Protokol č. 1 Kalibrace a praktické provedení základních koagulačních vyšetření PT, APTT a FBG na poloautomatickém koagulometru Jméno: Obor: Datum: Ročník: 1) Principy stanovení: (doplnit) · PT: · APTT: · Fibrinogen (FBG): 2) Odběr a manipulace s materiálem (Doplnit odběr – do jakého antikoagulačního roztoku, preanalytické zpracování krve) 3) Přístroje a pomůcky: ST4 Bio (Stago) – poloautomatický koagulometr Automatické pipety 4) Spotřební materiál: Kyvety, kuličky Špičky modré, žluté Zkumavky 5) Reagencie: PT: STA NeoPTimal (králičí tromboplastin) APTT: STA PTT Automate, STA CaCl[2] FBG: STA Liquid Fib, STA Owren-Koller Buffer (diluent) Kalibrační materiál: Standard Human Plasma (kalibrační plazma s udanou hladinou fibrinogenu ………… g/l) Pool Norm (lyofilizovaná směsná normální plazma) Kontrolní materiál: STA Coag Control N+P (atestovaný kontrolní materiál s deklarovaným rozmezím) 6) Pracovní postup: (doplnit) · Test PT: · Test APTT: · Test FBG: 7) Kalibrace: FBG - provedení kalibrace: a) Ředění kalibrační plazmy Standard Human Plasma pomocí diluentu STA Oweren-Koller Buffer. b) Výpočet koncentrace jednotlivých ředění kalibrační plazmy. (doplnit do tabulky) Víme, že ředění 1:20 má koncentraci FBG ………….. g/l c) Měření koagulačního času jednotlivých ředění. d) Sestrojení kalibrační křivky z naměřených hodnot sekund a vypočítané koncentrace (osa x – koncentrace g/l, osa y – čas sec.) ředění Koncentrace (g/l) Čas (sekundy) 1:50 1:40 1:20 1:10 1:7 PT – provedení kalibrace: a) Stanovení referenčního času – provedení testu PT pomocí kalibrační plazmy 3x. b) Z naměřených hodnot vypočítat průměr. (Doplnit do tabulky) Naměřený čas PT (sekundy) 1. 2. 3. Průměr: Referenční čas (neboli čas normálu) = ISI = APTT – provedení kalibrace: a) Stanovení referenčního času – provedení testu APTT pomocí kalibrační plazmy 3x. b) Z naměřených hodnot vypočítat průměr. (Doplnit do tabulky) Naměřený čas APTT (sekundy) 1. 2. 3. Průměr: Referenční čas (neboli čas normálu) = 8) Kontroly kvality: Deklarované rozmezí testů: PT STA Coag Control N STA Coag Control P APTT STA Coag Control N STA Coag Control P FBG STA Coag Control N STA Coag Control P Výsledky měření kontrol kvality: STA Coag Control N: STA Coag. Control P: PT = PT = APTT = APTT = FBG = FBG = (V závěru zhodnotit výsledky kontrol kvality, zda vyšly v deklarovaném rozmezí, u fibrinogenu se musí odečíst g/l z kalibrační křivky). 9) Hodnocení výsledků a referenční rozmezí testů: PT: výsledky se vyjadřují v sekundách koagulačního času, poměru R a INR APTT: výsledky se vyjadřují v sekundách koagulačního času a poměru R FBG: primárně naměřenou jednotkou jsou sekundy koagulačního času, ale výsledky se vydávají v koncentraci g/l (musí se odečíst z kalibrační křivky) Referenční rozmezí: PT 11 – 17 sec. R, INR = 0,8 – 1,2 APTT 26 – 40 sec. R = 0,8 – 1,2 Fibrinogen 1,8 – 4,2 g/l 10) Výsledky: Pacient 1: PT Čas = R = INR = APTT Čas = R = FBG Čas = Koncentrace = (Vypočítat R, INR a odečíst koncentraci FBG z kalibrační křivky. V závěru zhodnotit výsledky pacienta v souvislosti s referenčním rozmezím) 11) Závěr: Protokol č. 2 Interpretace výsledků rutinních testů - PT, APTT, FBG, TT, AT, D-Dimery Jméno: Obor: Datum: Ročník: · Pacient 1: Test: PT APTT FBG (g/l) TT (sec.) AT (%) Di-Dimery (mg/l) sec. INR R sec. R Výsledek: Zhodnocení a doplňující vyšetření: Závěr: · Pacient 2: Test: PT APTT FBG (g/l) TT (sec.) AT (%) Di-Dimery (mg/l) sec. INR R sec. R Výsledek: Zhodnocení a doplňující vyšetření: Závěr: · Pacient 3: Test: PT APTT FBG (g/l) TT (sec.) AT (%) Di-Dimery (mg/l) sec. INR R sec. R Výsledek: Zhodnocení a doplňující vyšetření: Závěr: · Pacient 4: Test: PT APTT FBG (g/l) TT (sec.) AT (%) Di-Dimery (mg/l) sec. INR R sec. R Výsledek: Zhodnocení a doplňující vyšetření: Závěr: · Pacient 5: Test: PT APTT FBG (g/l) TT (sec.) AT (%) Di-Dimery (mg/l) sec. INR R sec. R Výsledek: Zhodnocení a doplňující vyšetření: Závěr: Protokol č. 3 Vyšetření agregace trombocytů Jméno: Obor: Datum: Ročník: 1) Abstrakt: 2) Princip: 3) Odběr a manipulace s materiálem: 4) Reagencie: 5) Pracovní postup: 6) Výsledky: Induktor: ADP 5 ADP 10 Kolagen 2 Kolagen 5 Epinefrin Ristocetin Amax (%) Desagdregace (%) Slope (%/min) Doba latence (sec.) 7) Hodnocení výsledků a referenční rozmezí: 8) Závěr: Protokol č. 4 Monitorování antitrombotické léčby Jméno: Obor: Datum: Ročník: 1) Léčba antagonisty vitamínu K Abstrakt: Princip: Výsledky: PT APTT Vzorek č. sec. R INR sec. R 1 2 3 4 5 Závěr: 2) Léčba LMWH Abstrakt: Princip: Výsledky: Vzorek č. antiXa - kIU/l 1 2 3 4 5 Závěr: 3) Léčba UFH Abstrakt: Princip: Výsledky: PT APTT TT Vzorek č. sec. R INR sec. R sec. 1 2 3 4 5 Závěr: 4) Léčba NOAC Abstrakt: Princip: Výsledky: Vzorek: PT APTT TT 1. lék: sec. R INR sec. R sec. konc. 2. lék: sec. R INR sec. R sec. konc. 3. lék: sec R INR sec. R sec. konc. 4. lék: sec R INR sec. R sec. konc. 5. lék: sec R INR sec. R sec. konc. Závěr: