N á d o r o v á c y t o g e n o m i k a (CYTOGENETIKA A MOLEKULÁRNÍ CYTOGENETIKA) H E M A T O L O G I C K Ý C H M A L I G N I T Márie Jarošova Centrum molekulárni biológie a génové terapie Interní hematoonkologická klinika FN a LF MU Brno Genetika nádorů Nádor je genetické onemocnění, které vzniká jako důsledek kumulace řady genetických změn V ČR je diagnostikováno ročně více jak 90 tis. nových nádorů (ÚZIS: V roce 2015 bylo do Národního onkologického registru ČR (NOR) nově nahlášeno celkem 94 462 případů zhoubných novotvarů (ZN) a novotvarů in situ (dg. C00-C97 a D00-D09 dle MKN-10), z toho 48 666 případů u mužů a 45 796 případů u žen.) Novotvary mízní a krvetvorné tkáně v České republice Celková incidence hematologických malignit prnesáhla v letech 2015-2016 hodnotu 4400 prDÍpaduD rocnnen, prDi dlouhodobeD stabilním pruDmeDrném rocDním ruDstu +0,8 %. Mortalita recentnen mírněn klesá' (rocnnen -0,2 %) a dosahuje hodnoty prniblizDneD 2000 úmrtí rocnnen. DuDsledkem odlisDného trendu ve vývoji incidence a mortality je prudce rostoucí prevalence tenchto onemocněn ní, která v letech 2015- 2016 dosáhla hodnoty temenrn 34 000 osob a rocnnen pruDmeDrneD roste o +4,1 %. 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 průměrnáročnízměna(trend) Incidence 4 341 4 345 4 374 4 410 4 513 4 661 4 410 +0,8% Mortalita 1 965 2 082 1 972 1 931 1 934 1 900 2 068 -0,2% Prevalence 26 405 27 597 28 847 30 055 31 354 32 746 33 793 +4,1 % Incidence a mortalita Prevalence Zdroj: Národní onkologický- registr, ÚZIS ČR Dušek et al, Transfuze a hematol.dnes, září2018 Nádorová cytogenomika Charakteristickou vlastností nádorových buněk jsou chromosomové změny : početní změny chromosomů strukturní změny chromosomů 1 I I 2 U 3 4 5 X H I I i i * ' " " i c H " ' i %% 6 7 8 9 10 11 12 6 7 8 9 10 11 / i « 12 ÔÔ I f • 1 11 / i « i l 13 14 15 16 17 18 13 14 15 16 17 18 • AU A • f • / é * i 19 20 21 22 Y mar 19 20 21 22 Y mar Si Historie cytogenetiky Cytogenetics is the study of the structure and properties of chromosomes, their behaviour during somatic cell division during growth and development (mitosis), and germ cell division during reproduction (meiosis), as well as their influence on phenotype. Cytogenetics also includes the study of factors that cause chromosomal changes. Hare &Singh1979 The Normal Human Chromosome Compl ement \ » V i t * V / - m \ » V i t * V / Albert Levari 1905-1998 \ » V i t * V / Joe Hin Tjjo 1916-2001 III! < HHOMOMOMh M MHKK Oh M\N l- MX,tit*TIM ILMJM U T U Hereditas 42:1-6, 1956 \ U l h t u m m 6 7 8 9 10 11 «2 C HA AJk XXKÄ ft*13 14 J 5 _ D 16 17 18 KS XX 19 20 j 4 A A4 . 2 1 2 2 , 1X Y 1956 - určen přesný počet 46 lidských chromosomů Historie nádorové cytogenetiky Philadelphia chromosome (Phi) Historie nádorové cytogenetiky Philadelphia ch í (Phi) t(9;22)(q34;qll) IS U t i II I I i 1 2 3 4 5 II e II 7 I I 8 H * i l 9 10 í l 11 I I 12 •á 13 Íl 14 •f 15 It 16 «•17 it 18 •t Ü i ! Ii19 20 21 22 Y mar Dr. Rowley received the Lasker Award, given for distinguished contributions to medical science; the National Medal of Science fr^r President Bill Clinton; and the Presidential Medal of Freedom from President