Vyšetřované parametry na hematologických analyzátorech a mikroskopicky Bouřková L, OKH FN Brno Parametry krevního obrazu (zkratky) > WBC - leukocyty White Blood Cells (bílé krvinky) > RBC - erytrocyty Red Blood Cells (červené krvinky) > HGB Hemoglobin > HCT Hematocrit > MCV Mean Cell Volume (střední objem RBC) > PLT - trombocyty Platelets (krevní destičky) > NRBC normoblasty > RETI Reticulocyte Diferenciální rozpočet WBC > NEU ^ (neutrofily) > LYM (lymfocyty) > MONO (monocyty) v> > BASO (basofily) > NRBC ^ > > > MCH Mean Corpuscular HGB MCHC Mean Corpuscular HGB Concentracion RDW RBC distribution width (distribuční šíře velikosti RBC) MPV Mean PLT Volume (střední objem PLT) PCT Plateletscrit (trombocrit) PDW PLT distribution width (distribuční šíře velikosti PLT) IPF Immature PLT factor IRF Immature RETI factor Parametry KO -pro klinické účely > *WBC a *DIF (109/L, %) > *RBC (1012/L) > *HGB (g/L) > MCV (fL) přímo (*) měřený nebo počítaný {HCT/rbc} > HCT(L/L) přímo (*) měřený nebo počítaný {RBCxMCV} > MCH {hgb/rbc} (pg) průměr celkového HGB na jeden erytrocyt > MCHC{HGB/HCT}(g/L) průměr koncentrace HGB na jeden erytrocyt > RDW {z mcv} (%CV) heterogenita velikosti RBC populace > *NRBC (109/L, nrbc/ioowbc) > *PLT (109/L) > *MPV (fL) > PCT {pltxmpv} (ml/l) > PDW {z MPV} heterogenita velikosti PLT populace > *RETI (109/U %) > IRF (podíl) {nezralé RETI/všechny RETI} > IPF (podíl) {nezralé PLT/všechny PLT} > počet krevních buněk dle vybraných *CD znaků (speciální parametr) doporučení ČHS pro děti i dospělé: http://www.hematoloRV.cz/doporuceni/laboratorni sekce/referencni meze.php Poznámka: * = přímo měřené parametry; ostatní parametry jsou počítané Parametry KO - pro laboratorní účely > WBC S vitalita S susp.počet: tyčí, nezralých granulocytů (IG), blastů, atypických LY S suspektní patologická hlášení > B F (body fluid - tělní tekutiny) S počet WBC PMN - polymorfonukleáry M N - mononukleáry S počet RBC > PLT S počet malých PLTs S počet velkých PLTI S suspektní patologická hlášení nebo sraženiny > RBC S podíl: mikrocytů, makrocytů S podíl: hypochromních, hyperchromních RBC S HDW(HGBdistribution width) heterogenita HGB v RBC S střední objem RETI S střední množství HGB v RETI S střední koncentrace HGB v RETI S množství schistocytů (fragmentů RBC) S suspektní patologická hlášení Grafické zobrazení analýzy krevních buněk - příklady W>«OM1 wyrtocyo nwtwny^ocyla tanú # ® f t ■ . i--.--: IÍ. : IÍ li il WEJC typas Z? 32 13Z WBC 35 100 200 300 400 fL A RBC 36 100 200 300 f L PLT 2 10 20 -■ 30 fL 2 10 20 30 fL Obecná pravidla při hodnocení KO > respektovat princip a Specifika (např. linearitu a přesnost) analýzy daného přístroje > hodnotit: S numeriské výsledky (sledovat měřené a počítané parametry) S grafické výsledky S hlášení analyzátoru S zohledňovat a sledovat potenciální interference S h od n ot it KO j a ko ce I e k - nepřesné stanoveni jedné složky ovlivni nepřesné stanoveni jiné složky + klinické důsledky > zohledňovat klinická hlediska: S diagnóza S léčba S historie pacienta S vzhled VZOrku (hemolytický, ikterický chylózní) S správný Odběr (množství, typ zkumavky) ♦> posuzovat následnou kontrolu mikroskopem —I- Doctor: 0515 28 06 2013 User Defined A: User Defined B: User Defined C: User Defined D: X-B WBC RBC PLT RETC In In In In In WBC 7.64 1089/L WVF .995 5.17 67.7 0.00 0.00 0.00 0.00 BLST 0.00 %BL 0.00 MONe .487 %Me 6.37 EOS IW 141 BASO 016 %B .212 LYMs Ve VARL 0.00 %VL 0.00 I0ei2/L R3Co ' g/L %M:G 7.65' UL 2.76 1 %HPC — híí ',:;:< m MC.