Adobe Systems Ústav soudního lékařství Fakultní nemocnice u sv. Anny v Brně a Lékařské fakulty Masarykovy univerzity 1 Systematická toxikologická analýza Andrea Brzobohatá [USEMAP] Uplatnění A N A L Y T I C K É toxikologie forenzní - fatální intoxikace posuzování ovlivnění (drogy, trestné činy..) nevhodné a zakázané látky klinická - akutní otravy monitorování lékové terapie (TDM) laboratorní průkaz drog : diagnostika závislosti kontrola léčby profesní testy (pracovníci dopravy, zahraničí) průmyslová - biologické expoziční testy (BET) dopingové zkoušky ROZDĚLENÍ TOXICKÝCH LÁTEK (podle izolace) Těkavé : etanol, rozpouštědla (toluen, aceton..) metabolity v moči ethylen glykol (Fridex) Anorganické jedy : kovy kyanidy (CN-) oxid uhelnatý Extraktivní látky : LÉČIVA NÁVYKOVÉ LÁTKY (drogy) AGROCHEMIKÁLIE LÉČIVA : Hypnotika, sedativa ·barbiturátová (phenobarbital, thiopental, pentobarbital) ·benzodiazepiny - diazepam, oxazepam, nitrazepam flunitrazepam (Rohypnol) bromazepam (Lexaurin) chlordiazepoxid (Defobin) triazolam, alprazolam Analgetika ·antipyretika (paracetamol, k. acetyl salicylová, aminophenazon a metabol. -/Algifen/ ·spazmoanalgetika Psychofarmaka ·antidepresiva, anxiolytika - TCA, benzodiazepiny ·neuroleptika - phenothiaziny ·psychostimulancia Antiepileptika (DPH, primidon, valproát.. monitorování) Antiparkinsonika (biperiden=Akineton, Triphenidyl..) beta-blokátory Antitussika - opiáty (kodein, folkodin) [USEMAP] ROZDĚLENÍ TOXICKÝCH LÁTEK (podle izolace) Těkavé : etanol, rozpouštědla (toluen, aceton..) metabolity v moči ethylen glykol (Fridex) Anorganické jedy : kovy kyanidy (CN-) oxid uhelnatý Extraktivní látky : LÉČIVA NÁVYKOVÉ LÁTKY (drogy) AGROCHEMIKÁLIE [USEMAP] Postup při systematické toxikologické analýze 1. screening = záchyt (chromatografické metody : TLC, GC, LC PRŮKAZ imunochemické metody 2. identifikace = potvrzení (TLC, HPLC, GC-MS, UV, IR) 3. stanovení = kvantifikace GC- FID (těk. látky) NPD (N,P), ECD (halogeny), MS HPLC - DAD, FD, UV, MS TLC + densitometrie imunochemické metody EMIT, FPIA, RIA 4. interpretace výsledků IZOLACE nox z biologického materiálu je součástí metod Těk. látky : Head -space Extrakce : L - L SPE [USEMAP] LÉČIVA : Hypnotika, sedativa ·barbiturátová (phenobarbital, thiopental, pentobarbital) · benzodiazepiny - diazepam, oxazepam, nitrazepam flunitrazepam (Rohypnol) bromazepam (Lexaurin) chlordiazepoxid (Defobin) triazolam, alprazolam Analgetika ·antipyretika (paracetamol, k. acetyl salicylová, aminophenazon a metabol. -/Algifen/ ·spasmoanalgetika Psychofarmaka ·antidepresiva, anxiolytika - TCA, benzodiazepiny ·neuroleptika - phenothiaziny ·psychostimulancia Antiepileptika (DPH, primidon, valproát.. monitorování) Antiparkinsonika (biperiden=Akineton, Triphenidyl..) beta-blokátory Antitusika - opiáty (kodein, folkodin) [USEMAP] Toxikologické vyšetření a) kdy: důvod (co od výsledku očekávám) intoxikace, vyloučení