Obama, among many other honors (1925-2013) Nádorová cytogenetika Zkoumá získané chromosomové změny * + % nádorových buněk * M ^Jfv Hodnotí početní a strukturní změny Nj u chromosomů Základní metoda - G-pruhovací technika (rozlišení kolem 3-5Mb) V jednom vyšetření analyzuje cely génom Nádorová cytogenomika - metody Konvenční cytogenetická analýza U it M| m y 1 2 3 4 5 mar l i m y y au H »t 10 11 12 H ^ifl M 13 14 15 j < K 15 17 13 IIL9 20 21 22 FISH ,. : 5 i : m BAN D 1 — 1 lä p i i; H 1 l I DiubJicuuraim umyiui i i ™ i i r " 1 1-1 i i n i i ~ r T i " i i r " n " 11 •• "rwri y D C JUU__;il LJILI »J UUUII J HJ U ľ I 1 III Hill I II 1 III 11 II JUUĽUil [ • _ ~ • ••• . r i - • i - •• • — — f'~ if T 1 25 Mb 50 Mb 75 Mb lODHt 125 Mb 15« Mb arrayCGH/SNP array Konvenční cytogenetika O Cell cycle arrest íl )l M SI )l 6 7 8 l ( i\ 13 19 H (í K 4 5 10 i: • i f It* 10 11 12 14 15 16 17 H 20 21 22 í r 18 s S kostní dřeň S periferní krev S uzlina S nádorová tkáň 'V L 1 RPMI-1640 37°C/ 5%C02 I I I I I I 1» I I I •••••• m M b a n d FISH Kombinuje paintingové proby specifické pro danou oblast chromosomu Sondy připravené mikrodisekcí chromosomových oblastí Pruhování pokrývá celý Chromosom 5? í* ľľ*- 5 s * 4 * «5? Převzato I.Chudoba Array CGH komparativní genomová hybridizace Nádorová DNA je hybridizová na společně s kontrolní DNA k hybridizačnímu sklu, na kterém jsou fragmenty genomické DNA/oligonukleotidy •i arrayCGH/SNPs array CGH-ABAC CGH-A Oligo CGH-A B SNP-A Combined CN/SNP-A Test DNA Reference (tumor) Control DNA Differential Labeling Array ĺ OŮSO ôSOt COCO 0040 BAC probes or Oligo probes error Spectral Imbalance gain loss Copy number imbalance Rozlišení aCGH/SNPs ~400kb (25-85-mer oligonucleotides) Test DNA (tumor) ĺ e*8C 600* ŕWff 0000 0000 0000 7 c o (0 c D) CO ÄÄ" ~BB~ Oligo probes of SNP alleles Modeis - m Null model I 1 i MlFW m PMB IM PI.K III.- PI* 1116 HM MA PUB WE B* ULK PMS I.WG Genotyping calls Genotype Intensity- copy numberGeneChip 6.0 (906 600 SNP sequences a 900 000 nonpolymorphic oligonu. ;ot an average spacing of 0.7 Kb, tj 700bp). Dnu. !< m l l Cytogenetics m l l Molecular genetics Genetické změny u hematologických malignit • 90-95% nemocných s chronickou myeloidní leukémií (CML) • 60-80% nemocných s akutní myeloidní leukémií (AML) • 60% nemocných s myelodysplastickým syndromem (MDS) • 50-80% nemocných s chronickou lymfocytární leukémií (CLL) • 70-90% nemocných s akutní lymfoblastickou leukémií (ALL) • 60-90% nemocných s nehodgkinským lymfomem (NHL) • 90% nemocných s mnohočetným myelomem (MM) Cytogenetika v hematologii 1.Diagnosa 2.Prognosa 3.Léčebné rozhodování Filadelfský chromosom (Ph) První specifická chromosomová změna u nádoru člověka Převzato: www.jaypeedigital.com Cytogenetika CM L Diagnóza n U n h m § 90-95% Ph chromosom výsledek translokace t(9;22)(q34;q21) Prognóza Přídatné chromosomové změny Diagnosa CHF: ~12% Akcelerovaná fáze: ~30% Blastická zvrat: ~70% u n *« »« ii s« 13 i: V *fe #1 A* 16 Tí BI •«19 20 21 22 H U 1! II 11 u it n m H u u u e 7 a g io 11 12 ť* «4 i l I t It t i13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 12 !