-: 27J. MC'HC 324. : 201 ..... P.EIČ - VĹ -IffiSG 0.00 IviCVr — MCKr -raj -337. 15.7 2.38 g/L %cv % lOe&'L 10eJ'L IL pg lOei'L IL io:gsdi mL/L % 0.00 353. laiialDfaital AKIoililúii S EG «EU SOUKAL DC" m MYE10 POLYCH "-C" ii'UPH PRO HYPOCH HUSO Volums (IL) normální vzorek patologický vzorek s normálním HCT WBC = 900 x 109/L ikterické vzorky a hemolytické vzorky různé stupně hemolytických vzorků Hodnocení WBC > počet WBC > vyváženost rozpočtu v dif > patologická hlášení ❖ interference - falešné navýšení počtu WBC způsobují: S NRBC (jaderné buňky) ^ rezistentní RBC (nezlyzované erytrocyty v měřícím systému) S holá jádra křehkých rozbitých buněk) S shluky nebo sraženiny PLT ' [ Neuftophits | 7° Complexity HodnoceníRBC parametry: RBC,HGB, HCT, MCV S přímo měřené hodnoty S nelze Sledovat morfologii (MCVje pouze střední objem všech RBC, neinformuje o rozložení celé populace) parametry: MCH, MCHC, RDW + disribuční křivka (šířka, vrcholy) S počítané hodnoty z přímo měřených parametrů S základní přístrojové ukazatele morfologie o MCH, MCHC: normochromie, hypochromie, hyperchromie o RDW + křivka: isocytóza, anizocytóza (homogenní, heterogenní populace RBC) interference - chybné, nesouvisející výsledky pro měřené a počítané parametry RBC způsobují: S shluky nebo sraženiny PLT S aglutinace RBC (např. chladové protilátky) S extrémně vysoký počet WBC S hemolytický, ikterický, chylózní vzorek Unpsdinoi BBC ttipedMlC* BBC Bnpedaac* BBC ~r~i—Ť*T~r—i—' volume (fi) jjjj Impedanční histogramy RBC- RDW normál (a) - normál (b) - mikrocyty (c) - makrocyty Xm.p e dane e j_nxp e dane * v i-1-ř—^-r-'-'- *-r V o 1-um.e (f 1) -i-f=T-r- Volume <£L> Impedanční histogramy RBC - RDW vysoké (a) - příměs makrocytů (b) - vysoký podíl makro (c) - masivně mikrocyty (schistocyty) (d) - mikrocyty + normocyty Morfologie RBC http://www.sekk.cz/infoservis/2006 Morfologie erytrocytu.pdf normocyty anizocytóza, anizochromie, tvarové odchylky RBC penízkovatění RBC Howell-Jollyho tělísko ■ aglutinace RBC i polychromázie bazifilní tečkování Cabotovy prstence SchíStOCyty (tvarové odchylky) mechanismus vzniku: přetržení erytrocytu na fibrinových vláknech O helmovité buňky íriangulocvt schistocyty keratocyt Hodnocení PLT > parametry: PLT, MPV S přímo měřené hodnoty S nelze Sledovat morfologii (MPV je pouze střední objem všech PLT, neinformuje o rozložení celé populace) > parametry: PDW + disribuční křivky (šířka, rozložení, umístění na ose) S počítané hodnoty z přímo naměřených parametrů S základní přístrojové ukazatele morfologie o isocytóza, anizocytóza (homogenní, heterogenní populace PLT) o netrombocytární elementy ❖ interference způsobují: S Chybné snížení počtu PLT: (SW vyloučí buňky z populace) o makro/gigantické PLT o sraženiny o shluky při falešná trombocytopenie (reakce na soli (KNa)EDTA, satelitóza) S Chybné zvýšení počtu PLT: (SW zařadí buňky do populace) o mikro RBC o buněčné fragmenty (schistocyty, fragmenty leukocytární cytoplazmy...) o netrombocytární příměsy (makromolekuly proteinů, kontaminace reagencií) ❖ kontrola/ověření počtu PLT: S jinou metodou než byla primární analýza o opticky nebo impedančně o imunologicky s antigenem CD 61 S mikroskopicky S analýza vzorku s jiným protisrážlivým činidlem - s kationtem Mg2+ (nebo citrát sodný) Impedanční histogram normál Imp e dane e PIT s i impedance plt Volme (fL> i » i-1-1-■-1-1-i-r Vo loam* (ťL) (a) r"-1-1-1-1-1-1-1-1——i-r (b) Impedance PLT i i i-1 ■ volume (fL) Dnpedance plt Volume (fL> i-1-r i-■-:-r (d) Impedanční histogramy PLT (a) - dolní intrference (b-d) - horní/dolní interference Morfologie PLT fyziologické PLT anizocytóza PLT sraženiny, shluky PLT Hodnocení morfologie WBC > velikost buněk: malé, střední, velké > charakteristika jádra: holá jádra, poměr jádra k cytoplazmě, jaderný chromatin, jadérka (přítomnost, nepřítomnost, počet, velikost), členitost a tvar jádra (hypo-, hypersegmentace NE), velikost jádra > charakteristika cytoplazmy: granulace, hypogranulace, specifická (NE,EO,BA), nespecifická, toxická granulace, barevný odstín cytoplazmy, vakuolizace, barevné inkluze, Auerovy tyče, okraje cytoplazmy (členité, hladké, vlasaté) RBC > velikost buněk (MCV, RDW, distribuční křivka) > odchylky: S barevné (MCH, MCHC) S tvarové, inkluze, shluky > jaderné buňky PLT > velikost (MPV, PDW, distribuční křivka) > granulace, hypogranulace > shluky, satelitóza > fragmenty (RBC, WBC) > MGK, holá jádra MGK nesprávné zorné pole Příklady přístrojové analýzy krevního obrazu a diferenciálního rozpočtu WBC Fyziologický vzorek Sex: F Doctor 0717/27/06 2013 UserDelined A: User Defined B: User Delined C: User Defined D: X-B WBC RBC PLT RETC In In In In In 10e9/L WVF .991 54.0 0.00 0.00 %Bl 0.00 %Me 6.11 %i 4.06 %B .m %Le 35.5 Svl 0.00 10el2,'L ! 4.22 g/L .<*l 3.87 *0Q — %h'f'?;.~ WBC 7.36 3.97 0.00 0.00 BLST 0.00 MONe ,450 EOS .299 BAS0 .023 LYMb 2.61 VARL 0.00 ŘBC 4.13 138. .406 98.4 33.5 341. 11.4 m -§ -o.oo LA L =9 % •0e9/L i!1'V 0.00 WEC Diľôrential Mono Poly I 7° ■ COMPLEXITY Low-Hi FL 0" - SIZE Optics) PLT FL3 - DNA impedance RBC impedance PLT 319. lCeS.. 308, 8.03 IL 15.8 10ÍGSD) — 2.56 mĽL ___ % Manual Drfleierial R2C Woptelegy S EG «ET« NORMAL MICRO BAND m: POLYCH MACRO LYMPH PRO -::c- ANISO MOND BLAST ■■j BASOS-'P EOSIN VAR LYM TARGET BASO -: ".\ SNEM NRBC • Volume (IL) Volume (IL) 1* Podpořeno MZ ČR - RVO (FNBr, 65269705) Infekce Sequence ti: 7967 Autoloader Pat i ent/Human Specimen ID: 031273 Name: r04t02 Test Selection: CBC X-B WBC RBC PLT In 1 Out In In WBC 31 .0 WVF .990 17.8 57. 5 9.14 29.5 BAI 2.06 6.65 IG BLST 0.00 %BL 0.00 MONe .637 %Me 2.06 EOS .043 %E .139 B&SO 0.00 %B 0.00 LYMe 1 .29 %Le 4.16 V&PL 0.00 %VL 0.00 P.B;- 3.39 I0e12, L 7-3 r: z, 3.45 HG3 6. 49 ■oVl HCT 33.2 - í - • 98.0 1 .91 f»1 19.5 m\ - 15.3 ICV RETcJ ---- !0e9 . %p ---- IŘF ---- 0.00 0.00 305. 10tí/: 305. 9.00 14.7 lOíGSIi 2. 74 RETC In Param Set(Chart Page) Limit Set: 1 Run Date/Time: 30 VKC Ditť«r«ntii 1 04.99 08:58 Mono Poly I 0m 0»8» Satelitóza trombocytů Sequence «: 9427 Open Tube Specimen Type/SubType: Pat i ent/Human Specimen ID: gruyters Name: Test Selection: CBC Param Set(Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 26/01/99 17:44 Mono Polp X WBC 3.2O*10H/l WVF . 954* ■ 0.00* 0.00* 1 LÍM 2.00* %L 62.6* - MONO . 663* %M 20. 7* i EOS .512* %E 16.0* i BASO .023* %B . 732* o - VARLYM s .50 I HOT RETC 5.00 10V12/L 4.84 9.50 HOl/L .455 L/l 91 .0 fL 1 .90 fHl 20.9 Ml/L 12.4 ICY ---- 1M/L 0.00*1W/L 156. 1M/L 8.48 fl 16.9 10(6«) 1 .32 il/L ---- 0.00* 162. 7* - COMPLZIITY LOV-KX PL Oytlc*! PLT T*p«dtnc« PLT \ ' i l » Voltm. (fL) -t-r- i—r i i l i i trolm* (fL) Monoblasty Mononukleóza Sequence •: 2830 Open Tube Specimen Type/SubType: Patient/Human Specimen ID: Name: Test Selection: CBC Param Set(from Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 03/06/98 10:13 Mono Pol; I WBC LYM MONO EOS BASO 15.0 IMA 3.25s 3.19* 8.36« .024 .136 3.63 1M1/1 6.91 Ml/l .308 l/l 84.9 II 1.90 y 22.4 14.5 WVF *L M %B %B 0.00 IMA Htl/l IM/l 25.9 IMA 8.93 fl 18.9 li(tSI) .231 «A Ikptdinc* PIT VoImm (ÍL) I Volmt (it) Sequence *: 3556 Autoloader Specimen Type/SubType: Patient/Human Specimen ID: 05374 Name: 248. 1M/> 8.34 fl 18.0 If(GSB) 2.07 HA 241 Test Selection: CBC Param Set(from Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 08/09/97 14:33 nc Diifinstul Mono Poly I WBC 16.9 IM/l WVF .983 4.21 24.9 0.00 0.00 0.00 0.00 BLST 1.11 HBl 6.52 BLAST .77 MONe .703 Me 4.15 EOS .097 *: .570 0 BASO .056 .333 s LYMe 10.5 %Le 62.0 FP? I VARL .258 1.52 VARLYM .90 Ž 5.36 1M1A 5.11 9.40 Ml/l .460 l/l AC v, 85.9 fl ÍÍCH 1.76 M 20.4 Ml/l 15.5 H ---- IM/l ---- ■ ---- I O.OOslM/l 0.00s 5 I V - COMPlixiT? Lor-Kl PL optic*: pit Chronická lymfatická leukémie Sequence »: 3706 Autoloader r08t02 Pat i ent/Human Specimen ID: 990914696018 Name: X-B WBC RBC PLT RETC l In 2 Out In In In * WBC 207. mn. WVF .843 nvWBC - 8.76 4.24 ■ LYM 195.S %L 94.3S ■ MONO 1 .62 %M .782 EOS 0.00 %E 0.00 o - BASO 1 .34 %B .647 s Test Selection: CBC Param Set(Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 22/09/99 13:20 ntiil Mono Polj> I 3.80 19e12/l 7.31 Ml A .376 l/l 98.9 f I 1 .92 volu** (fL) NRBC ve vzorku Sequence #: 767 7 Open Tube Patient/Human Specimen ID: 990812880018 Name: X-B WBC RBC PLT In In Jn Jn WBC 7.73 mn WVF .957 1 .86 24.1 LYM 3.74 %L 48.4 MONO 1 .78 %M 23. 1 eos .326 %e 4.22 BASO .020 %B . 258 1 .22810(12/1 1 .28 3.23 Ml/I .141 sl/L 11 5 . Sfl 2.65sfMl 23. osmí: . 26. 5sl« ----1M/L ------ - - . ---- 5.07 mn 65.6 - 290. mn 285. 8.31 fl 14. 6 10(650! 2.41 il/L RETC Jn ASYM Test Selection: CBC+R Param Set(Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 22/08/99 20:54 nc Ditttrtntul Bono Pol? I :*p«d*nc« PLT ■ • ■ • Voltm* p«d*nci PLT L»p«d*nc« PJC ii I i i i i i i VolWK (fl) VolUM (fL) IIC Coin! lite Violation Resistant IIC Interference lith IIC results Unable to Find Clear Separation Between IIC Sitpopilations Lower, Upper, or Lower and Upper Region Interference in PLTi Histogru Lower, Upper, or lower and Upper Region Interference in PLTi Histm.ru Sequence #: 4472 Autoloader r94t09 Patient/Human Specimen ID: JX6223 Name: Test Selection: CBC+R Param Set(Chart Page): 1 Limit Sit: 1 Run Date/Time: 29/06/00 12:56 X-B WBC RBC PLT In In - In WBC 6.47 lOil/l WVF .945 5.55 85.7 LYM .531 %L 8.21 FP? MONO .364 %M 5.63 EOS .028 %E .437 BASO .001 %B .015 3.74 KttiA 3.78 7.96 HOl/l .388 l/l 104. fl 2.13 (Hi :'ICř;C 20.5 ml/I 21.9 XCV ---- lOel/l ---- O.OOslOeS/l 0.00s 75.2 10(1/1 81.3 13.2*11 ---- 1 9 . 