G-fermentující tyčinky • • D:\op - Dokumenty\foto\P1010132.JPG G- fermentující tyčinky •Čeleď Enterobacteriaceae: •rody - Escherichia, Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella, Salmonella, Shigella, Proteus, Morganella, Plesiomonas, Providencia,Yersinia … •Čeleď Aeromonadaceae: •rod Aeromonas •Čeleď Vibrionaceae: •rod Vibrio … •Čeleď Pasteurellaceae: •Rody - Pasteurella, Haemophilus … Čeleď Enterobacteriaceae •Gram negativní nesporulující tyčinky •Délka 2-3µm, tloušťka 0,5-0,8µm •Fakultativně anaerobní mikroby •Odolné vůči prostředí •Biochemicky aktivní – kvasí řadu cukrů • kataláza pozitivní, oxidáza většinou negativní •Komplexní antigenní struktura : –a) tělové O -antigeny –b) bičíkové H- antigeny –c) kapsulární K -antigeny Čeleď Enterobacteriacaae •Výskyt ve střevě obratlovců –Komenzálové –Saprofyté –Patogeny •Mimo střevo patogeny –Urogenitální systém –Dýchací systém –Rány –Sepse (urosepse) –Meningitidy – – • – Enterobacteriaceae faktory patogenity •Endotoxin –Součást buněčné stěny, uvolňuje se po rozpadu buňky •Fimbrie –Schopnost adheze •Exotoxiny –Hemolyziny –Enterotoxiny – Enterobacteriaceae laboratorní průkaz •Kultivace •Biochemická identifikace –Selektivně diagnostické půdy –Chromogenní agary –Biochemické testy •Antigenní analýza •Antibiogram •Diagnostika produkce betalaktamáz Srovnání laktóza pozitivního a laktóza negativního kmene C:\Users\41730\Documents\P5310272.JPG Enterotest 24 D:\op - Dokumenty\foto\P1010151.JPG Enterobacteriaceae epidemiologie •Přenos fekálně-orální cestou •Přenos potravinami •Endogenní infekce •Původci nozokomiálních infekcí Rod Salmonella •Primárně antropopatogenní salmonely –Salmonella Typhi –Salmonella Paratyphi A, B, C •Primárně zoopatogenní salmonely –Salmonella Typhimurium 1,4,12:i:1,2 –Salmonella Enteritidis 1,9,12:gm:- –Salmonella Infantis 6,7:r:1,5 –atd., atd., atd. Antropopatogenní salmonely •Původci břišního tyfu a paratyfu •Vstupní brána GIT •Septické teploty •Bolesti hlavy (hlavnička) •Růžové skvrny na kůži •Průkaz přímý: hemokultivace •Průkaz nepřímý : Widalova reakce •Nosičství: žlučník Zoopatogenní salmonely •Nejčastější původce bakteriálních střevních nákaz •Velká odolnost vůči zevním vlivům •Inkubace 12 – 15 hodin •Časté průjmy bez krve •K infekci nutná vysoká infekční dávka (105-108) Diagnostika salmonelózy •Biochemické vlastnosti: štěpení manitolu, využívání citrátu, produkce H2S, štěpení glukózy za tvorby plynu •Kultivace – běžné půdy •Selektivně diagnostické půdy: biochemický klín,Endova půda, XLD, MAL,Hajnova půda •Pomnožení v selenitovém bujónu •Sklíčková aglutinace – určení sérotypu • (pro epidemiologické studie) • Salmonella sp. na XLD agaru C:\Users\41730\Documents\P5310275.JPG Rod Shigella •Čistě lidský patogen •Původce bacilární úplavice •Vodnaté průjmy s křečemi •Stolice obsahuje hlen, hnis i krev •Nízká infekční dávka (asi 100 bakterií) •Inkubační doba 3 – 7 dní Diagnostika shigelóz •Nepohyblivé G- tyčinky •Rostou na běžných půdách •Biochemicky málo aktivní, při štěpení glukózy netvoří plyn •Antigenní identifikace podle O antigenů: –Shigella dysenteriae (sk. A) –Shigella