í mar Přídatné chromosomové změny u CML Aberace Frekvence % +8 38 +Ph 30 i(17q) 20 +19 13 -Y 8 +21 7 +17 5 -7 5 t(3;21) 2 Komple xní změny 1 "major" routě změny +8 +der(22)t(9;22) +19 i(17)(q10) "minor" routě změny + 17, + 21 -Y.-7, -17 t(3;21) t(4;6), t(2;16), t(1;21) Mitelman ,Leuk Lymphoma 1993 Prognosa Relativně dobrá +8+Ph,-Y Relativně špatná i(17) Aberace 3q26.3 -7/del7q Wang et al, Blood 201P C h r o m o s o m e 22 C h r o m o s o m e 9 nvbcr M-bcr l l I I V / I I I I I I / / I I I / / I I I / / I I I / / Z > e 1 a 2 p 1 9 Q B C R - A B L ^>b2a2^. f + > P210BCR-ABL ^>b3a2 J *>e19a2 \BO9.p230B C f S -^L Glivec (Imatinib) Glivec (Imatinib) ELN sledování MRN CML cytogenetika Type of Response CHR MCyR CCyR Complete Hematologic Response Major cytogenetic Response Complete Cytogenetic Response Definition Normal differential, WBC & platelets < ULN 0-35% Ph+marrow metaphases 0% Ph+marrow metaphases MMR Major Molecular Response BCR-ABL/ABL < 0.1% (International Scale) M R 4 0 BCR-ABL/ABL < 0.001% (IS) "4-log reduction" MR4 -1 BCR-ABL/ABL < 0.003% (IS) "4.5-log reduction" CMR Complete Molecular Response Undetectable BCR-ABL (test of sensitivity >4.5 logs) C M L - v době léčby inhibitory Generation TKI Approbation Generation TKI 1s t line 2n d line 3r d line *• Imatinib 2003 2001 2nd Nilotinib 2011 2008 2nd Dasatinib 2011 2007 Bosutinib Clinical trial Clinical trial 2014 Ponatinib Clinical trial NIL and DAS have significantly increased apoptosis more than IM by involving both intracellular calcium signaling as well as oxidative stress. WHO Classification Cytogenetika součástí diagnostiky a klasifikace řady hematologických malignit • Cytogenetika je součástí WHO klasifikace AML • Společně s cytomorfologií stratifikuje nemocné s MDS a MPN • Je součástí prognostické stratifikace u CLL • Klasifikace lymfomů - histologie, cytogenetika a FISH potvrzují klasifikační zařazení • Je součástí prognostické stratifikace u MM WHO klasifikace AML The 2016 revision to the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia Daniel A. A r b e r , 1 Attiiio O r a z i . 2 Robert H a s s e r j i a n , 3 J ü r g e n T h i e l e , 4 Michael J . B o r o w i t z , 5 Michelle M. L e B e a u , 6 C l a r a D. B l o o m f i e l d , 7 Mario C a z z o l a , 8 a n d J a m e s W . V a r d i m a n 9 Acute myeloid leukemia (AML) and related neoplasms AML witfi recurrent genetic abnormalities AML with t(8;21)(q22;q22,1);RUNX1-RUNX1T1 AML with inv(16)(p13.1q22) or t(16;16)(p13.1;q22);CBFB-MYH11 APL with PML-RARA AML with t(9;11)(p21.3;q23.3);MLLT3-KMT2A AML with \.(B;9)(p23lq34A)lDEK-NUP214 AML with inv(3)(q2L3q26\2) ort(3;3)(q21.3;q26.2); GATA2, MECOM AML (megakaryoblastic) with t(1;22)(pl3,3;q13.3);flßJWi5-M Wild type NPM1 without FLT3-YTD or with FLT3-|TDl0W(c) (w/o adverserisk genetic lesions) Cytogenetic abnormalities not classified as favorable or adverse Adverse t(6;9)(p23;q34.1); DEK-NUP214 t(v;11q23.3); KMT2A rearranged t(9;22)(q34.1;q11.2); BCR-ABL1 inv(3)(q21.3q26.2) ort(3;3)(q21.3;q26.2); GATA2,MECOM(EVI1) -5 or del(5q); -7; -17/abn(17p) Complex karyotype,6 monosomal karyotype1 Wild type NPM1 and FLT3-\TDhmc) Mutated RUNX19 Mutated ASXLf Mutated TP5^ * Frequencies, response