intoxikace, podezření na toxikomanii, kontrola terapie (pochybnost, zda pacient užívá terapii), pro účely orgánů činných v trestním řízení b) materiál: odběr co nejdříve krev: 10 ml (bez konzervačních přídavků, zkumavka uzavřená, uvést datum a čas odběru); těkavé látky, případně kvantita moč: 50-100 ml (lépe však nějaká než žádná); možnost odběru i po dalším časovém úseku žaludeční výplach - první podíl c) informace diagnóza, informace o stavu pacienta, o podané či užívané terapii, doličné předměty [USEMAP] ODBĚR BIOLOGICKÉHO MATERIÁLU K TOXIKOLOGICKÉMU VYŠETŘENÍ soudní pitvy - na příkaz policie zdravotní pitvy - určuje ohledávající lékař odběr tělních tkání a tekutin do čistých uzavíratelných nádob těkavé látky : krev, mozková a plicní tkáň ostatní jedy : moč, žaludeční (ev. střevní) obsah, část jater a ledvina (alternativní materiál : sklivec, žluč, vlasy) doličné předměty : např. zbytky tablet, blistry od léků, sklenice se zbytky nápojů, tekutin, inj. stříkačky a pod. konzultace pitvající lékař - toxikolog [USEMAP] Stanovení EtOH plynovou chromatografií - specifická metoda založená na separaci jednotlivých těkavých látek ve vzorku přítomných na chromatografické koloně a postupné eluci mobilní fází do detektoru [USEMAP] OBSAH ALKOHOLU V NÁPOJÍCH pivo 10o ..... 12,9 g/0,5 l pivo 12o ..... 15,4 g/0,5 l víno ..... 7,9 g/100 ml destiláty 30% obj. = 23,7 g/100 ml 40% = 31,6 g/100 ml Objemová % = počet ml látky ve 100 ml Váhová (hmotnostní) % = počet g látky ve 100 g Váhově objemová % = počet g látky ve 100 ml objem % váh. % g/l00 ml 20 16,2 15,8 30 24,6 23,7 55 47,2 43,4 malý panák 20 ml velký panák 50 ml (40ml) [USEMAP] Výpočet hladiny alkoholu v čase t a - d Ct = ( --------- ) - b60 x t m x r kde a … požité množství alkoholu v g d … deficitní koeficient - nevstřebaný alkohol (10-30%) m … tělesná hmotnost jedince v kg r … redukční faktor (muži 0,7; ženy 0,6) g EtOH ‰ = ----------------------- red. hmotnost v kg b60 max = 0,20 g/kg x hod b60 min = 0,12 [USEMAP] Hodnocení alkoholu 0,03 - 0,10 g/kg fyziologická hladina alkoholu v krvi do 0,20 g/kg GC - hodnota se považuje za neprůkaznou 0,21 - 0,30 g/kg hladina není pro silniční provoz významná 0,31 - 0,49 g/kg požil, ale prakticky neovlivněn 0,50 - 0,99 g/kg zcela mírná podnapilost 1,00 - 1,49 g/kg mírná opilost 1,50 - 1,99 g/kg střední opilost 2,00 - 2,99 g/kg těžká opilost 3,00 - 3,99 g/kg vážná otrava alkoholem 4,00 - a více g/kg smrtelná otrava alkoholem [USEMAP] Metabolismus alkoholů: ADH ALDH Methanol formaldehyd kys. mravenčí ADH1,2,3 ALDH1,2 Ethanol acetaldehyd kys. octová ADH – alkohol dehydrogenáza ADLH – aldehyd dehydrogenáza [USEMAP] Adobe Systems METHANOL ̶ ̶Methanol ̶nejčastěji bývá požit záměnou za ethanol. Vstřebává se dobře kůží, ̶plicemi, tyto expozice mohou vést k závažným intoxikacím. Vydechuje ̶se nezměněn plicemi 30 –60 %, zbytek se oxiduje na formaldehyd a na kyselinu