flexneri (sk. B) –Shigella boydii (sk. C) –Shigella sonnei (sk. D) Yersinia pestis •Kultivačně nenáročná •Původce moru, nákaza s přírodní ohniskovostí –Dýmějový mor – po štípnutí blechou morovou, zvětšené a kolikvované lymfatické uzliny – bubony, dýměje –Plicní mor – po vdechnutí yersinií –Septická forma – hematogenní šíření •Úmrtnost 75 – 95% Yersinia enterocolitica •Původce průjmů, zdroj vepřové maso •Gramnegativní tyčinky pohyblivé při nižších teplotách (25°C) •Množení i při chladničkové teplotě •Kultivace půda CIN •Biochemické určení – štěpení močoviny •Antigenní struktura – určení O- antigenů (u nás • nejvíce O:3) • • Y.enterocolitica na Švejcarově agaru D:\IMG_1112.JPG Escherichia coli •Biochemicky aktivní •Běžná součást střevní flóry •Symbiont: tvorba vitamínu K, produkce kolicinů •Podmíněně patogenní •Dobře kultivovatelné Diagnostika E.coli •Běžné kultivační půdy •Biochemie: produkce indolu, štěpí laktózu •Antigenní analýza aglutinací - ze stolice u malých dětí (cca do 2 let) D:\op - Dokumenty\foto\ESCO- izolace na KA+McC.JPG Patogenní působení ve střevě •Enteropatogenní E.coli: novorozenecké průjmy - sérotypy O26, O55, O111, O126 … •Enterotoxigenní E.coli: cestovatelské průjmy, produkce enterotoxinů, sekrece vody do střeva – vodnatý průjem •Enteroinvazivní E.coli: invaze do střevního epitelu – krvavé průjmy •Shiga-like toxigenní E.coli: nejčastější sérotyp O157, průjmy, hemolyticko-uremický syndrom • (kultivace na MacConkey agaru se sorbitolem) • Patogenní působení mimo střevo •Uropatogenní E.coli – nejčastější původce močových infekcí •Kmeny způsobující dýchací infekce •Sepse •Infekce ran •Novorozenecké meningitidy Rod Enterobacter •Součást střevní flóry –Enterobacter cloacae –Enterobacter aerogenes –Enterobacter sakazakii – –Pantoea agglomerans – •Infekce u oslabených pacientů Rod Klebsiella •Součást střevní flóry •Adaptovaná i na život mimo střevo •Často opouzdřené kmeny •Časté nemocniční infekce – uroinfekce, infekce dýchacích cest •Polyrezistentní kmeny – produkce ESBL –Klebsiella pneumoniae –Klebsiella oxytoca Rod Serratia •Více ve vnějším prostředí •Odolné, kultivačně nenáročné bakterie, produkují pigmenty •Typický původce nemocničních infekcí (dýchací cesty, infekce ran, sepse) –Serratia marcescens –Serratia rubidea Rody Proteus, Providencia, Morganella •Společnou vlastností je štěpení urey a deaminace fenylalaninu • •Proteus vulgaris •Proteus mirabilis •Morganella morganii •Providencia stuartii •Providencia alcalifaciens Rod Proteus •Proteolytická aktivita •Výrazná pohyblivost – plazivý růst na pevných půdách (Raussův fenomén) •Výskyt ve střevní flóře, přizpůsobení k likvidaci organických zbytků •Při dysmikrobii ve střevě původce průjmů •Původce infekcí močových cest, infekce dekubitů, bércových vředů Proteus sp. na Švejcarově agaru D:\IMG_1110.JPG Rod Citrobacter •Podmíněný patogen ve střevě •Biochemicky se podobá salmonelám •Antigenně příbuzný s E.coli a salmonelami •Infekce močových cest, sepse • –Citrobacter freundii, –Citrobacter koseri aj. – • •Izolace ze sladkovodních i mořských ryb •Způsobují průjmy a vzácně i sepse •Oxidáza je pozitivní • Plesiomonas shigelloides Rod Plesiomonas Čeleď Aeromonadaceae •Rod Aeromonas •Izolovány z masa, mléka, ryb a plodů moře, z vody – nejvíce Aeromonas hydrophila •Způsobují mírný průjem až po onemocnění podobné choleře •Infekce ran po kontaktu s vodou •Oxidáza je pozitivní • Čeleď Vibrionaceae •Kultivačně nenáročné, fakultativně anaerobní, kataláza pozitivní, oxidáza pozitivní •Běžně rozšířené v prostředí • • • Rod Vibrio •Většinou rohlíčkovitě zahnuté G- tyčinky •Alkalofilní – optimum pH 6,5 – 9 (i 10) •Často halofilní – pro kultivaci vyžadují NaCl • Vibrio cholerae •Původce cholery •Pochází z Indie a Číny •Od r. 1962 probíhá 7. pandemie cholery •V našich zemích poslední r.1970 na východním Slovensku •V r.2002 2 importované případy z Indie a Thajska Vibrio cholerae •Krátké G- tyčinky, zahnuté do tvaru rohlíčku •Antigenní typizace podle O antigenu •Nejčastější O1 a O139 – vyvolávají epidemickou choleru •Všechna jiná vibria se označují jako nonO1/O139, neaglutinující vibria (NAG) Vibrio cholerae •2 biotypy V.cholerae O1– liší se průběhem onemocnění: –El Tor – časté asymptomatické případy, hemolyzuje na krevním agaru –Klasický – cholera asiatica •V.cholerae O1 způsobuje z plného zdraví objemné vodnaté průjmy s vločkami hlenu a sliznice (rýžová polévka), rychlá dehydratace, acidóza, smrt • – Vibrio cholerae •Diagnostika v akutním stadiu •Růst na běžných půdách – krevní agar, nevyžaduje NaCl •Selektivní půda s thiosulfátem, citrátem, žlučí a sacharózou (TCŽS agar) •Množí se v alkalické peptonové vodě, růst v povrchové blance již za 6 hodin – mikroskopie •Aglutinace Čeleď Pasteurellaceae •G- drobné krátké tyčinky, kokotyčinky •Nepohyblivé •Fakultivně anaerobní, kultivačně náročné •Nerostou na půdách pro G- baktérie (Endo agar, MacConkey agar) • Pasteurella multocida •Komenzál horních cest dýchacích u domácích zvířat •Lidské infekce spojené se zvířecím pokousáním nebo poškrabáním •Povrchové infekce kůže až abscesy a osteomyelitidy •Kultivace na krevním agaru, nevyžaduje růstové faktory •Někdy tvoří pouzdro – mukózní kolonie P.multocida na krevním agaru D:\P1010023.JPG Rod Haemophilus •Výskyt na sliznici nosohltanu, součást normální flóry •na krevním agaru rostou jen v zóně hemolýzy jiných baktérií (např. S.aureus) – satelitový fenomén •Vhodný je čokoládový agar, růst v atmosféře se zvýšeným obsahem CO2 (5-10%) •Závislost na růstových faktorech: –X (hemin) a V (NAD) Rod Haemophilus Faktor X Faktor V H.influenzae + + H.parainfluenzae + Haemophilus influenzae •Původně považován za původce chřipky •Hlavní faktor virulence – pouzdro. Podle antigenní struktury pouzdra 6 sérotypů a-f. •Nejdůležitější H.influenzae b. Zavedeno očkování •Kolonizuje dýchací cesty, způsobuje faryngitidy, sinusitidy,epiglotitidy, sepse, meningitidy, otitidy, artritidy, perikarditidy Haemophilus influenzae •Diagnostika: •Odběr do transportní půdy, uchování při pokojové teplotě •Čokoládový agar, krevní agar s čárou Staphylococcus aureus •Disk s bacitracinem pro potlačení flóry HCD • Haemophilus ducreyi •Původce sexuálně přenosné choroby – měkkého vředu (ulcus molle)