Vyšetřované parametry na hematologických analyzátorech a mikroskopicky Bouřková L, OKH FN Brno Parametry krevního obrazu (zkratky) > WBC - leukocyty White Blood Cells (bílé krvinky) > RBC - erytrocyty Red Blood Cells (červené krvinky) > HGB Hemoglobin > HCT Hematocrit > MCV Mean Cell Volume (střední objem RBC) > PLT - trombocyty Platelets (krevní destičky) > NRBC normoblasty > RETI Reticulocyte Diferenciální rozpočet WBC > NEU ^ (neutrofily) > LYM (lymfocyty) > MONO (monocyty) v> > BASO (basofily) > NRBC ^ > > > MCH Mean Corpuscular HGB MCHC Mean Corpuscular HGB Concentracion RDW RBC distribution width (distribuční šíře velikosti RBC) MPV Mean PLT Volume (střední objem PLT) PCT Plateletscrit (trombocrit) PDW PLT distribution width (distribuční šíře velikosti PLT) IPF Immature PLT factor IRF Immature RETI factor Parametry ŕ > *WBC a *DIF (109/L, %) > *RBC (1012/L) > *HGB (g/L) > MCV (fl_) přímo (*) měřený nebo počítaný {HCT/rbc} > HCT(L/L) přímo (*) měřený nebo počítaný {RBCxMCV} > MCH {hgb/rbc} (pg) průměr celkového HGB na jeden erytrocyt > MCHC{hgb/hct}{g/l) průměr koncentrace HGB na jeden erytrocyt > RD\N {zmcv} (%CV) heterogenita velikosti RBC populace > *NRBC(109/U nrbc/ioowbc) - pro klinické účely > *PLT(109/L) > *MPV(fL) > PCT {pltxmpv} (mL/L) > PDW {z mpv} heterogenita velikosti PLT populace > *RETI (109/l_, %) > IRF (podíl) {nezralé RETI/všechny RETI} > IPF (podíl) {nezralé PLT/všechny PLl} > počet krevních buněk dle vybraných *CD znaků (speciální parametr) Poznámka: * = přímo měřené parametry; ostatní parametry jsou počítané Parametry KO - pro laboratorní účely > WBC S vitalita S počet buněk predikujících přítomnost / nástup p roge not ořových buněk CD34+ S susp.počet: tyčí, nezralých granulocytů (IG), blastů, atypických LY S suspektní patologická hlášení > B F (body fluid - tělní tekutiny) S počet WBC PMN - polymorfonukleáry M N - mononukleáry S počet RBC > PLT S počet malých PLTs S počet velkých PLTI S suspektní patologická hlášení nebo sraženiny RBC S podíl: mikrocytů, makrocytů S podíl: hypochromních, hyperchromních RBC S HDW(HGBdistribution width) heterogenita HGB v RBC S střední objem RETI S střední množství HGB v RETI S střední koncentrace HGB v RETI S podíly různě vyzrálých RETI S množství schistocytů (fragmentů RBC) S suspektní patologická hlášení Referenční intervaly KO - pro dospělé > \NBC(109/I) 4,0-10,0 > DIF S NE (%) 45 - 70 S TY(%) 0-4 S LY(%) 20-45 S MO(%)2-12 S EO(%) 0-5 S BASO(%)0-2 S NRBC-nepřítomny > RBC (1012/L) ženy 3,8 - 5,4 muži 4,0-5,9 > HGB (g/L) ženy 120-160 muži 130-176 > HCT (1/1) ženy 0,35-0,46 muži 0,39-0,51 > M C V (fi) 84-96 > PLT (109/l) 150-350 > MCH (pg) 28-34 > MCHC (g/l) 320-370 > RDW (%CV) 10 -15,2 > MPV (fl) 7,8-11,0 > PCT (ml/L) 1,21-3,5 > PDW (z MPV)15.5-17.1 > IPF (96)1,1-6,1 > RETI (109/l) 25-100 > RETI (%) 0,5-2,5 > IRF (1/1) <0,3 doporučení ČHS pro děti i dospělé: http://www.hematology.cz/doporuceni/laboratorni sekce/referencni meze.php Životnost buněk v krevním oběhu > erytrocyty: 110-120 dní > leukocyty: několik hodin až dnů, někdy i roky S neutrofily: 6-7hodin S lymfocyty: záleží na typu jejich diferenciace - až roky S monocyty: 12 hodin až několik dní S eozinofily bazofily: 7-14 dnů > trombocyty: 9-12 dnů Grafické zobrazení analýzy krevních buněk - příklady W>«OM1 wyrtocyo nwtwny^ocyla tanú # ® f t ■ . i--.