MOŽNOSTI DETEKCE LIKVOREY
Z.Čermáková,H.Novotná,
J.Gottwaldová
OKBH FN BRNO
Pracovní den Brno 14.11.2007
logo%20FNB%20kopie

LIKVOREA
n
nZávažný stav s komunikací likvorových cest a nosní nebo středoušní dutiny
nKomplikace – bakteriální meningitida,
n                       mozkový absces
nVysoká mortalita
n
n
n
n







PRŮKAZ  LIKVOREY
nSpecifické parametry:
n                      Beta Trace protein
n                      Beta2 transferin
nObsolentní je detekce pomocí nespecifických parametrů:
n glukóza, celková bílkovina,chloridy

BETA  TRACE  PROTEIN
nProstaglandin D syntáza
nSyntetizován v buňkách chorioideálního plexu
nV likvoru jsou koncentrace 20-30x vyšší než v séru
nStanovení:
nkvantitativní, imunonefelometrické
n firma Siemens (Dade Behring)

BETA  TRACE  PROTEIN
nReferenční  meze (firemní)
n        Sérum  0,33-0,59 mg/l
n        CSF     10,0-19,2 mg/l
n
n          Likvorea 0,8 mg/l
n          Z literatury  6,0 mg




BETA  2 TRANSFERIN
nAsialoforma transferinu
nVzniká ze sérového transferinu aktivitou mozkové neuraminidázy
nV elektroforéze pohyblivost beta2 globulinů
nMetody stanovení
n   Izoelektrická fokuzace, elektroforéza
n       s imunofixací pomocí protilátky značené
n       peroxidázou (SEBIA)

BETA  2 TRANSFERIN
nMetoda ELFO na agaróze s následnou imunofixací
nZvýšení citlivosti metody zakoncentrováním materiálu podle obsahu celkové bílkoviny
n    centrifugační zkumavky s polopropustnou membránou   Vivaspin
nMateriál s příměsí hlenu zpracován ve zkumavkách Salivetae firmy Sarstedt

Zkumavka Vivaspin
IMG_0754 IMG_0756


Zkumavka Salivettae
IMG_0753 IMG_0749


sejmout0012 sejmout0011
Pozitivní
Negativní

vzorek
CSF bílk.(g/l)
CSF BTP (mg/l)
3695/18/10
0,54
14,74
3696/20/10
0,25
14,40
3713/20/10
3,60
5,28
3714/20/10
1,20
14,26
3735/22/10
0,79
23,60
3680/17/10
0,17
14,34
3506/30/11
3,88
4,81
3800/29/10
0,16
14,90
3794/27/10
0,26
13,20
3796/27/10
0,29
13,00
3523/31/10
0,73
10,90
3524/31/10
0,25
10,00
3530/1/11
2,24
7,00
průměrná hodnota (mg/l)
12,34

vzorek
S-BTP(mg/l)
žena-1938
0,63
muž-1971
0,67
muž-1964
0,75
žena-1958
0,60
žena-1974
0,76
žena-1976
0,47
žena-1941
1,31
muž-1984
0,92
žena-1911
0,85
průměr (mg/l)
0,77

vzorek
B-2-transferin
předpříprava vzorku pro b-2-transferin
BTP (mg/l)
směsný likvor
pozitivní
zahuštěno 40x
25,80
směsné sérum
negativní

0,94
10%-1g
pozitivní
zahuštěno 40x
1,64
20%-1g
pozitivní
3,54
40%-1g
pozitivní
7,90
60%-1g
pozitivní
14,66
10%-4g
pozitivní
zahuštěno 20x
1,83
20%-4g
pozitivní
7,00
40%-4g
pozitivní
9,46
60%-4g
pozitivní
12,42
10%-32g
negativní
nezahuštěno
1,57
20%-32g
negativní
3,52
40%-32g
negativní
6,58
60%-32g
negativní
10,78

sejmout0005 sejmout0004



vzorek
B-2-transferin
BTP (mg/l)
1.
sl. pozitivní
16,06
2.
pozitivní
3,68
3.
negativní
2,20
4.
negativní
1,33
5.
negativní
1,74
6.
negativní
1,25
7.
negativní
1,87
8.
pozitivní
10,94
9.
pozitivní
26,40
10.
pozitivní
2,78

Závěr
nJe možno použít obě metody
nBeta trace protein
n       rychlost stanovení
n       pozitivita i ve vzorcích s vysokou CB
nBeta 2 transferin
n       cena
n       jasná pozitivita při nízké příměsi CSF

Děkujeme
IMG_0081