Protokol č. 1
Kalibrace a praktické provedení základních koagulačních vyšetření PT, APTT a FBG na
poloautomatickém koagulometru
Jméno: Nevídalová
Hana Obor:
Datum:
Ročník:
1) Principy stanovení: (doplnit)
· PT:
· APTT:
· Fibrinogen (FBG):
2) Odběr a manipulace s materiálem
(Doplnit odběr – do jakého antikoagulačního roztoku, preanalytické zpracování krve)
3) Přístroje a pomůcky:
ST4 Bio (Stago) – poloautomatický koagulometr
Automatické pipety
4) Spotřební materiál:
Kyvety, kuličky
Špičky modré, žluté
Zkumavky
5) Reagencie:
PT: STA NeoPTimal (králičí tromboplastin)
APTT: STA PTT Automate, STA CaCl[2]
FBG: DG-FIB L HUMAN (lidský trombin), STA Owren-Koller Buffer (diluent)
Kalibrační materiál: DG – REF (kalibrační plazma s udanou hladinou fibrinogenu 2,85 g/l)
Kontrolní materiál: STA Coag Control N+P (atestovaný kontrolní materiál s deklarovaným rozmezím)
6) Pracovní postup: (doplnit)
· Test PT:
· Test APTT:
· Test FBG:
7) Kalibrace:
FBG - provedení kalibrace:
a) Ředění kalibrační plazmy DG-REF pomocí diluentu STA Oweren-Koller Buffer.
b) Výpočet koncentrace jednotlivých ředění kalibrační plazmy. (doplnit do tabulky)
Víme, že ředění 1:20 má koncentraci FBG 2,85 g/l.
c) Měření koagulačního času jednotlivých ředění.
d) Sestrojení kalibrační křivky z naměřených hodnot sekund a vypočítané koncentrace
(osa x – koncentrace g/l, osa y – čas sec.)
ředění
Koncentrace (g/l)
Čas (sekundy)
1:50
46,0
1:40
37,4
1:30
28,1
1:20
2,85
18,9
1:12
11,3
1:8
8,1
PT – provedení kalibrace:
a) Stanovení referenčního času – provedení testu PT pomocí kalibrační plazmy 3x.
b) Z naměřených hodnot vypočítat průměr. (Doplnit do tabulky)
Naměřený čas PT (sekundy)
1.
14,1
2.
14,0
3.
14,0
Průměr:
Referenční čas (neboli čas normálu) =
ISI = 1,05
APTT – provedení kalibrace:
a) Stanovení referenčního času – provedení testu APTT pomocí kalibrační plazmy 3x.
b) Z naměřených hodnot vypočítat průměr. (Doplnit do tabulky)
Naměřený čas APTT (sekundy)
1.
34,0
2.
34,3
3.
34,2
Průměr:
Referenční čas (neboli čas normálu) =
8) Kontroly kvality:
Deklarované rozmezí testů:
PT
STA Coag Control N
12 – 16 sec.
STA Coag Control P
19,5 – 27,5 sec.
APTT
STA Coag Control N
28 – 38 sec.
STA Coag Control P
51 – 67 sec.
FBG
STA Coag Control N
2,30 – 3,45 g/l
STA Coag Control P
0,85 – 1,45 g/l
Výsledky měření kontrol kvality:
STA Coag Control N:
PT = 13,6 sec., APTT = 32,8 sec., FBG = 18,5 sec.
STA Coag Control P:
PT = 22,9 sec., APTT = 55,3 sec., FBG = 24,8 sec.
(V závěru zhodnotit výsledky kontrol kvality, zda vyšly v deklarovaném rozmezí, u fibrinogenu se
musí odečíst g/l z kalibrační křivky).
9) Hodnocení výsledků a referenční rozmezí testů:
PT: výsledky se vyjadřují v sekundách koagulačního času, poměru R a INR
APTT: výsledky se vyjadřují v sekundách koagulačního času a poměru R
FBG: primárně naměřenou jednotkou jsou sekundy koagulačního času, ale výsledky se vydávají
v koncentraci g/l (musí se odečíst z kalibrační křivky)
Referenční rozmezí:
PT
11 – 17 sec.
R, INR = 0,8 – 1,2
APTT
26 – 40 sec.
R = 0,8 – 1,2
Fibrinogen
3,8 – 4,2 g/l
10) Výsledky:
Pacient 1:
PT
Čas = 14,4 sec.