rates and outcome measures should be reported by risk category, and, if sufficient numbers are available, by specific genetic lesions indicated. b Prognostic impact of a marker is treatment-dependent and may change with new therapies. c Low, low allelic ratio (<0.5); high, high allelic ratio (>0.5); semi-quantitative assessment of FL73-ITD allelic ratio (using DNA fragment analysis) is determined as ratio of the area under the curve (AUC) "FLT3-ITD" divided by AUC "FL73-wild type"; recent studies indicate that acute myeloid leukemia with NPM1 mutation and FLT3-\JD low allelic ratio may also have a more favorable prognosis and patients should not routinely be assigned to allogeneic hematopoietic-cell transplantation.57 ' 59,77 " The presence of t(9;11 )(p21.3;q23.3) takes precedence over rare, concurrent adverse-risk gene mutations. e Three or more unrelated chromosome abnormalities in the absence of one of the World Health Organization-designated recurring translocations or inversions, i.e., t(8;21), inv(16) or t(16;16), t(9;11), t(v;11)(v;q23.3), t(6;9), inv(3) or t(3;3); AML with BCFI-ABL1. ' Defined by the presence of one single monosomy (excluding loss of X or Y) in association with at least one additional monosomy or structural chromosome abnormality (excluding core-binding factor AML)."6 9 These markers should not be used as an adverse prognostic marker if they co-occur with favorable-risk AML subtypes. h TP53 mutations are significantly associated with AML with complex and monosomal karyotype,3 7 , 6 6 "6 9 Stratifikace podle cytogenetických nálezů I MRC/NCRI AML Trials: Overall Survival Ages 16-59 100 75 • Š 50 • 25 • t(15;17) (n=607) t(8;21)(n=421) inv(l6)/t(16;l6) (n=284) t(9;11){n=61) t(6;9) (n=42) inv(3)/t(3;3) (n=69) t(9;22) (n=44*) Other t(11q23) (n=60*) t(3;5) (n=25*) -5/del(5q) (n=258*) -7/del(7q) (n=336*) AML with other MDS-related (n=343") 6 8 9 Years from entry 10 _/ £ Grimwade D et al. Blood 2010;116:354-365 15/17 TRANSLOCATION, A CONSISTENT CHROMOSOMAL CHANGE IN ACUTE PROMYELOCYTE LEUKAEMIA S i r , — W e have described a similar chromosomal abnormality in two patients with acute promyelocyte leukaemia Department of Medicine, Franklin McLean Memorial Research Institute, University ot Chiago, Chicago, Illinois 6C637, L'.SA t(15;17)(q22;ql2) J a n e t D, R u w l e y H a r v e y M . G o l o m b C h a r l o t t e D o u g h e r t y PML-RARA Janet D Rowley et al. Lancet 1977 retinoid X receptor Cílená léčba nemocných s APL corepressor ťAHF-FKA coactivator ľril-ťi-vlr^il •it" i t ' I RAUT lk-f r h J j I K r l ^ i i " H r y l n l i r ? n ' ] . J - 2 | i M e A M P - P K A l l * | i H I • ROS * r=.il-.-.-|i'i3-:lrďuin / L > lkt-2 FTP • i'vľiii,: i íi|IÉi+ • * J AKUTNÍ LYMFOBLASTICKÁ LEUKÉMIE (ALL) ALL - heterogenní onemocnění s monoklonální proliferací a expanzí nezralých lymfoidních buněk v KD, PK a dalších orgánech Cytogenetika má prognostický význam Diagnostický význam - imunofenotyp TABLE 2: WHO 2008 classtllcatton of acute Lymphoblastic leukemia (ALL.J Fieccn&or lympliold neoplasms B-eeJI lymphoblastic leukemia/lymphoma, not otherwIsG specified B-co1l lympboWastk lojkemla/lj-mphoma with