mravenčí. Detoxikace pomocí kyseliny listové je individuálně ̶rozdílná, oxidace na konečné produkty oxid uhličitý a vodu je pomalá, ̶hrozí kumulace kyseliny mravenčí. Nastává těžká metabolická acidóza ̶způsobená kyselinou mravenčí napadající oční nerv. Poruchy vidění se projeví s latencí 24 hod. mlhavým viděním, ̶světelnými záblesky, pocity oslnění nebo změnami barevného vidění. ̶Na očním pozadí nastává hyperémie a edém. Mravenčany poškozují ̶buňky sítnice snížením aktivity cytochromoxidázy a tím zásobování ̶sítnice kyslíkem. Slepota je popsána po požití 15 ml methanolu, ̶smrt po 30 –240 ml. Metabolismus u methanolu je asi 6x pomalejší ̶než u ethanolu. Eliminační poločas methanolu je 8 – 18 hod., při ̶léčbě ethanolem se prodlužuje na 30 hod., při hemodialýze se ̶zkracuje na 2 hod. ̶Léčba: antidotum ethanol, podávaný per os (první pomoc 40 –80 ml ̶ethanolu) nebo v 5% koncentraci i.v. v infuzi glukózy, hladina se ̶udržuje 1 – 1.5 promile. Podává se kyselina listová, která urychluje ̶rozklad kyseliny mravenčí. Při hladině methanolu v krvi nad 0.4 promile ̶nebo kyseliny mravenčí nad 200 mg/l je indikována hemodialýza. ̶Antidotum je fomepizol(4 – methylpyrazol, Antizol) ihibující alkoholdehydrogenázu, vysoká cena. [USEMAP] [USEMAP] [USEMAP] Adobe Systems tajemna (1) [USEMAP] Adobe Systems kopinata 02 (1) [USEMAP] Adobe Systems kopinata 01 (1) [USEMAP] Adobe Systems Bohemica 02 (1) [USEMAP] Adobe Systems Bohemica 01 (1) [USEMAP] Adobe Systems LSD a psilocybin – podobné účinky ̶Forma tripů (známek) či krystalů (tmavomodré či zelené). Perorální užití postupným rozpouštěním. ̶V současnosti užívání vázané na subkulturní prostředí. ̶Nástup účinků po krátké době latence, vázaný na množství užité drogy, doprovázen pocity chvění, neschopnosti ovládat pohyby, závrať i nevolnost. ̶Nižší dávky – iluze a pseudohalucinace, sklon k ornamentalizaci, výskyt barevných kaleidoskopických obrazců, mírná euforie, dobrá nálada. Možnost i nepohody, úzkosti. ̶Vyšší dávky- intenzivní halucinace bez možnosti ovlivnění vůlí, možnost jevů depersonalizace (možnost i pocitu chybění končetiny) a derealizace (odcizení vlastního těla) [USEMAP] GHB (g-hydroxybutyric acid) = TEKUTÁ EXTÁZE -uživatelská synonyma: liquid X, liquid E, -liquid Ecstasy, Gaba, Gábina, Easy Lay, prase, čuně, mýdlo, scoop - biologický prekurzor GBL (g-hydroxybutyrolakton) - potravinové doplňky pro sportovce, především kulturisty (GHB se jako „aktivátor“ HGH /lidského růstového hormonu/ pro svůj podpůrný účinek růstu svalové hmoty, a má schopnost odbourávat tuky) - „taneční“ droga s anestetickým účinkem, jejíž požití vyvolává euforické a halucinogenní stavy - bílý prášek s výraznou slanou chutí, bez zápachu, ve formě tablet a kapslí, dnes převážně jako čirá kapalina (tzv. tekutá extáze) aplikovaná nejčastěji přidáním do nealkoholického nápoje především na diskotékách, v nočních klubech a na rave-párty [USEMAP] ZÁVISLOST na drogách TYPU HAŠIŠE (kanabinoidy ) zdroj: konopí seté (dvoudomá rostlina) složky:cannabinol, cannabidiol, THC-tetrahydrocannabinoly cannabigerol, cannabichromen =bezdusíkaté fenolové látky marihuana - sušené části rostlin (proměnlivé složení) hašiš - pryskyřice ganja - kvetoucí vršky samičích rostlin spec. pěstovaných bhang - sušené samičí rostliny charakteristika závislosti : psychická závislost aplikace : kouření marihuany, šňupání hašiše konzumace potravin tj. salátů, pečiva, koktejlů Euforie : pocity úniku a úlevy s příznačnou bezstarostností (vysmátost), veselostí, družností. Změny smyslového vnímání, desorientace, halucinace [USEMAP] Negativní jevy : ztráta soudnosti, úzkost, agresivita, toxická psychóza. zhoršení motorických schopností: odhadu, koordinace pohybů a schopnost rychle reagovat. Marihuana narušuje krátkodobou paměť, negativně ovlivňuje hladinu hormonů v organismu. U mladých žen může vyvolat poruchy menstruačního cyklu. Ovlivnění činnosti mozku a poškozuje plíce Vstupní droga pro další závislosti farmakokinetika D-9-THC: T1/2 = 14 - 38 hod. v moči po jednorázové aplikaci: 1-3 dny při chronickém užívání: střední doba 27 dnů [USEMAP] Adobe Systems SPICE – syntetické cannabinoidy ̶Jsou to látky účinkující podobně jakoTHC ̶JWH-073, JWH-018, JWH-081,JWH-122, JWH-200,HU-250, JWH-398, AM-694, 2201, CP-47, 497…( novela zákona č. 167/1998 z 2011) Jsou rozpustné v tucích a některé potentnější než THC, chemicky jsou velmi odlišné, těžko prokazatelné (laboratoře nedisponují jejich spektry ani standardy), nemají korektní farmakolog. a toxi. výzkumy. ̶Dle experimentu na dobrovolnících po 1 cigaretě „Spice Diamond“ došlo k zarudnutí spojivek, zvýšená tepová frekvence, sucho v ústech a změna vnímání a nálady.V psychomotorických testech nebyly změny viditelné, ale dobrovolníci tvrdili, že cítí zhoršení. Hlavní účinky odezněly po 6 hod. ̶Tyto látky nedávají pozitivní testy na cannabinoidy. ̶ [USEMAP] [USEMAP] [USEMAP] ZÁVISLOST AMFETAMINOVÉHO TYPU (syntetické drogy) charakteristika závislosti : psychická závislost tolerance amfetamin (dříve lék Psychoton) metamfetamin (Pervitin) methylendioxyamfetaminy (Extáze) MDA, MDMA, MDE, MMDA, MBDB, BDB, ... thio- 4-MTA psychostimulační účinky (dávka 7,5 - 15 mg) : pocit dobrého zdravotního stavu, zvýšení koncentrace, potlačení únavy, snížení potřeby spánku, jídla, sebedůvěra, tachykardie, nespavost, zčervenání v obličeji tolerance : zvyšování dávek až na g [USEMAP] Deriváty amfetaminu Amfetamin N H 2 C H 3 C H 3 N H C H 3 N H 2 C H 3 H 3 C O O C H 3 B r C H 3 N H C 2 H 5 C F 3 N H 2 C H 3 H 3 C S C H 3 O O N H C H 3 C H 3 O O N H C 2 H 5 N H 2 C H 3 O O Fenfluramin DOB Metamfetamin DMA MDA, Adam MDE, MDEA, Eve MDMA, XTC, Ecstasy 4-MTA N H 2 C H 3 H 3 C O O C H 3 [USEMAP] předávkování : psychomotorický neklid, optické a akustické halucinace, panický strach, agresivita, pokles krevního