R =
INR =
APTT
Čas = 36, 8 sec.
R =
FBG
Čas = 17,9 sec.
Koncentrace =
(Vypočítat R, INR a odečíst koncentraci FBG z kalibrační křivky. V závěru zhodnotit výsledky
pacienta v souvislosti s referenčním rozmezím)
11) Závěr:
Protokol č. 2
Interpretace výsledků rutinních testů - PT, APTT, FBG, TT, AT, D-Dimery
Jméno:
Obor:
Datum:
Ročník:
· Pacient 1:
Test:
PT
APTT
FBG
(g/l)
TT
(sec.)
AT
(%)
Di-Dimery
(mg/l)
sec.
INR
R
sec.
R
Výsledek:
1,09
15,2
1,08
38,4
1,12
2,55
21,9
111
0,04
Zhodnotit výsledky (↑- prodloužení času/vyšší hladina, N – norma, ↓ - zkrácení času/nižší hladina)
a v případě patologie dopsat doplňující vyšetření:
Závěrečné hodnocení nálezu pacienta 1 (diagnóza, léčba):
· Pacient 2:
Test:
PT
APTT
FBG
(g/l)
TT
(sec.)
AT
(%)
Di-Dimery
(mg/l)
sec.
INR
R
sec.
R
Výsledek:
13,7
1,04
1,03
69,5
2,07
2,57
-
-
-
Zhodnotit výsledky (↑- prodloužení času/vyšší hladina, N – norma, ↓ - zkrácení času/nižší hladina)
a v případě patologie dopsat doplňující vyšetření:
Závěrečné hodnocení nálezu pacienta 2 (diagnóza, léčba):
· Pacient 3:
Test:
PT
APTT
FBG
(g/l)
TT
(sec.)
AT
(%)
Di-Dimery
(mg/l)
sec.
INR
R
sec.
R
Výsledek:
17,5
1,36
1,27
41,3
1,23
1,73
24,8
78
1,23
Zhodnotit výsledky (↑- prodloužení času/vyšší hladina, N – norma, ↓ - zkrácení času/nižší hladina)
a v případě patologie dopsat doplňující vyšetření:
Závěrečné hodnocení nálezu pacienta 3 (diagnóza, léčba):
· Pacient 4:
Test:
PT
APTT
FBG
(g/l)
TT
(sec.)
AT
(%)
Di-Dimery
(mg/l)
sec.
INR
R
sec.
R
Výsledek:
16,3
1,29
1,21
98,5
3,01
4,31
>180
86
2,68
Zhodnotit výsledky (↑- prodloužení času/vyšší hladina, N – norma, ↓ - zkrácení času/nižší hladina)
a v případě patologie dopsat doplňující vyšetření:
Závěrečné hodnocení nálezu pacienta 4 (diagnóza, léčba):
· Pacient 5:
Test:
PT
APTT
FBG
(g/l)
TT
(sec.)
AT
(%)
Di-Dimery
(mg/l)
sec.
INR
R
sec.
R
Výsledek:
12,7
0,95
0,96
64,1
1,91
3,19
-
-
0,20
Zhodnotit výsledky (↑- prodloužení času/vyšší hladina, N – norma, ↓ - zkrácení času/nižší hladina)
a v případě patologie dopsat doplňující vyšetření:
Závěrečné hodnocení nálezu pacienta 5 (diagnóza, léčba):
Protokol č. 3
Vyšetření agregace trombocytů
Jméno:
Obor:
Datum:
Ročník:
1) Abstrakt:
Doplnit, do jaké skupiny testů patří vyšetření agregace trombocytů, uvést nejpoužívanější principy
měření.
2) Princip:
Napsat princip turbidimetrického měření.
3) Odběr a manipulace s materiálem:
Doplnit odběr při turbidimetrické měření (př. typ antikoagulačního roztoku, preanalytické
zpracování krve).
4) Přístroj a pomůcky:
- agregometr APACT 4004
- kyvety
- špičky (modré, žluté)
5) Reagencie (induktory):
Doplnit nejčastěji používané induktory.
6) Pracovní postup:
Doplnit postup turbidimetrického měření (př. typ vyšetřovaného materiálu, doba měření).
