Kultivace hematopoetických buňek
L. Bourková, OKH FN Brno


Stem_cells_diagram
•Multipotent /
•

Výsledek obrázku pro cfu-gm



Hematopoetické kmenové buňky
nv kostní dřeni i periferní krvi ve velmi nízké koncentraci
npro svoji podobnost s lymfocyty se nedají morfologicky rozpoznat.
nmorfologicky jsou rozpoznatelné až jejich další vývojová stádia - myeloblast, proerytroblast,
megakaryoblast…..
nkmenové buňky se stanovují např. imunologicky pomocí povrchových antigenů a nebo  funkčními testy,
na základě proliferační aktivity
–sebeobnova
–diferenciace

Metoda tkáňových kultivací
nPrincip metodiky:
Kultivační metoda sleduje funkční schopnosti krvetvorných buněk, které odpovídají na růstové
faktory v kultivační půdě tvorbou kolonií.
nKultivační prostředí:
Kultivační média představují sterilní vybalancované chemické prostředí, z něhož buňky čerpají
složky pro svůj metabolismus. Kultivační atmosféra má 100% vlhkost a 5% obsah CO2 v inkubátoru.
nSchéma metodiky:
mononukleární buňky + médium + atmosféra (14 dnů) è kolonie
nHodnocení:
mikroskopem
kolonie vznikají z progenitorových buněk
kolonie CFU-GM obsahují minimálně 40 buněk
kolonie BFU-E obvykle více jak 200 erytroblastů
nVyužití:
diagnostika (hematologické malignity), monitorování léčby, k terapii…

kultivace1 kultivace2
Tkáňové kultivace
kultivace3

hemopoiesis-kultivace Výsledek obrázku pro bfu-e and cfu-e



BFU-E kolonie kolonie1 kolonie-obrázky2 kolonie-obrázky4
BFU-E kolonie


kolonie2 kolonie2 kolonie2



kolonie-obrázky3 kolonie-obrázky5 kolonie2
CFU-GM kolonie


CFUGM CS-CFU-GM
•
CFU-GM kolonie