenty (např. rekombinantní
alergeny – čisté proteiny získané metodami
genového inženýrství)
Tryptáza
• patří mezi látky uvolňované z žírných buněk
(mastocytů) při jejich aktivaci a degranulaci
• používá se pro potvrzení diagnózy anafylaktické
reakce
• stanovuje se v séru, norma: 0 – 13,5 mg/l
• nejvyšší koncentrace dosahuje za 30 min. až 3 hod.
po anafylaktické reakci, kontrolní odběr se provádí za
1-2 týdny, kdy by měla hladina tryptázy klesnout
• dále se zvýšená hladina vyskytuje při mastocytóze
(nahromadění žírných buněk v kůži aj. tkáních)
BAT
• test aktivace bazofilů
• funkční test – sleduje se aktivace bazofilů in vitro po
expozici alergenem
• plná nesrážlivá krev pacienta se inkubuje s vyšetřovaným
alergenem (v různých ředěních)
• dále je do testu zařazena neg. a poz. kontrola
• alergen se váže přes specif. IgE na FcRI receptoru
• tím dojde k přemostění receptorů
a aktivaci bazofilů, degranulaci,
uvolnění histaminu aj. mediátorů
• na povrchu bazofilů se exprimují
aktivační znaky CD63 a CD203c
• měření pomocí
průtokové cytometrie