7*10(550) ---- VBC Difftrtntiil Mono Poly I .992*11/1 Hutal Differential ISC lorotalou SES (IETA m. MICRO IUD LaTYELO POLYCH HACRC iriPH (PIO HYPOCH HJISO HMO (IUS1 Nil MSOSTIP EOSII (HI LYN TARCET BASO (TOUNI 5PHEI0 UK PLI ESI PL! MORPH CoHent: (IFF kr lite: Ikpt&inct PLT Imp«d*nce PIC VOlUM (fL) Volum« (fL) Lower, Upper, or Lower and Upper Region Interference in Pili Histogru lower, Upper, or lower and Upper Region Interference in Pili Histogru Reakce na EDTA Sequence #: 8950 Autoloader r06t03 Patient/Human Specimen ID: 030074152 Name: KATINKA JOHA PETERSEN X-B In WBC WBC In RBC In Test Selection: CBC Parám Set(Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 02.05.00 09:47 VBC Diff»r«nti»l Mono Poly I 14.8 IleS/L WVF 9.64 0.00 0.00 BLST 0.00* %BL MONe 1.27* %Me EOS .016 Hi BASO .010 %B LYMe 3.92* %Le VARL 0.00* %VL 3.56 10el!/l 7.09 nol/l 33.0 I 92.8 fl 1.99 i: 21.5 nol/l 11.3 XCV ----Mil O. OOs10e9/L 132.*10eS/l 8.99*fl 15.2*11(01] 1.18*11/1 O.OOs 140.*PltClmp FL3 - dha Ďipídinct PLT Hnul Differential HIC Morpholoav ses !bi normu MICRO !iDl POLYCH MACRO iriPH :w HYPOCH miso »ow lun POIK BASOSTIP eosii :»m ni TARGET BASO 1t0igim 5PHE=C HIC Pil esi Pil NOftPH -T "T volum* (ÍL) Volum (ÍL) Unable to Find Cl ear Separation letieen ISC Subpopulat ions Sijnificant Inter of Cells leioved free IIC Differential Analysts Interference liti PU nesults Die to PH Cluipinj Cuient: Sequence #: 2568 Specimen Type/SubType: Patient/Human Specimen 10: IA5285 Name: Test Selection: CBC+RETC Param Set(from Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 22/01/97 12:17 WBC 6.46**}. 4.14* 1.87* .257* EOS .189* BASO 0.00* LYM NONC WVF »: M tl 5.19 10*12 _ 15.7 ::. .454 .. 87.5 !. 30.2 « 34.6 J:. 12.1 1 43.6 Mil .232 0.00**3 J. 45.2**1/1 10.5*'. 16.8*IIIK! .476*-.. nc DiiftMdtul .961* 64.1* 29.0* 3.98* 2.93* 0.00*BAND 5.28 7* - cowLnrrv ■T ;,;.;.>. .840 0.00* : - « . s 49.6*PltClmp : ' I ■ 1 ... . I 1-1—1—■ I ■ ■—1—1—1—* ru - wa ttiftdinci Pit volou (ft) Mono Pol; I a^ iia optieil PIT ALL a fragmenty cytoplazmy Sequence #: 2699 Autoloader r38t02 Pat i ent/Human Specimen ID: 000213479091 Name: X-B In WBC 2 Out WBC 3 . 36 lOeS/L . 133 LYM 3 . 08s MONO . 1 36s EOS .010 BASO 0.00 3 . 74 10C12/L 5.81 HOl/l . 287 L/l 76. 6 fl 1 . 55 fiol KCHC 20 . 3 MOl/L 17.9 :cv ---- 10e9/L ---- 0.00 10e9/L 81 . 5*10e9/L 5 .41 *fl 15. 1*10(6S0) . 441 «IL/L RBC PLT In In WVF .956 3 . 95 %L 91 . 7s %M 4.05s %E . 296 %B 0.00 3 . 78 Test Selection: CBC Param Set(Chart Page): 1 Limit Set: 1 Run Date/Time: 21/02/00 08:57 WBC Differential BLAST VARLYM Low^Hi PL Optical PLT 0 . 00 131 ---- T13 - DMA ImptdUnc« BSC Imp « da n c • PLT • Ill A ...II Volum* (fL) volum« Lower, lipper, or [pier and Upper Region Interference in PITi Histograi Podpořeno MZ ČR - RVO (FNBr, 65269705)