--: IÍ. : IÍ li il WEJC typas Z? 32 13Z WBC 35 100 200 300 400 fL A RBC 36 100 200 300 f L PLT 2 10 20 -■ 30 fL 2 10 20 30 fL Numerické a grafické výsledky KO Doctor: 0515 28 06 2013 User Delined A: User Delined B: User Delined C: User Delined D: In WBC In 7.64 5.17 0.00 0.00 BLST 0.00 MONe .487 EOS 1.08 BASO .016 LYMe VARL 0.00 Kj?.B. ■■■■■■■■ HCV MCH MCHC SDW hD'/V REIČ 84.8 324. 20.2 f;P.3C [viCvr MCrlr CHO; 0.00 337. 15.7 2.38 RBC PLT RETC In In In 10e9/L WVF .995 67.7 0.00 0.00 %BL 0.00 %Me 6.37 %E 14.1 %B 212 Me \VL 0.00 10e12'L RBCo 9«- %MiG 7.65 U'L WÄ( : 2.76 1 %HP( i F9 Of- %cv % 10e9'L %R 1Ce9'_ NR/W 0.00 1L FS 9/L Í0e9,'Ĺ 353. ÍL — 10:GSDi — mL/L — REC Maiplieloj) 7° - COMPLEXITY Low-Hi FL FL3 - DNA Impedance RBC S EG HETa NORMAL MICRO BAND MYELO ?0LYCH MACRO LYMPH ?" ANISC HOfO E LAST BASOS-lP EOSIN VAR LYM TARGET BASO TOXGRAN SPHERC NREC P LT EST PLT MjRPh Coiimíiil: MFF bii Date ■ 0° ■ SLZE Opilca plt 7° impedance PLT Volume (1L) Volume (1L) Obecná pravidla při hodnocení KO > respektovat princip a specifika (např. linearitu a přesnost) analýzy daného přístroje > hodnotit: S numeriské výsledky (sledovat měřené a počítané parametry) S grafické výsledky S hlášení analyzátoru S zohledňovat a sledovat potenciální interference S hodnotit KO jako celek - nepřesné stanoveni jedné složky ovlivni nepřesné stanoveni jiné složky +klinické důsledky > zohledňovat klinická hlediska: S diagnóza S léčba S historie pacienta S vzhled vzorku (hemolytický ikterický, chylózní) S správný odběr (množství, typ zkumavky) ♦> posuzovat následnou kontrolu mikroskopem normální vzorek patologický vzorek s normálním HCT WBC = 900 x 109/L ikterické vzorky a hemolytické vzorky různé stupně hemolytických vzorků Hodnocení WBC > počet WBC > vyváženost rozpočtu v dif > patologická hlášení ❖ interference - falešné navýšení počtu WBC způsobují: S NRBC (jaderné buňky) ^ rezistentní RBC (nezlyzované erytrocyty v měřícím systému) S holá jádra křehkých rozbitých buněk) S shluky nebo sraženiny PLT ' [ Neuftophits | 7° Complexity HodnoceníRBC parametry: RBC,HGB, HCT, MCV S přímo měřené hodnoty S nelze Sledovat morfologii (MCVje pouze střední objem všech RBC, neinformuje o rozložení celé populace) parametry: MCH, MCHC, RDW + disribuční křivka (šířka, vrcholy) S počítané hodnoty z přímo měřených parametrů S základní přístrojové ukazatele morfologie o MCH, MCHC: normochromie, hypochromie, hyperchromie o RDW + křivka: isocytóza, anizocytóza (homogenní, heterogenní populace RBC) interference - chybné, nesouvisející