recurrent fio-nctk abflorronlltlcs Bcel( lymphoblastic lE^kemla/lymphoma with t(9:32Mq34;qU.2); &Cfi-A$ll B*ůll lymphoblastic leukemia/ lymphoma with t í v ; l i q 2 3 h ; MLL rearranged B*ell lymphoblastic leukemia/lymphoma with 1 ( 1 2 : 2 1 ^ 1 3 ^ 2 2 ) : TELAMLl fETVS-FrJWil) Bcelt lymphoblastic leukemia/ lymphoma with hyperpioidy B:.i.'i' lymphoblastic leukemia/ lymphoma with řrypoploidy ^hypodiplotd A l l ] BhsII lymphoblastic Jeukemia/lymphoma with t £ 5 : H H q 3 l : < ] 3 2 ! : H 3 - « 3 H B-uvli lymphoblastic leukemia/ lymphoma w ith t i l : 1 9 H q 2 3 : p l 3 . 3 j : E2A-PBH1 1KP3-PBX1) r.ci?M lymphocytic loukoiTiijylymjmoniJi WHO - HftH4tfíflllkOíE*^J«*^ iiMiflw ÉH, C*mpo f. Huri ti\., pi .1! WHil cli^s, Iwnniin at ajim.iK^OH-ri: jnd •, n-iihoJ H u m . lfH.Fniia ellUtC P h K 1Ů3- IjB. JKH. Doporučení pro vyšetřování dětských BCP ALL Cytogenetika CHILDREN & ADOLESCENTS IAMP21 Low hypodiploidy • Near haploldy • t(17;19Vrcra-HlF 1(%22)/BCR-ABU •• Near haploldy • t(17;19Vrcra-HlF 1(%22)/BCR-ABU High risk • • Near haploldy • t(17;19Vrcra-HlF 1(%22)/BCR-ABU High risk • • Near haploldy • t(17;19Vrcra-HlF 1(%22)/BCR-ABU MLL translocations B-other ALL B-other ALL Intermediate • IGH translocations risk• IGH translocations risk t(1;19)/7CF3-/>fiXJ • High hyperdiploidy • • Good risk t(12;2iyeV6-flL/AiJf7 FISH KMT2A(MLL) BCR/ABL1 TCF3/HLF iAMP -RUNX1 CEP7/8 CRLF2 9p21/JAK2 ABL2(1q25.2) PAX5 (9p13.2) IGH TCF3/PBX1 (UNS) ETV6/RUNX1 CEPX/10 CEP 7/8 A Moorman, Haematologica 2016 Myelodysplastický syndrom (MDS) WHO klasifikace •Refractory cytopenia with unilineage dysplasia (RCUD) •Refractory anemia with ringed sideroblasts (RARS) •Refractory cytopenia with multilineage dysplasia (RCMD) •Refractory anemia with excess blasts-1 (RAEB-1) •Refractory anemia with excess blasts-2 (RAEB-2) •Myelodysplastic syndrome, unclassified (MDS-U) •Myelodysplastic syndrome associated with isolated del(5q) Klinická heterogenita MDS je odrazem heterogenity získaných somatických genetických z m é n Chromosomové zmeny u MDS de novo MDS 40-60% t-MDS nebo sekundárni MDS 90% Prognostická stratifikace MDS Very good n=8Ü(2.9%) Median OS 60.8 months HR 0.47(0.3-0.7) Good n=1844 (65.9%) Single: Normat der(1:7) del(5q) dei(12p) del(20q) Double; Double incl. del(5q) Median OS 48.5 months HR (Ref.) 1.00(0.8-1.3) Intermediate n=578(20.7%) Single: -7/7q- +8 iso(17q) +19 +21 Any other ind. cfones Median OS 25.0 months HR 1.59(1.4-1.9) Poor n=101 (3.6%) Single: der(3)(q21)/ der(3)(q26) Si Double: Double incl. -7/7q- Compiex: 3 abnormales Median OS 15.0 months HR 2.83(2.2-37) Very Poor n=196 (7.0%) Complex: >3 abnormalities Median OS 5.7 months HR 4.37(3.5-5.5) al, 2012 5 q - S Y N D R O M 46,XX,del(5)(q31) )! u n a %/ i t 1 3 4 5 X I I at II 91 ÍS 6 7 8 9 10 11 12 M re *• i l «* &6 13 14 15 16 17 18 ** I 1 - * 19 20 21 Y mar 10 % nemocných dobrá prognóza (5-16 % progrese do AML) intersticiální delece, 5q31, 5q32-5q33 Cílená léčba: lenalidomid azacytidin Lenalidomid - imunimodulační látka Azacytidin (vidaza)- hypometylace DNA CYTOGENETIKA CLL Prognostický význam chromosomových změn u CLL Dohner H, Stilgenbauer S, Benner A, Leupolt E, Krober A, Bullinger L, Dohner K, Bentz M, Lichter P: Genomic aberrations and survival in chronic lymphocytic leukemia. N Engl J Med 2000; 343:1910-1916. CLL and genetic abnormalities: Probability of survival 80- "S- . c 1 60- 3 .