1
BÍLKOVINY KREVNÍ PLASMY
© Biochemický ústav LF MU   (V.P.)   2006
2
BÍLKOVINY KREVM PLASMY
v-              HB!^-£^ ■--.                                   —ijTÍraiwrtMMtwTTiiriir ttti'mi i n tťi ímh ' 'iiiMMifctttiíriaťttitMtai
dělení podle funkce:
1/ transportní proteiny 2/ proteiny (reaktanty) akutní fáze 3/ proteiny srážení krve 4/ proteiny imunitního systému 5/ regulační proteiny
6t proteiny a jejich fragmenty uvolňované při degradaci nebo poškození buněk a tkání
j
Elektroforéza proteinů lidské plazmy
(acetylcelulosa, pH = 8,6)
elektroforeogram
denzitometrické vyhodnocení
é?
■č   é    t

Alb.      Alpha.)  Alpha2   Beta
Gamma
Proteinové frakce lidské krevní plazmy
Proteinová frakce	% z celkových proteinů plazmy	Např.	
albumin	59,2	prealbumin (transthyretin) albumin	PREA ALB
Otj-globuliny	3,9	a,-gíykoprotem (kyselý) a.,-antitrypsin oc,-lipoprotein (MDL)	AÍAG AiAT
(X2-gIobuIiiiy	,   7,5	ceniioplasmin haptoglobin oc2-makroglobulm	CPL HPG A2M
ß-globuliny	12,1	hcinopexin (ransfcrrin fibrinogen (3-lipoprotein (LDL)	IIPX TRF FBG
y-globuliny	17,3	IgM, ígA, IgE, IgD, IgG	
Haptoglobin (Hp)
a2-globulin krevní plasmy, glykoprotein (Mr= 86.000). Váže volny Hb, pokud se abnormálně vyskytuje v krevní plasmě. (2 Hb : 1 Hp) —» RES jater (Kupffe-rovy bb.)
[Existují 3 genetické varianty, složené ze 2 druhů bílkovinných řetězců („1 a 2" nebo „a a ß"), které se kombinují ve dvou podjednotkách. Výsledek je Hp 1-1, Hp 2-1 a Hp 2-2].
Hemopexin (Hpx)
ßrglobulin krevní plasmy (Mr= 57.000). Váže v krevní plasmě volny hem.
7
MONOCLONAL
GAMMOPATHY
m
CJ Normal Pattern
m
Abnormal Changes
POLYCLONAL GAMMOPATHY
PROTEIN LOSS THROUGH INTESTINE
ACUTE PHASE RESPONSE
\
ii >é-ai.»»aihiji,w ,i.  i. i  ,; h .ri.i.MjL.i^-lMaiaftMiaWitOfiiaHI
		NEPHROTIC SYNDROME
		R ecovery—Acute
		Thermal Burns
		Alpha-2
J            1 i                    1 I   ■■    ■      í 1    "' :' ' ■ ■"■    j		,Macrogiobuim \ WM
	.   " ■■■	'I' ■                                                                                                                               *
		1          ÄS
		.U^^^-Äí^
		
Cystatin C,   clearance:
Kreatininová clearance je nahrazována clearancí cystatinu C.
Je to nízkomolekulární bílkovina, která má v extracelulárních
tekutinách funkci inhibitoru cysteinových proteas (odtud název:
Cys + statin).
Cystatin C je rovnoměrně uvolňován z buněk do krevního oběhu,
kde jeho koncentrace je stálá (nezávislá např. na zánětlivých
stavech).
[Cystatin C vykazuje větší intraindividuální variabilitu, ale menší
interindividuální variabilitu ve srovnání s kreatininem. To
umožňuje časnější odhalení poškozené ledvinové funkce.]
V ledvině je vylučován výhradně glomerulární filtrací (kreatinin
také v nepatrné míře tubulární sekrecí!).
Stanovuje se imunochemicky. Určitá omezení diagnostického
významu lze očekávat u některých onkologických pacientů a
u nemocných po transplantaci ledvin.)                                 13
Micral test (mikroalbuminemie)
diabetes:
neenzymová glykace kolagenu v bazálni membráně glomerulů
hypertenze:
zvýšený filtrační tlak
í
I      . :;:; :;--;-:;-Ť:.■■:-:;■->:■
I          ■-----1-----1—i-----———-    -        —i—■—■—■-----1-
1
bOŮŮCifiMůi
m
ms^^-^^
^
IL
5
6   7
™    /   /1^H^^hMM^H^^H^H^H
1.   nosná fólie
2.   „zásobník" moče
3.   pufrovací zóna.
4.   protilátka značená zlatem
5.   zóna se zakotveným   albuminem (k zachycení přebytku protilátky)
6.   zóna barevné reakce
7.   průsvitná fólie
14
-ViSIlBl
í-IUlinihait
MrtK MAK
«hÄE*
MSrt
taG"

MANNHEIM
„Albumin < 20 mg . ľ1"
(v ranní moči)
15
Miera!-!
ÍT^
16
17
18
3ÍLK0VINA
-řiltracní bariéra
praktická neprostupnost
s> pro proteiny   Mr > /SO. 000
^ pro proteiny    Mr > CO. OVO vna.ji'-/i výrazný neacctívn^ naboj
ftransřerin Mr= S°.000 • w C albumin  Mr - 67000 J (srwnej:   almtrulasňť práttinurie!)
-   tubular ní resorpce/pinocytoza) temer všech proteini primárni' r» oče
S M r < 7S.O00    /srowej: tubularhľ r                        I           w    proteinuria)
Pre tejny AJ poškozených   bb, á) Ta. f chronická' e***-Z) pnlntk p/omn*y knrglcvhť
Moč ssdravych obsahuje
<~ albumin < 20 m^/d' f primer 3-£}*al9*
-  Musely (*4-fó&ř^jfSXl«*J°»ßft
~ lysosym                            < 0j&
-  /áy- mikroalobulin ^32M&~
Proteinurie
19
E lek tro řoréza     SDS - PA&
e
nr~f
'rwaao ^
4SI
n
•'í
tri-
tt
JSrs-75-
Proteinurie
®
A4AT
i©
31       i'í        ■«.  41.
Hbz   j        Mb j /W/U           »P      S2M6
r      1; /
alomerulosrhi "selekbi'vm''
S
loynervIcĹrni' necelekti'vm
r
íubulárnZ
tubuldrhť inkomplett!
/oortrenílhť cl   smířené
vteproti*pM£t q lo menil u, >J£0
< ?r a řfornieilm   tubu laur »ľ r*sorpc-c
M?
bi7k*H»y i ryr«t*yfti M nabejem
LEDVIN*.
Proteinurie
20
Typy pro tein u rií
Elektroforeogram SDS-PAGE
Mr. io-
cs
00
I
150
C u
89
"č3
67
	-S
	1
	&
S	J3
	>>
	•>>
+J	en
c	>»
«	y
54     44
T3
32
C
£
(0
N
-m >
22
Proteinurie
i
o c
o
s
.c
o
"ob
I
(S
0Q.
1     ■   I   I       ■     I   ■  I
+
16      12
glomeralární selektívni
H
neselektivní glomerulární
tubulární nekompletní
tubulární
Mikroalbuminurie (20 - 300 mg/d) - časný indikátor začínající diabetické nefropatie
21
22