výsledky pro měřené a počítané parametry RBC způsobují: S shluky nebo sraženiny PLT S aglutinace RBC (např. chladové protilátky) S extrémně vysoký počet WBC S hemolytický, ikterický, chylózní vzorek Unpsdinoi BBC ttipedMlC* BBC Bnpedaac* BBC ~r~i—Ť*T~r—i—' volume (fi) jjjj Impedanční histogramy RBC- RDW normál (a) - normál (b) - mikrocyty (c) - makrocyty Xm.p e dane e j_nxp e dane * v i-1-ř—^-r-'-'- *-r V o 1-um.e (f 1) -i-f=T-r- Volume <£L> Impedanční histogramy RBC - RDW vysoké (a) - příměs makrocytů (b) - vysoký podíl makro (c) - masivně mikrocyty (schistocyty) (d) - mikrocyty + normocyty Morfologie RBC http://www.sekk.cz/infoservis/20Q6 Morfologie erytrocytu.pdf normocyty anizocytóza, anizochromie, tvarové odchylky RBC penízkovatění RBC Howell-Jollyho tělísko ■ aglutinace RBC i polychromázie bazifilní tečkování Cabotovy prstence SchíStOCyty (tvarové odchylky) mechanismus vzniku íriangulocyt keratocyt ANO Hodnocení PLT > parametry: PLT, MPV S přímo měřené hodnoty S nelze Sledovat morfologii (MPV je pouze střední objem všech PLT, neinformuje o rozložení celé populace) > parametry: PDW + disribuční křivky (šířka, rozložení, umístění na ose) S počítané hodnoty z přímo naměřených parametrů S základní přístrojové ukazatele morfologie o isocytóza, anizocytóza (homogenní, heterogenní populace PLT) o netrombocytární elementy ❖ interference způsobují: S Chybné snížení počtu PLT: (SW vyloučí buňky z populace) o makro/gigantické PLT o sraženiny o shluky při falešná trombocytopenie (reakce na soli (KNa)EDTA, satelitóza) S Chybné zvýšení počtu PLT: (SW zařadí buňky do populace) o mikro RBC o buněčné fragmenty (schistocyty, fragmenty leukocytární cytoplazmy...) o netrombocytární příměsy (makromolekuly proteinů, kontaminace reagencií) ❖ kontrola/ověření počtu PLT: S jinou metodou než byla primární analýza o opticky nebo impedančně o imunologicky s antigenem CD 61 S mikroskopicky S analýza vzorku s jiným protisrážlivým činidlem - s kationtem Mg2+ (nebo citrát sodný) Impedanční histogram normál imp e dane e PIT s i impedance plt Volme (fL> i » i-1-1-■-1-1-i-r Vo loam* (fL) (a) T~-1-1-1-1-1-1-1-1-—i-r (b) Impe dane e PIT i i i-1 ■ volume (fL) imp e d-anc e pit Volume (fL) i-1-r i-■-:-r (d) Impedanční histogramy PLT (a) - dolní intrference (b-d) - horní/dolní interference Morfologie PLT fyziologické PLT anizocytóza PLT sraženiny, shluky PLT Vyšetřované parametry a pravidla při mikroskopickém hodnocení preparátů > hodnotit komplexně celý nátěr (WBC, RBC, PLT) > hodnotit buňky v kontextu s celým nátěrem > hodnotit nátěr periferní krve v souvislosti s přístrojovým KO a historií pacienta > minimální běžný počet hodnocených buněk: S periferní krev: 100 leukocytu a evt. nalezený počet NRBC/100 leukocytu S kostní dřeň: 500 jaderných elementů > subpopulace WBC v krvi i KD se uvádí v % > v rovnoměrně rozetřeném místě n&i > zvětšení: L S 1000x (morfologie buněk) S 200x (přehledný