—. £~40.92 1 '-j 11q deletion^ =\ leieiion °- 20- Íl7p(p53)h ! deletion Normal Chronická lymfocytární leukémie (CLL) Mutační a cytogenetický model del13q1 del11q22- del17p13 OTCH1 M F3B1 M BIRC3 M MYD88 M BIRC3 del CO o E O I 10 -J— 12 — r ~ 14 Matched general popul. del13q14 Normal/+12 NOTCH1 WSF3B1 M/ del11q22-q23 TP53 D\S/BIRC3 DIS Years from diagnosis Rossi etal. Blood 2013 ;J JJ CLL- prognostická a léčebná stratifikace Category Associated genetic factors Therapeutic strategies Very high risk del(17pr fTP53 mutation and/or RIRC3 mutation p63-independent drugs, BTX inhibitors, allogeneic stem cell lranspla nation High risk mutation .lml.-u] NOTCHi mutation and/or SFJB1 mutation FCR Intermediate risk Trisomy 12 Normal karyotype and FISH Not recommended Low risk Iwiated dei(i3q)B Not recommended Puiggros et al, BMRI 2014 Maligní lymfomy jsou heterogenní skupina nádorů lymfatické tkáně Vznikají na základě genetických změn v původně normálních buňkách Klasifikace lymfomů- histopatologie - WHO klasifikace lymfomů 2008 Cytogenetika a FISH potvrzují klasifikační zařazení Folikulární lymfom (FL) indolentní B buněčný lymfom '20 % všech lymfomů heterogenní klinický průběh , os několik roků až 20 let 90% nemocných má translokaci t(14;18)(q32;q21) Marginal zone;3%CLL type; 7%. Mantle Cell, 6% DLBCL; 31% Follicular; 22% Others; 6% An a plastic large T/nulkell;2% PeripheralTcell; 7% Lymphoblastic; 2% Burkitt/Burkitt-like>An Bioblastic / 3% angiocentric;3% r : 14 .. ^ r t * > ^ 14 t (14.1 B) l e Fúze IGH/BCL2 -V MCL (mantle cell lymphoma) lymfom plášťových buněk Agresivní onemocnění (OS 3-5 let) - 6 % v š e c h NHL Diagnostika: Morfologie Imunohistochemie Imunofenotypizace Genetika: • cytogenetika • FISH • molekulární genetika - PCR MALT; 8% Marginal zone; 3% CLL type; 7% Mantle Cell, 6% DLBCL; 31%-' Follicular; 22% Others; 5% Anaplastic large T/nuJI-celi; 2% Peripheral!" celI; 7% Lymphoblastic; 2% Burkitt/Burkitt-likJ^Angioblastic/ 3% angiocentric;3% MCL (mantle cell lymphoma) lymfom plášťových buněk Konvenční cvtogenetika t ( l l ; 1 4 ) n n n m » i H I I I I I I I I V I I 6 7 8 9 10 11 12 «1 / M I I / M #1 M 13 14 15 16 17 18 tl BÍ •4 • 19 20 21 22 Y mar FISH dual color dual fusion probes H 11 RH 5Z37T—I MYtt.IV Hql3 CCND1 ah mid FGF4 FGF3* HH 4411«—1 r 51(1 kB BWtMflt-H mi IGHC IGHJ i IGiiDl Í401 14 V IGHVI M C KD 60ft KR IgH/CCNDl DC D| Kreatech 5: 7 Nehodgkinské lymfomy (NHL) u dětí 4-7% nádorů u dětí a mladistvých incidence vzrůstá s věkem • zvýšené riziko děti s imunodeficitem (např. AT) • WHO klasifikace 2008 Frekvence histologických subtypů odlišná od dospělých B U R K I T T L Y M F O M ( B L ) 48,X#-Y#del(l)(pl3pter)#+der(l)del(l)(q?24q?ter)t(l;4)(q23;?q?)# +ider(l)(qll)del(l)(q?24q?ter)t(l;4)(q23;?q?)