Současné možnosti automatizace močové analýzy Miroslava Beňovská C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Automatizovaná analýza moče •Chemická analýza moče • + •Automatická morfologická analýza moče Chemická analýza moče • •automatizace od 80. let minulého století •přístroje využívají stanovení parametrů pomocí diagnostických proužků (suchá chemie) •semikvantitativní stanovení bilirubinu, urobilinogenu, bílkoviny, ketonů, hemoglobinu, leukocytů, dusitanů, pH, glukosy a specifické hmotnosti •standardizace měřící procedury •namáčení proužků x pipetování na jednotlivé reakční zóny •analýza na principu reflexní fotometrie (případně digitální fotografie diagnostického proužku s vyvinutým zbarvením - Atellica) Chemická analýza moče •Reflexní fotometrie: •zdroj světla - světlo emitující diody •emitují světlo o různých přesně definovaných vlnových délkách – světlo pak dopadá v různých úhlech na reagenční zóny diagnostického proužku •světlo je odráženo na fotodiodu, která slouží jako detektor •intenzita odraženého světla závisí na vybarvení reakční zóny (od bílé zóny se odráží prakticky 100%, čím tmavší zóna, tím víc světla je absorbováno) Chemická analýza moče •Příklady analyzátorů •menší - často poloautomaty: • Urisys 1800 (Roche Diagnostic) • Aution JET (Arkray) • Clinitek STATUS (Siemens) • • •vysokokapacitní : • Urisys 2400 (Roche Diagnostic) • Aution Max AX -4030 (Arkray) C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\images.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Automatická morfologická analýza moče •Techniky: • Flow cytometrie • • Digitální zobrazení (mikroskopie) močových částic • využívá se CCD kamera, mikroskopický objektiv • - Průtoková cela, průběžné snímání, • nekoncentrovaná moč • - Automatická analýza močového sedimentu • S centrifugací • S využitím sedimentace • • • •Kompletní systém močové analýzy – diagnostické proužky + morfologie C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN • Flow (průtoková) cytometrie Průtoková cytometrie •UF 100 (Sysmex) • •první přístroj na automatickou morfologii moče •vzorek moče je automaticky naředěn a obarven a obklopen kapalinou neobsahující žádné buňky •prochází měřící celou, kde je ozářen argonovým laserem •fluorescence a rozptyl světla vznikající po ozáření se detekuje a je specifická pro jednotlivé buňky •výsledky jsou vydány jako počet buněk /ul (erytrocyty, leukocyty atd.) •nevýhoda - jednotlivé částice nemůže obsluha prohlížet Grafický výstup z přístroje UF 100 (Sysmex) UN-Series, Sysmex •Nově na trhu: • • • UN3000-111 • • • • • UC-3500 + UF-5000/4000 + UD-10 • (Chemická analýza + Flow cytometrie + digitální zobrazení elementů) • • Modulární koncept • C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN UF-5000/4000, Sysmex •Flow cytometr – 28 parametrů •2 ml moče •105/80 vzorků moče/hod. • • •Flow cytometrie •Po nasátí proces značení fluorescenční značkou •Ozáření vzorku výkonným modrý laserem •Dva měřící kanály (buňky se značeným jádrem nebo povrchem) •Laserová technologie detekce částic umožňuje každý element odlišit podle specifických signálů charakterizujících velikost, tvar, vnitřní strukturu, polarizační vlastnosti •QC pro 5 parametrů – ery, leu, epitelie, válce, bakterie • • • C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN UF-5000/4000, Sysmex •Speciální funkce: •Stanovení počtu bakterií (pro výběr vzorků ke kultivaci) včetně rozlišení dle Grahamova barvení •Kvantifikace epitelií včetně přechodných a renálních •Rozlišení erytrocytů a krystalů – polarizační filtr •Klasifikuje zvlášť lyzované erytrocyty •Analýza jiných tělních tekutin – likvory, punktáty • UF-5000 fully automated analyzer of formed elements in urine C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN UF-5000/4000 - scattergram C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.Outlook\YXZ4HDAN\Dr Ben UF5000.PNG VEN C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg UN 3000, Sysmex •UN3000-111WS Kompletní močová analýza • •Složeno z: •UC-3500 •UF-5000/4000 •UD-10 •Dráhy pro vstup • a výstup vzorků •Podstavce s • úložným prostorem C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Digitální mikroskopie nekoncentrované moče C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN IQ 200 (IRIS) – mikroskopická analýza •2003 - plně automatizovaná mikroskopická analýza •60 vzorků/hod •možnost prohlížení částic na obrazovce •možnost přeřazení do jiné kategorie •přístroj rozlišuje 12 základních kategorií (např. erytrocyty, leukocyty, epitelie, válce) a umožňuje tvorbu podkategorií •archivace zobrazení C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg IQ 200 (IRIS) •Princip přístroje: •tenká vrstvička vzorku sendvičovitě uzavřená mezi vrstvy suspendované tekutiny se dostává do mikroskopu, který je spojen s digitální kamerou • •kamera s využitím stroboskopu zachytí 500 obrázků z jednoho vzorku - výsledný obraz je digitalizován • •jednotlivé obrazy částic jsou izolovány do rámečků – každá částice zvlášť C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg Erytrocyty – zobrazení z IQ 200 C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg iRICELL 3000plus IQ 200 SPRINT + ichemVelocity, Beckman http://www.axonlab.com/var/em_plain_site/storage/images/media/bilder/axonlab-schweiz/produkte/urind iagnostik/iricell-2000-3000_2/4971-1-ger-CH/iRICELL-2000-3000_2_lightbox.jpg Automatická mikroskopie + chemická analýza moče 100 testů/hod. C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN iRICELL 3000plus =IQ 200 SPRINT + ichemVelocity, Beckman •IQ 200 SPRINT •100 testů/hod. •12 základních a 27 předem • definovaných podkategorií • • • •ichemVelocity: •Minim. Objem 2 ml moče •240 vzorků / hodinu •13 metod včetně hustoty, barvy a zákalu (askorbová) • C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\stažený soubor.jpg C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\UNCX.png C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN C:\Users\75224\Documents\Vzdělávání\E-learning\Mocky\IQ\My Pictures\Granulvalce\granulovane valce.bmp C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN FUS-2000, DIRUI •Přístroj je hybridní močový analyzátor • •Provádí chemickou analýzu i digitální zobrazovací vyšetření moče • •Princip je stejný jako u systému iQ 200 (provádí 650 snímků/vzorek), ale zařízení je umístěno v jedné skříni •Pro obě metodiky je využit jeden pipetor C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN FUS-2000 •Výkon: 120 tests/hour •Minimální objem – 3 mL •Doba analýzy - 100s •Při nedostatku materiálu se provede pouze mikroskopie •Možnost zvětšení částic •Speciální mytí po hustých • vzorcích •Tichý chod přístroje •Big picture – odpovídá • mikroskopickému poli •Chem.anal.-reflexní fotometrie •Fyzik. anal. – refraktometrie (na spec. hustotu) + měření barvy a turbidity C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Uric acid G:\Screenshots\KM masivni.png C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN DIRUI FUS-3000Plus •Technická vylepšení: • • •Sledování teploty a vlhkosti proužků v zásobníku, stabilita 3 dny •Integrovaný promývací roztok, vylepšené promývání •Funkce síta vzorků - gating •Měření kontrol v jednom stojanu •Vylepšená správa reagencií •Snížení aspirovaného množství vzorku pro chemické vyšetření na 0.4ml •Vylepšení měřených parametrů: • •Zvětšení elementů odpovídá HPF – 400x •4 násobné navýšení počtu snímků zorných polí oproti předchozímu modelu •Rozdělení erytrocytů do 5 kategorií •Rozdělení bakterií do 2 kategorií •Měření konduktivity vzorku DIRUI FUS-1000 •Technická vylepšení: • •Sledování teploty a vlhkosti proužků v zásobníku, stabilita 3 dny •Funkce síta vzorků - „gating“ •Měření kontrol v jednom stojanu •Vylepšená správa reagencií •Vylepšení měřených parametrů: • •Nejmenší hybridní močový analyzátor na světe •Zvětšení elementů odpovídá HPF – 400x, stejně jako FUS-3000Plus •Rychlost 60 vz./hod. • •Oproti FUS-3000 postrádá •(x) Rozdělení ery do 5 skupin •(x) Rozdělení bakterií do 2 skupin •(x) Měření konduktivity vzorku •(x) Vysoká rychlost •(x) Kapacitní podavač stojánků • • Simulace zorného pole (funkci mají všechny analyzátory Dirui) Big Picture (2) ERY - akantocyty ARBC (2) Spermie SPRM (3) Tripelfosfáty MAPH (1) Automatická analýza močového sedimentu – s centrifugací C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN LabUMat2 and UriSed3 , 77 Elektronika (dodává Biovendor) •Kompletní systém na analýzu moče C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\urised3_pc_labumat2_front_kicsi.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN LabUMat2, 77 Elektronika dodává Biovendor •Chemická analýza moče pomocí diagnostických proužků • •240 tests/hour •Možno vložit až 100 vzorků •Stačí 2 ml moče •Automatizované QC • C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\labumat2_thumbnail.