náhled na preparát) Hodnocení morfologie WBC > velikost buněk: malé, střední, velké > charakteristika jádra: holá jádra, poměr jádra k cytoplazmě, jaderný chromatin, jadérka (přítomnost, nepřítomnost, počet, velikost), členitost a tvar jádra (hypo-, hypersegmentace NE), velikost jádra > charakteristika cytoplazmy: granulace, bez granulace, specifická (NE,EO,BA), nespecifická, toxická granulace, barevný odstín cytoplazmy, vakuolizace, barevné inkluze, Auerovy tyče, okraje cytoplazmy (členité, hladké, vlasaté) RBC > velikost buněk (MCV, RDW, distribuční křivka) > odchylky: S barevné (MCH, MCHC) S tvarové, inkluze, shluky > jaderné buňky PLT > velikost (MPV, PDW, distribuční křivka) > granulace, hypogranulace > shluky, satelitóza > fragmenty (RBC, WBC) > MGK, holá jádra MGK Příklady přístrojové analýzy krevního obrazu a diferenciálního rozpočtu WBC Normální vzorek Sequence #: 703 Autoloader r38t06 Pati ent/Human Specimen ID: 020003255 Name: RETC In X-B WBC RBC PLT In In In In WBC 7 .88 WVF .992 4.73 60. 1 0.00 0. 00 0.00 0.00 BLST 0.00 %BL 0.00 MONe .483 %Me 6.12 EOS . 186 %E 2 . 37 BASO .051 %B .641 LYMe 2 . 43 %Le 30.8 VAPL 0.00 %VL 0.00 5.22 10e12/L 5.12 ■ 9. 38 mol . 49.0 1 93.9 f\. 1 .80 f»l i^iC-Siv--- 19.2 wet - 12.4 Id 71 . 7 1W.. 1 .38 . 221 0.00 10e9 . ■ 0.00 229. 1W/L ■ 239. 9.59 ---- 16.7 10(GSD) ---- 2.19 ---- Test Selection: CBC+RETC Param Set(Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 04.10.99 13: WBC Differential Bono Pol? I 34 FL3 - DRA Dip«dine « RBC T RTTC Volím* Infekce Sequence ti: 7967 Autoloader Pat i ent/Human Specimen ID: 031273 Name: r04t02 Test Selection: CBC X-B WBC RBC PLT In 1 Out In In WBC 31 .0 WVF .990 17.8 57. 5 9.14 29.5 BAI 2.06 6.65 IG BLST 0.00 %BL 0.00 MONe .637 %Me 2.06 EOS .043 %E .139 B&SO 0.00 %B 0.00 LYMe 1 .29 %Le 4.16 V&PL 0.00 %VL 0.00 P.B;- 3.39 I0e12, L 7-3 r: z, 3.45 HG3 6. 49 ■oVl HCT 33.2 - í - • 98.0 1 .91 f»1 19.5 m\ - 15.3 ICV RETcJ ---- !0e9 . %p ---- IŘF ---- 0.00 0.00 305. 10tí/: 305. 9.00 14.7 lOíGSIi 2. 74 RETC In Param Set(Chart Page) Limit Set: 1 Run Date/Time: 30 VKC Ditť«r«ntii 1 04.99 08:58 Mono Poly I 0m 0»8» Starý vzorek equence #: 1440 Autoloader r93t08 pecimen Type/SubType : Pat 1 ent/Human pecimen ID: JJ5312 ame: LST 8.34 fl 18.0 If(GSB) 2.07 HA 241 Test Selection: CBC Param Set(from Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 08/09/97 14:33 nc Diifinstul Mono Poly I WBC 16.9 IM/l WVF .983 4.21 24.9 0.00 0.00 0.00 0.00 BLST 1.11 HBl 6.52 BLAST .77 MONe .703 Me 4.15 EOS .097 *: .570 0 BASO .056 .333 s LYMe 10.5 %Le 62.0 FP? I VARL .258 1.52 VARLYM .90 Ž 5.36 1M1A 5.11 9.40 Ml/l .460 l/l AC v, 85.9 fl ÍÍCH 1.76 M 20.4 Ml/l 15.5 H ---- IM/l ---- ■ ---- I O.OOslM/l 0.00s 5 I V - COMPlixiT? Lor-Kl PL optic*: pit Chronická lymfatická leukémie Sequence »: 3706 Autoloader r08t02 Pat i ent/Human Specimen ID: 990914696018 Name: X-B WBC RBC PLT RETC l In 2 Out In In In * WBC 207. mn. WVF .843 