#del(6)(q?15)#+7,t(8;14)(q24;q32)(l.klon-56%) IM I I ( 1 I I I I 1 1 2 3 4 5 X I I * I I I I I I I I 6 7 8 9 10 11 12 I I 13 14 I I 15 t l 16 •• 17 • 1 18 f t 19 •• .20 21 M 22 / Y mar M t M M i t m k$ 8 9 / 13 14 15 I t l i 10 11 12 »» »•16 17 18 J i 19 20 21 22 11/2011 MNOHOCETNY MYELOM MM je B-buněčné nádorové onemocnění, charakterizované nekontrolovatelnou proliferací abnormálních plasmatických buněk v kostní dřeni. BONE MARROW Initiating E v e n t - Translocation - Hyperdipioidy Asymptomatic Transition 1 % p e r a n n u m Transition 1 0 % p e r a n n u m ; • » • S m o u l d e r i n g M y e l o m a ( S M M ) Asymptomatic I Multiple M y e l o m a ( M M ) P E R I P H E R A L B L O O D f Plasma Celt ^1 Leukaemia (PCL) J A — SOLID TISSUES Symptomatic Extra m e du Hary M y e l o m a Accumulation of abnormalities throughout disease: CNV, StJV, methylalion changes walker B B - I > u ü k a 11«: 11 i i i n a l m t i o c e n t r a M G U S - * • i n t i n m e i l u I a r u i e x t r a r n e d u 1 á r n í m y e l o r n T R I S O M I E 3. 5. T. 9, 11 .15,19-21 _ a b n o r m a l i t y v k a i v o t y | > u s e k i i i i i l . n n i l ( | H t r a ii-sl o k.-ĽI c e H V P E R D I P L O I D I E a k t i v u j í c í m u t a c e l i l A P K S T A T 3 s i m i á l i i i f l r á h v a k t i v u j í c í m u t a c e s i m i á I n i d r á h y N F - H B K- FGFR3 T F L A F 3 CYLD N I K a k t i v u j í c í m u t a c e s i m i á l n i d r á h y R B I í l e r e y i i l a c e C - M Y C . « n k o ( | e n u i i i a k t i v u j i c i m u t a c e ™ ™ - s i u i i á l u i d r á h y |>íi3 — TP53 ;J JJ MNOHOCETNY MYELOM 2015 Revised International Staging System for Multiple Myeloma: A Report From International Myeloma Working Group Multistep Pathogenesis of Multiple Myeloma Miihibiip progressive Cytogenetic abnormality OlliFT mallcullr JlHtNItioni H^pefdiploidy I Non-h^trdipVhdf ^— erprelMHi oPtrekA Ol, Ol, iri D3 Bant mnrra™ nn(it>f'l>i«nmi'i!i rn!(iiH* multiple iiiiflcti:, • : . • I .• . rrit Ii PUtffll- cd! SrcoivlAii rjarKtoutiOM~ Oncetefi* j«*5 (C(»l) • G m resorption AflgipgeiifHiq IN EnglJ Med 2011; 364:1046-1060 March 17,2011 TnMa l_^ba™ra Rist Facies 1er MM and die P4S5 Prognos-Ui: Facto1 Crifcra ÜÜ 5GJÜS H in Swurr fr-rr+crogJobufTi < 3.5 ngfL, Mr-am aJbtmn ^ 3.S gW_ No* 1SS stags 1 DX HI 5trinr-. ^.-rrJcrogJubjbi ~— 5.E ng.il OXbv FISH '-ligh räk ^Tessros ah ! 17pJ sr-iJcr translocation -14:1-41 nndtor n a n K x a b c o lll*:lED No high-risk CA\ LDH rJormnl Hgfi Seram LDF? < the upper Lmit D+ nevrnni Serum LDHI > die Lpper Irrrt ot nom-al A new model lor risk stTatnjcalre-n 'cf MM HH5S staej- I II Ml hSS atHge 1 and HandnHtsk CA by iFttH and narnflr LDIN a R-IS5 rags lor ill 123 stage 1II and airhar rcgh-nat Eh by FESHi •Thigh LQH Abbn=viacicri&: CÄ, E h r o n K D n a i abnorrbSr^tiK; iFiSi-, ir-harp-has- Üu^rths • COT!I in siiu hyE-"id-fdncn; IS-S, \r.r .cr-izvarz 1 Staging Sviten. LDH larLalr d=hydn>j=-7inw, MM, multiple myebrna; -FMSS, *evised IrTlBnaticnal Stag na Ey5::-Ti 7 ZAVER •Cytogenetika je nedílnou součástí diagnostických a prognostických stratifikací hematologických malignit •V jednom vyšetření analyzuje celý génom •Dovoluje potvrdit klinickou diagnosu nálezem specifických chromosomových změn •Nenáhodné rekurentní změny určují prognosu onemocnění •Určení změny dovoluje monitorovat účinnost léčby