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Urised 3, 77 Elektronika •15 obrazů/vzorek • •Výkon 120 vzorků/hod. • •Zakoncentrování 20× (Evropské doporučení pro močovou analýzu) • •Manuální mikroskopický mód: Možnost prohlédnout kterékoliv pole v kyvetě tak, že jsou vidět i pohybující se mikroorganizmy • •Funkce zoom •Automatizované QC • •Bez carry over • •Vyhodnocovací modul rozeznává zvlášť koky a tyčkové bakterie • C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\urised_3_sideview_kicsi.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Urised 3 •Vybaven fázovým kontrastem • •Speciální kombinace • světelné mikroskopie • a fázového kontrastu • • •Sledováno trojnásobné množství vzorku v porovnání s UriSed 2 • •Kompatibilita s LabUMat 2, porovnání výsledků s chemickou analýzou • • https://www.novolab-labware.com/media/catalog/product/cache/3/thumbnail/555x361/9df78eab33525d08d6e 5fb8d27136e95/U/r/Urised_3+PC%20layeres.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Urised 3 Composite image Bright-field image Phase contrast image Fázový kontrast Světelný mikroskop Složený obraz C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN H:\kuku images\ss.jpg C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\67460-7589565.jpg cobas 6500, Roche močový sediment + chem. analýza https://www.mojemedicina.cz/files/videos/2014_11_27_CB_DGN_Ferdova-cobas-6500/slides/slide_03.jpg http://www.cobas.com/content/internet/product/cobas/en/home/product/urinalysis-testing/cobas-6500-u rine-analyzer-series/_jcr_content/mainParsys/tabs/tabsParsys/tabitem/firstProductDetailsParsys/imag e/image.img.jpg/1432122195030.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN cobas 6500 - automatický systém na močovou analýzu • •Spojením modulů cobas u 601 a cobas u 701 • vzniká platforma s automatickým • transportem vzorků celým systémem • •Analýza diagnostickým proužkem první • •Možnost vyšetření sedimentu jen u pozitivních výsledků • •Uživatel může nastavit pravidla křížové kontroly • a validace • • • • • • http://www.cobas.com/content/internet/product/cobas/en/home/product/urinalysis-testing/cobas-6500-u rine-analyzer-series/_jcr_content/mainParsys/tabs/tabsParsys/tabitem/firstProductDetailsParsys/imag e/image.img.jpg/1432122195030.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Modul cobas u 601-analýza moči pomocí testovacích proužků •Kapacita až 240 vzorků/ hod. •400 proužků v kazetě se značením RFID •Obrazový senzor (kamerový čip) • provádí fotometrická měření •Odlišení intaktních a lyzovaných erytrocytů • (do 50 Ery/μL) • • •12 parametrů: pH, leukocyty, dusitany, bílkovina, • glukóza, ketolátky, urobilinogen, bilirubin, • erytrocyty, hustota, barva a zákal • Proužky s rezistencí vůči kyselině askorbové • • • C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Modul cobas u 701 – automatizované mikroskopické vyšetření močového sedimentu. •Kapacita až 116 vzorků/hod. •Koncepce bez reagencií •Jednorázové kyvety (400 kyvet v kazetě se • značením RFID) • • •Postup: •Resuspendace vzorku •Pipetování vzorku do kyvet •Centrifugace •Zachycení, uchování a zobrazení až 15 snímků z centrifugovaného vzorku •Funkce reklasifikace umožňuje přehodnotit určení každé částice • C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN cobas 6500 – image z modulu cobas u701 Atellica 1500, Siemens • • • •Uvedení na trh 10/2017 • •Bez fázového kontrastu • •Rozlišuje přímo 10 druhů krystalů • bakterie - koky x tyčky Resultat d'imatges de atellica 1500 Atellica 1500, Siemens \\fnbrno.cz\tree\Home\27232\My Pictures\Atellica 1500.png H_DX_CLINITEKNovus_LoadCartridge_01 Cassette Loading RFID tagged cassette 14 days onboard stability Reagenční karty v kazetě místo diagnostických proužků D:\Market materials\Novus\Novus Uptodate\Images and video\CN_Cardhandler_640x480[1].jpg Reagent cards Prevent strip jamming and improves downtime Not available for sale in the U.S. Product availability varies by country Princip chem. analýzy: Digitální fotografie diagnostického proužku s vyvinutým zbarvením Vychází z chemického analyzátoru Clinitek Novus Výkon – chem.vyšetření: 200 vzorků/hod. The CLINITEK Novus automated urine chemistry analyzer utilizes a reagent