Kolagen 2 µg/ml – křivka č. 7
ADP 5 µM – křivka č. 7
ADP 10 µM desagregace – křivka č. 7
7) Výsledky: Do tabulky doplnit výsledky odečtené z přidělených křivek.
Induktor:
ADP 5
ADP 10
Kolagen 2
Amax
(%)
Desagdregace (%)
Slope (%/min)
Doba latence (sec.)
8) Hodnocení výsledků a referenční rozmezí:
Hodnocené parametry
- Maximální amplituda (Amax) – v maximu (reversibilní křivka), v 6. minutě (ireversibilní
křivka).
- Desagregace – jen u ADP v případě reversibilní křivky.
- Doba latence
- Strmost křivky (Slope)
Normální hodnoty
Maximální agregace Kolagen 2 = 74,5 – 87,3 %
Slope Kolagen 2 = 87,8 -125,4 %/min
Doba latence Kolagen 2 = 38,2 – 73,3 s
Maximální agregace Kolagen 5 = 74,7 – 88,9 %
Slope Kolagen 5 = 88,0 – 128,1 %/min
Doba latence Kolagen 5 = 32,4 – 49,9 s
Maximální agregace ADP 5 = 57,0-86,2 %
Slope ADP 5 = 63,9 – 108,0 %/min
Desagregace ADP 5 = 0 - 10%
Maximální agregace ADP 10 = 66,6 – 90,7 %
Slope ADP 10 = 73,2 – 111,0 %/min
Desagregace ADP 10 = 0 - 10%
9) Závěr:
Vyhodnotit odečtené výsledky křivek z tabulky vzhledem k uvedeným normálním hodnotám (norma x
patologie).
Napsat klinický význam vyšetření agregace.
Protokol č. 4
Monitorování antitrombotické léčby
Jméno:
Obor:
Datum:
Ročník:
(Ke všem léčbám doplnit mechanismus účinku a laboratorní sledování, v závěru zhodnotit výsledky
vzorků)
1) Léčba antagonisty vitamínu K
Mechanismus účinku antagonistů vitamínu K:
Laboratorní sledování léčby:
Výsledky:
PT
APTT
Vzorek č.
sec.
R
INR
sec.
R
1
21,6
1,53
1,73
34,7
1,03
2
26,0
1,87
2,24
46,8
1,38
3
48,5
3,44
4,92
62,8
1,86
Závěr:
2) Léčba LMWH
Mechanismus účinku LMWH:
Laboratorní sledování léčby – principu testu:
Výsledky:
Vzorek č.
antiXa - kIU/l
PT
APTT
Sec.
R
INR
Sec.
R
1
0,10
14,8
1,06
1,08
34,9
1,05
2
0,37
16,2
1,09
1,10
33,0
0,96
3
0,62
14,4
1,04
1,05
39,1
1,14
Závěr:
3) Léčba UFH
Mechanismus účinku UFH:
Laboratorní sledování léčby:
Výsledky:
PT
APTT
TT
Vzorek č.
sec.
R
INR
sec.
R
sec.
1
15,9
1,13
1,17
> 180,0
> 5,0
> 180,0
2
13,5
0,96
0,95
67,5
2,0
53,9
3
17,7
1,27
1,37
146,8
4,41
155,8
Závěr – hodnocení výsledků:
4) Léčba DOAC
Mechanismus účinku DOAC:
Xarelto, Eliquis:
Pradaxa:
Laboratorní sledování léčby – princip testů:
Xarelto, Eliquis:
Pradaxa:
Výsledky:
Vzorek:
PT
APTT
TT
1.
lék:
sec.
R
INR
sec.
R
sec.
Xarelto
konc.
13,5
0,96
0,95
31,0
0,92
19,8
20 μg/l
2.
lék:
sec.
R
INR
sec.
R
sec.
Xarelto
konc.
20,8
1,48
1,65
35,1
1,04
20,1
173 μg/l
3.
lék:
sec
R
INR
sec.
R
sec.
Pradaxa
konc.
16,3
1,16
1,21
42,3
1,23
143,9
14 μg/l
4.
lék:
sec
R
INR
sec.
R
sec.
Pradaxa
konc.
19,5
1,38
1,52
71,8
2,12
> 180,0
232 μg/l
5.
lék:
sec
R
INR
sec.
R
sec.
Eliquis
konc.
13,7
0,97
0,96
41,1
1,22
19,3
126 μg/l
Závěr – hodnocení výsledků: