Ovlivnění výsledků testů biologickými faktory MUDr. Michaela Králíková Biochemický ústav LF MU E-mail: mkralik@med.muni.cz ODBĚR biologického materiálu * nejčastěji ráno nalačno, tzn. od pacienta, který * 10-12 hod. přes noc nejedl a nepil slazené nápoje, kávu, alkohol apod., * byl v klidu (k lékaři nejel na kole ani nešel větší část cesty pěšky), * nekouřil, * nepil kávu a alkoholické nápoje. * provádíme mezi 6. - 8.(9.) hod. ranní. * Vynechat všechny léky, které nejsou nezbytné. * Speciální příprava pro funkční a zátěžové testy. Variace -- kolísání hladiny v čase ovlivněno * pre-analytickými faktory (příprava pacienta, vlastní odběr) * analytickými faktory * vrozenou biologickou variací -- intraindividuální (within-subject) variace (viz. biorytmy) Při stanovení hladiny téže látky stejnou metodou bychom nalezli lehce odlišné hodnoty mezi zdravými jednotlivci -- interindividuální (between-subject) variace. Mezi faktory ovlivňující výsledek analýzy patří: * Věk * Pohlaví * Rasová příslušnost * Menstruační cyklus * Těhotenství * Genetické faktory * Biorytmy * Tělesná poloha * Nadmořská výška * Faktory spojené s životním stylem Mezi faktory ovlivňující výsledek analýzy patří: * Věk * Pohlaví * Rasová příslušnost * Menstruační cyklus * Těhotenství * Genetické faktory * Biorytmy * Tělesná poloha * Nadmořská výška * Faktory spojené s životním stylem * Změna hladin v průběhu života v důsledku přirozeného procesu stárnutí organismu * Změny patrné zvláště v "kritických" obdobích -- novorozenecké období, dětství, puberta, menopauza, stáří Příklady * celková tělesná voda: novorozenec 80% hmotnosti těla, ve stáří 50% * hladina většiny významných enzymů (ALT, AST, ALP, GMT, LD, HBD, CK) vyšší v dětství * v průběhu života postupný nárůst koncentrací např. LDL-chol, hcy * NH3/P 0-1 m. =<100 mmol/l od 1. m. =< 55 mmol/l * K/S 0-1 m. 4,0-7,7 mmol//l dospělí 3,8 - 5,5 mmol/l * Fe/S 0-1 m. 9,0 - 36,0 mmol/l dospělí 10 -25 mmol/l * celk.bil/S 1. t. =<150 mmol/l dospělí =<17 mmol/l * kreatinin 0-2 d. 20-140 mmol/l 2-7 d. 17-100 mmol/l 7-14 d. 15-80 mmol/l 14-28 d. 10-70 mmol/l do 1 roku 17-50 mmol/l 1-5 let 17-60 mmol/l 5-10 let 26-90 mmol/l od 10 let 35-110 mmol/l * Stejné hodnoty u dětí i dospělých mají např. pH a osmolalita. Mezi faktory ovlivňující výsledek analýzy patří: * Věk * Pohlaví * Rasová příslušnost * Menstruační cyklus * Těhotenství * Genetické faktory * Biorytmy * Tělesná poloha * Nadmořská výška * Faktory spojené s životním stylem * Odlišné hodnoty především od nástupu puberty * pohlavní hormony a jejich metabolity * Fe/S, ferritin * hemoglobin * lipoproteiny * kreatinin * kyselina močová * homocystein * ALT, AST, ALP, GMT, LD, CK * CRP Mezi faktory ovlivňující výsledek analýzy patří: * Věk * Pohlaví * Rasová příslušnost * Menstruační cyklus * Těhotenství * Genetické faktory * Biorytmy * Tělesná poloha * Nadmořská výška * Faktory spojené s životním stylem Např.: * Afroameričané nižší glukózová tolerance než běloši * Afroameričané vyšší celková CK a LD než běloši * Hispánci a Afroameričané vyšší AFP a hCG * Afroameričané o 8 - 12% vyšší Cu /S Mezi faktory ovlivňující výsledek analýzy patří: * Věk * Pohlaví * Rasová příslušnost * Menstruační cyklus * Těhotenství * Genetické faktory * Biorytmy * Tělesná poloha * Nadmořská výška * Faktory spojené s životním stylem Ovlivněny zejména: * Estradiol * FSH * LH * Progesteron * Homocystein Mezi faktory ovlivňující výsledek analýzy patří: * Věk * Pohlaví * Rasová příslušnost * Menstruační cyklus * Těhotenství * Genetické faktory * Biorytmy * Tělesná poloha * Nadmořská výška * Faktory spojené s životním stylem * Změna hladin * Estradiol * FSH * LH * Progesteron * Prolaktin * hCG * Homocystein 2) * Narůstající objem plazmy způsobí hemodiluci. * Zvyšuje se glomerulární filtrace (kreatininová clearance může narůst až o polovinu). * Zvyšuje se celkový objem moči, zvláště během 3. trimestru (o 25%). * Zvýšená metabolická potřeba způsobuje růst sérových hladin apolipoproteinů, triglyceridů a celkového cholesterolu. Mezi faktory ovlivňující výsledek analýzy patří: * Věk * Pohlaví * Rasová příslušnost * Menstruační cyklus * Těhotenství * Genetické faktory * Biorytmy * Tělesná poloha * Nadmořská výška * Faktory spojené s životním stylem * zvýšené či snížené hladiny příslušných biochemických parametrů u heterozygotů, např. phe/S u heterozygotů PKU, a1-antitrypsin u heterozygotů AAT deficiency, hcy/P u heterozygotů MTHFR při deficitu folátu aj. Mezi faktory ovlivňující výsledek analýzy patří: * Věk * Pohlaví * Rasová příslušnost * Menstruační cyklus * Těhotenství * Genetické faktory * Biorytmy * Tělesná poloha * Nadmořská výška * Faktory spojené s životním stylem Řada parametrů vykazuje cyklické změny * v průběhu roku (sezónní variace), * týdnů * dnů (cirkadiánní, diurnální variace) * Tyto pravidelné změny nazýváme intraindividuální variace. Sezónní variace * vitamín D vyšší v létě (délka osvitu) * hormony štítné žlázy nižší v létě (20%) Kolísání ze dne na den * o < 1% Na, Cl, Ca * o 4-10% chol, kreatinin, K, k. močová, fosfát, fosfatázy * o 15-21% urea, lipidy, AST * až o 30% Fe, ALT * Albumin a celk. bílkovina se v delších časových úsecích mění o cca 30%. Cirkadiánní variace * kortizol maximum kolem 6. hod. ranní dopoledne 250-650 nmol/l odpoledne 50-280 nmol/l * Fe odpoledne až o 30% nižší * kreatinin odpoledne o 10-20% vyšší * sekrece růstového hormonu maximum ve spánku krátce po půlnoci * aj. * Absence očekávaného biorytmu může ukazovat na přítomnost onemocnění. * Měření hladin v průběhu cyklu je nejjednodušším dynamickým funkčním testem. * Odběr vzorku směřovat do vhodného období cyklu podle klinických požadavků. Mezi faktory ovlivňující výsledek analýzy patří: * Věk * Pohlaví * Rasová příslušnost * Menstruační cyklus * Těhotenství * Genetické faktory * Biorytmy * Tělesná poloha * Nadmořská výška * Faktory spojené s životním stylem *Vliv hydrostatického tlaku. * Hladina vysokomolekulárních látek vestoje o 10-15 % vyšší než vleže. (Cave "pseudopokles" např. lipoproteinů u dlouhodobě ležících pacientů.) 