cassette, which is composed of 450 test sets inside. As a daily procedure, loading the reagent is also very easy – take less than a minute. The cassette is RFID integrated, so the urine chemistry analyzer reads the cassette information (expiration date, lot #, etc.) from the RFID and incorporates into the system automatically, which saves the operator a lot of effort and prevents manual errors There are no individual strips inside the cassette – instead we use reagent cards. This design greatly improves the sample dispense accuracy and reduces strip jams, which means higher reliability and less downtime for the end user. Adobe Systems Atellica 1500, Siemens Automatická mikroskopie po centrifugaci – vychází z 77 Elektronika (100 vzorků/hod.) D:\Seuss launch\Marketing collaterals\Image library\Image for Michelle-UCSF\Images with annotation\EPI-NEC-WBC.png D:\Seuss launch\Marketing collaterals\Image library\Image library\160607_10_42_33_S0022-1_-_08_b.png Clear “In-focus” Images from Atellica 1500 UA System “Off-focus” Images Not available for sale in the U.S. Product availability varies by country Atellica 1500, Siemens image002 Automatická analýza močového sedimentu – s využitím sedimentace C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN UD-10, Sysmex (viz výše) •Využívá přirozenou sedimentaci účinkem gravitace •Přístroj k digitálnímu zobrazení močových elementů •Metoda skenování polí pomocí CCD kamery •Používá se vždy v kombinaci s UF-5000/4000 pro kompletní analýzu elementů v moči a také s chem. anal. moče UC-3500 •Uživatelsky nastavitelná pravidla • výběru vzorku k analýze na UD-10 (potvrzení • typu válce, krystalu, renální epitelie) •Funkce zoom •Rutinní mód 50 vzorků/hod. • 40 polí/vzorek •1,6 ml moče (statim 0,6 ml) • • • C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\UD-10.jpg Image result for UD10 Sysmex images C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN UN 3000 C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN LAURA XL, Erba Lachema • • • • • • •Hybridní koncept : analýza diagnostickými proužky a vyšetření močového sedimentu v jedné skříni •Zakoncentrování moče a tvorba sedimentu bez centrifugace •Určování částic v sedimentu s využitím softwaru s umělou inteligencí •Automatické turbidimetrické měření fyzikálních parametrů (barva a zákal moče) Laura_XL_Def5883_mod.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN • •Měřící módy: § Hybrid (100 vzorků/hod.) § Chemie (240 vzorků/hod.) § Sediment (180 vzorků/hod.) •Identifikace spotřebního materiálu - RFID •Analýza sedimentu – sedimentace s využitím gravitace (5 min.) • 14 kyvet vedle sebe současně •Minimální objem – 2,0 ml •Aspirovaný objem – 0,8 ml •Spotřební materiál chemie: destilovaná voda, diagnostické proužky •Spotřební materiál sediment: destilovaná voda, roztok Opti-sol XL LAURA XL C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN • •Měřící princip: digitální microskopie – automatizovaná světelná mikroskopie (15 obrázků/vzorek, celé pole) •Sofistikovaný software •Zobrazení elementů podobné jako pod světelným mikroskopem •Automatické vyhodnocení + možnost manuálního přeřazení uživatelem •16 automatických/16 manuálních kategorií •Zakoncentrování moče bez centrifugace (centrifugace může vést k degradaci elementů) LAURA XL – analýza sedimentu C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN •Močový sediment: • Automatické rozlišení následujících kategorií: § Leukocyty § Shluky leukocytů § Erytrocyty § Dlaždicové epitelie § Jiné epitelie § Hyalinní válce § Patologické válce § Oxalát vápenatý § Tripel fosfát § Kyselina močová § Bakterie - tyčky § Bakterie – koky § Kvasinky § Hlen § Spermie § Neklasifikované buňky • •Do dalších připravených kategorií možno přeřadit částice manuálně § • LAURA XL C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN LAURA XL – jednotlivé částice (ZOOM) C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN LAURA XL Gran CAST MUC BACR YST C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Výhody a nevýhody •Přístroje využívající sedimentaci a centrifugaci – potíže s hustými vzorky (některé je třeba dělat pod mikroskopem, některé částice se musí označit) • •Velké zvětšení – pěkně vidět (Laura, Atellica, cobas) • •Rychlost prvního vzorku – výhodné pro jednotlivé statimy (FUS) • •Rozdíly v kvalitě a pružnosti software • •