nvWBC - 8.76 4.24 ■ LYM 195.S %L 94.3S ■ MONO 1 .62 %M .782 EOS 0.00 %E 0.00 o - BASO 1 .34 %B .647 s Test Selection: CBC Param Set(Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 22/09/99 13:20 ntiil Mono Polj> I 3.80 19e12/l 7.31 Ml A .376 l/l 98.9 f I 1 .92 volu** (fL) NRBC ve vzorku Sequence #: 767 7 Open Tube Patient/Human Specimen ID: 990812880018 Name: X-B WBC RBC PLT In In Jn Jn WBC 7.73 mn WVF .957 1 .86 24.1 LYM 3.74 %L 48.4 MONO 1 .78 %M 23. 1 EOS .326 %E 4.22 BASO .020 %B . 258 1 .22810(12/1 1 .28 3.23 Ml/I .141 sl/L 11 5 . Sfl 2.65sfMl 23. Osmí: . 26. 5sl« ----1M/L ------ - - . ---- 5.07 mn 65.6 - 290. mn 285. 8.31 fl 14. 6 10(650! 2.41 il/L RETC Jn ASYM Test Selection: CBC+R Param Set(Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 22/08/99 20:54 nc Ditttrtntul Bono Pol? I :*p«d*nc« PLT ■ • ■ • Voltm* . .840 0.00* « . s 49.6*PltClmp : ' I ■ 1 ... . I 1-1—1—■ I ■ ■—1—1—1—* FU - WA Uridine* PIC Volou (ÍL) Mono Pol; I e^ iia Optieil PLT ALL a fragmenty cytoplazmy Sequence #: 2699 Autoloader r38t02 Pat i ent/Human Specimen ID: 000213479091 Name: RETC In Test Selection: CBC Param Set(Chart Page): Limit Set: 1 Run Date/Time: 21/02/00 1 08 : 57 X-B WBC RBC PLT In 2 Out In In WBC 3.36 10«9/L WVF . 956 . 133 3 . 95 LYM 3.08s %L 91 . 7s MONO . 1 36s %M 4.05s EOS .010 %E . 296 BA SO 0.00 %B 0.00 3.74 10e12/L 3. 78 5.81 iiol/l .287 III 76.6 fl 1 . 55 fiol 20.3 moI/L 17.9 XCV ---- 10*9/1 ---- ---- 0.00 10e9/L 0.00 81 . 5*10e9/L 131 . * 5 .41 *fl ---- 1 5 . 1 *10(650) ---- . 441 «IL/L ---- VBC Dift«r«ntial Mono Po lp I ŕal i dĹľa La " BLAST VARLYM Lo«r-Hl PL Op tic* 1 PLT PL3 - D HA Bnp«&»nc« RBC Imptdanc« PLT Volum« (fL) —i—i-r- Volum* 730. 10e9lt .448 0.00s 10e9/L 215. 10e9/L 8.38 fL 10(GSD) 1.80 mUL 28J_ 0.00s 246. I-?.' anizo ery sferocyty anizo, makro PLT A00776V5AB 031 A00776V5AB 032 A00776V5AB 033 A00776V5AB 034 A00776V5AB 035 A00776V5AB 036 i k:'% V:% ^ A00776V5AB 037 A00776V5AB 038 A00776V5AB 039 A00776V5AB 040 A00776V5AB 041 A00776V5AB 042 A00776V5AB_043 A00776V5AB_044 A00776V5AB_045 A00776V5AB_046 A00776V5AB_047 A00776V5AB_048 A00776V5AB 049 A00776V5AB 050 A00776V5AB 051 A00776V5AB 052 A00776V5AB 053 A00776V5AB 054 sférocyty DOB: 03/21/80 Sex: F Doctor: 0776/31/05/2010 User Defined A; User Defined B User Defined C User Defined D X-B WBC RBC PLT RETC In In In In I Out WBC 7.41 10e9/L WVF .964 5.16 69.7 0.00 0.00 0.00 0.00 BLST 0.00 %BL 0.00 MONe J16 %Me 9.67 EOS .173 %E 2.34 BAS0 .031 %B .420 LYMe 1.32 it VARL 0.00 %vl 10e12/L 9^ l/L 1 30.8 pg 386. g/L 19.8 %CV 730. 10e9/L .448 0.00s 10e9/L 215. 10e9/L 8.38 fL 10(GSO) 1.80 mUL Comment: SEG i>( META V NORMAL micro i/ band i MYELO polích ^ macro y LYIIPH 10 pro HYPOCH ANISO w/ MONO ^ bust y poik BASOSTIP eosin 5 var LYU target baso 4 TOXGRAN SPHERO nrbc PLT EST tAtiJHT pltmorph patologický vzorek žena, 30 roků ambulantní pacientka diagnóza: dědičná sférocyóza Podpořeno MZ ČR - RVO (FNBr, 65269705)