0MHladina adrenalinu a noradrenalinu vestoje téměř dvojnásobná než vleže. většinu odběrů provádíme sedícímu pacientovi Mezi faktory ovlivňující výsledek analýzy patří: * Věk * Pohlaví * Rasová příslušnost * Menstruační cyklus * Těhotenství * Genetické faktory * Biorytmy * Tělesná poloha * Nadmořská výška * Faktory spojené s životním stylem Nárůst hladin * Hematokrit << (rozdíl hladina moře -- 1 400 m.n.m. o 8%) * Hemoglobin * Erytropoetin * CRP (hladina moře -- 3 600 m.n.m. o 65%) Nárůst hladin * Hematokrit << (rozdíl hladina moře -- 1 400 m.n.m. o 8%) * Hemoglobin * Erytropoetin * CRP (hladina moře -- 3 600 m.n.m. o 65%) Mezi faktory ovlivňující výsledek analýzy patří: * Věk * Pohlaví * Rasová příslušnost * Menstruační cyklus * Těhotenství * Genetické faktory * Biorytmy * Tělesná poloha * Nadmořská výška * Faktory spojené s životním stylem Faktory spojené s životním stylem * Výživa * Prolongované lačnění * Tělesná zátěž * Kouření * Kofein * Alkohol Faktory spojené s životním stylem * Výživa * Prolongované lačnění * Tělesná zátěž * Kouření * Kofein * Alkohol * strava bohatá na tuky: -^ TAG, chol * strava bohatá na bílkoviny: -^ urea, k. močová * vegetariáni -v kyselina močová, urea, amoniak, LDL-chol, HDL-chol * bezprostřední přívod potravy: -^ glc, TAG, k. močová, Fe, Na -v LD * U těchto látek nutno dodržet odběr nalačno! Další příklady ovlivnění testů: * vyšetření okultního krvácení: nedodržení diety bez zdrojů krve a Fe * vyšetření clearance: nedostatečný přívod tekutin Faktory spojené s životním stylem * Výživa * Prolongované lačnění * Tělesná zátěž * Kouření * Kofein * Alkohol = lačnění delší než 24 hod. * v játrech glykogenolýza (-> glc - zdroj energie pro CNS a ery) * ve svalu proteolýza (využití AK pro glukoneogenezu) * v tukové tkáni odbourávání TAG, vzniká glycerol (-> glukoneogeneza) a MK (přímý zdroj energie pro myokard, svaly a ledviny + v játrech -> ketolátky) * -^ TAG, MK, glycerol * -v glc * -^ bil (hlavně při Gilbertově sy, až o 240%) Faktory spojené s životním stylem * Výživa * Prolongované lačnění * Tělesná zátěž * Kouření * Kofein * Alkohol * Vede ke změnám koncentrace všech látek, které se bezprostředně podílejí na energetickém metabolismu, tj. laktátu, MK, glc aj. * Mění se pH, pO2. * Dochází ke změně hladiny bílkovin (vlivem odlišné distribuce vody a nízkomolekulárních látek). * Zvyšuje se CK, ALT, fosfát, kreatinin, klesá T4. * Při dlouhodobém cvičení se zvyšuje i koncentrace pohlavních hormonů. Faktory spojené s životním stylem * Výživa * Prolongované lačnění * Tělesná zátěž * Kouření * Kofein * Alkohol Kuřáci: * vyšší HbCO (až 8%) * nižší hladina vit. B12 * vyšší celkový chol a TAG, nižší HDL-chol * Cave kuřáctví jako rizikový faktor. Faktory spojené s životním stylem * Výživa * Prolongované lačnění * Tělesná zátěž * Kouření * Kofein * Alkohol * inhibice fosfodiesterázy -> -^ cAMP -> -^ glykolýza -> -^ energie + pohotovost (alertness) organismu štěpení TAG -> -^ glycerol a MK * -^ renin a katecholaminy (do 3 hod. po konzumaci) Faktory spojené s životním stylem * Výživa * Prolongované lačnění * Tělesná zátěž * Kouření * Kofein * Alkohol akutní x chronické účinky * rychlost odbourávání = 0,15o/oo / hod. (kinetika 0. řádu) * může -^ k. močová a laktát (MAc) -v glc * -^ ALT, AST, GMT * hepatotoxicita Laboratorní výsledky doplňují, ale nenahrazují klinický nález (supplement, but not supplant).