ROZDĚLENÍ ANTIMIKROBIÁLNÍCH LÁTEK, VYŠETŘOVÁNÍ CITLIVOSTI M.Hanslianová Antibiotické středisko OKM FN Brno Logo Antimikrobiální látky I.Antibiotika II.Antimykotika III.Antiparazitika IV.Antivirotika ¡ Antibiotika ¡= léčiva používaná k profylaxi a terapii infekčních onemocnění vyvolaných baktériemi ¡ ¡Mají jedinečné postavení ve skupině léčiv- ovlivnění nejen léčeného jedince m+š ¡Účinek na původce onemocnění ¡Ovlivnění fyziologické mikroflóry ¡Vznik a šíření rezistence- ovlivnění ostatních ¡Největším rizikem pro vznik rezistence je neadekvátní podávání antibiotik ¡ ¡Nesprávné indikace podání (respirační virózy) ¡ ¡Nesprávné dávkování (velikost dávky, dávkovací interval…) Betalaktamová antibiotika ¡Obsahují betalaktamový kruh ¡Inhibice syntézy buněčné stěny- baktericidní ¡Zanedbatelná toxicita (lze podávat i novorozencům, těhotným a lidem s poruchami orgánových funkcí) ¡Alergické reakce, zkřížené alergie 1)Peniciliny 2)Cefalosporiny 3)Karbapenemy 4)Monobaktamy ¡ ¡Peniciliny: Ø ØStále 100% účinnost vůči Streptococcus pyogenes ØRozšířené antimikrobiální spektrum u preparátů s inhibitorem betalaktamázy (Augmentin, Unasyn, Tazocin) ¡Cefalosporiny: Ø ØI-IV generace ØOd I do IV generace klesá účinnost na grampozitivní baktérie a stoupá účinnost na gramnegativní baktérie Rezistence Kl.pneumoniae ke 3 generaci cefalosporinů, EARSS 2009 ¡Karbapenemy: ¡ ØRezervní antibiotika zejména u infekcí vyvolaných enterobaktériemi!! Rezistence Kl.pneumoniae ke karbapenemům, EARSS, 2009 Makrolidy ¡Erythromycin, klarithromycin, azithromycin ¡Inhibice proteosyntézy- bakteriostatické ¡Lék volby u alergiků na penicilinová antibiotika ¡Účinek na tzv. „atypické mikroby“(mykoplasmata, ureoplasmata, chlamydie, legionely) Linkosamidy ¡Linkomycin, klindamycin ¡Inhibice proteosyntézy- bakteriostatické ¡Výborný průnik do kostní tkáně ¡Možnost vzniku pseudomembranózní kolitidy vyvolané Clostridium difficile ¡ ¡Tetracyklin, doxycyklin ¡Inhibice proteosyntézy- bakteriostatické ¡Účinek na tzv. „atypické patogeny“(mykoplasmata, ureoplasmata, chlamydie, legionely) ¡ KI u dětí do 8 let ¡Glycylcykliny- nová řada tetracyklinů- tigecyklin Tetracykliny Aminoglykosidy ¡gentamicin, tobramycin, amikacin ¡Inhibice proteosyntézy- baktericidní! ¡Pouze parenterální ¡Nefrotoxické, ototoxické- nutnost měření hladin ¡Prokázaná synergie s betalaktamy ¡ Amfenikoly ¡chloramfenikol ¡Inhibice proteosyntézy- bakteriostatický ¡Výborné průniky do tkání včetně likvoru ¡Toxicita, zejména útlum kostní dřeně (reverzibilní, ireverzibilní) ¡Omezený pouze na některé indikace Polypeptidy ¡Kolistin ¡Porucha funkce buněčné membrány- baktericidní ¡Toxické- nefrotoxicita ¡V současné době jediné fungující antibiotikum u polyrezistentních kmenů gramnegativních baktérií Glykopeptidy ¡Vankomycin, teikoplanin ¡Inhibice syntézy buněčné stěny- baktericidní ¡Rezervní antibiotika pro rezistentní stafylokoky a enterokoky ¡Nefro-, ototoxicita Chinolony ¡Ciprofloxacin, ofloxacin, norfloxacin ¡Inhibice syntézy nukleových kyselin- baktericidní ¡Antibiotika ohrožená v současné době výrazným vzestupem rezistence ¡Selektory rezistentních kmenů ¡ Ostatní antibiotika 1)Ansamyciny- rifampicin 2)Sulfonamidy- kotrimoxazol 3)Nitroimidazoly- metronidazol 4)Nitrofurany- nitrofurantoin 5)Streptograminy- Synercid 6)Oxazolidinony- Zyvoxid Vyšetřování citlivosti k antibiotikům 1)Disková difuzní metoda ¡ Stanoví se citlivost nebo rezistence podle toho, zda vyšetřovaná baktérie ve stanovené koncentraci buněk na agarové půdě vytvoří nebo nevytvoří přípustnou inhibiční zónu kolem disku s určitou koncentrací antibiotika po předepsané době inkubace 1) Půdy ¡Mueller Hinton agar (MHA)- nejpoužívanější, nízký obsah antagonistů antibiotik ¡MHA+ 5% ovčí krve- pro náročnější baktérie (pneumokoky, streptokoky,meningokoky) ¡ krev- ovlivňuje výsledky citlivosti! Stafylokoky na půdě s krví- u OXA až o 3 mm menší zóny, krev zesiluje účinek cefalosporinů a aminoglykosidů na enterokoky,příčina povlaků u disků se sulfonamidy ¡Obohacené půdy pro některé náročnější baktérie- haemofily- HTM, gonokoky ¡Ph půdy, výška půdy 2) Inokulum ¡Zásadním způsobem ovlivňuje výsledek diskové difuzní metody ¡Koncentrace inokula- 0,5-1 McFarlandova zákalového standardu (1,5-3x 10 na 8 buněk/ml) ¡Správné inokulum= splývavý růst kmene ¡Očkování na suché půdy vytemperované na pokojovou teplotu ¡Očkování přelitím ¡Očkování roztěrem 3) Antibiotické disky ¡Sestavy antibiotik podle vyšetřované baktérie (doporučené sestavy-NRL pro antibiotika) ¡Základní a rozšířené řady ¡Sestavy antibiotik podle klinického materiálu ¡Terapeutické disky, diagnostické disky ¡Inkubace 18-24 hodin při 36 st.C ¡Aerobní, anaerobní, mikroaerofilní (5% CO2) prostředí ¡Hodnocení inhibiční zóny- porovnání s hraničními hodnotami pro citlivé kmeny ¡Kvalitativní a kvantitativní hodnocení ¡U některých kmenů a některých materiálů je disková difuzní metoda nedostačující, nutno vyšetřit MIC- minimální inhibiční koncentraci! ¡MIC= nejnižší koncentrace antimikrobiální látky, která je schopna zastavit růst baktérie ¡MBC= nejnižší koncentrace antibiotika, která je schopna usmrtit baktérii Vyšetřování citlivosti k antibiotikům 2)Diluční mikrometoda ¡ hodnotí se MIC v jamkách mikrotitrační destičky, které obsahují zvolené koncentrace antibiotik v bujónu ¡ MIC= první nezkalená jamka mikrotitrační destičky ¡Inokulum (ředění 1:10) ¡Očkování ¡Inkubace ¡Sestavy antibiotik MIC- výhody ¡ ¡Hodnota MIC důležitá pro některé kmeny a diagnózy ¡Klinické breakpointy: ¡ Streptococcus pneumoniae- meningitis x pneumonie MIC- nevýhody ¡Obtížné stanovení různých typů rezistence a produkce betalaktamáz E test ¡Plastikový proužek napuštěný antibiotikem ve stoupající koncentraci ¡MIC- odečítá se v místě, kde inhibiční zóna protíná proužek ¡Vyšetření citlivosti resp. rezistence k antibiotikům má řadu úskalí a vyžaduje erudici a přesnost ¡Ideální je kombinace více metod v laboratoři