tlaku, poruchy srdečního rytmu, zvýšení tělesné teploty Dlouhodobé užívání : přeceňování schopností, stav vyčerpanosti a postupné devastace organizmu Extáze: pád zábran, dehydratace organizmu, přehřátí faramkokinetika metamfetaminu: T1/2 = 12 - 34 hod. vylučování: několik dní [USEMAP] DESIGNER DRUGS (Rave drugs) Co je to RAVE kultura ? PLUR (Peace, Love, Unity, Respect) tanec celou noc, hlučná hudba s jednotvárným rytmem užívání RAVE tablet ·amfetaminy ·methylenedioxy-phenylalkylaminy (ecstasy) MDA, MDMA, MDEA, PMA, PMMA, ·piperaziny ·pyrrolidino-propio-phenony (PPPs) ·GHB (gama-hydroxy butyrate, liquid ecstasy) ·ketamin ·prolintan ·tryptaminy ·PCP (phencyclidin, ”andělský prach”) ·N2O (rajský plyn, laughing gas) symptomy předávkování : tachykardie, arytmie, hypertermie, záchvaty, koma, mydriáza rave = blouznit [USEMAP] Možné prekurzory nelegální výroby metamfetaminu z řad volně prodejných léčiv [USEMAP] Adobe Systems Extáze Od 80 let minulého století jedna z hlavních tanečních drog. Distribuovaná ve formě tablet. Účinnou látkou je metylendioxymetamfetamin. Běžná dávka je 50-150 mg a způsobuje 4-6 hodin euforie a sounáležitosti, vyvolává empatii – entaktogen. Její stimulační účinky umožňují intenzivní tanec bez pocitu únavy. V současnost jsou na trhu tablety často obsahující 10-40mg, místo původních 60-100 mg. Nevyrovnanost trhu způsobuje možné intoxikace. Vyvolává pocity na zvracení, závrať, rozmazané vidění, hypertermii, dilataci zornic. Je často kombinovaná s jinými drogami. Eliminační poločas je 8 hodin. Reagují na ni pozitivně amfetaminové imunochemické sety. [USEMAP] Adobe Systems FAKE EXTÁZE ̶Analoga vyskytující se v tabletách vydávaných za extázi. ̶MDA – má více stimulačních a neurotoxických účinků než extáze. ̶MBDB, 2C-T-7, 2c-T-2 – více entaktogenní i halucinogenní ̶4-MTA, PMA, PMMA –nejnebezpečnější náhražky. Jejich užití je spojeno s rizikem rozvoje serotoninového syndromu. Mají opožděný nástup účinku. ̶2C-B, 2C-I – jsou na pomezí mezi entaktogeny a halucinogeny ̶V 80. letech min. století obsahovalo 80% tablet skutečnou extázi, v současnosti je poměr téměř opačný. [USEMAP] Adobe Systems Mefedron Nejrozšířenější LEGAL HIGH v posl. 4 letech. Je to 4-methhylmetcatthinon (4 –MMC), derivát cathinonu obsaženém v rostlině Catha Edulis. Vyvolává pocit energie, euforie, zrychlené myšlení, hovonost i halucinace. Zhoršuje koncentraci, krátkodobou paměť, vyvolává deprese a panické reakce až paranoiditu. Běžná dávka je 25-250 mg při perorálním užití a účinek se projeví během 15-45 minut a trvá asi 2-3 hodiny. Po intravenózní aplikaci začíná účinkovat během 15 minut, ale jen asi 30 min. Často je užívána opakovaně v průběhu 1 večera. Droga distribuována v internetových obchodech v čistotě kolem 95 % (jako hnojivo, dovoz z Číny). V ČR v novele jako nová položka č.27. Průkaz pouze GC-MS nebo LC-MS [USEMAP] Adobe Systems METYLON,BUTYLON,MDPV,METCATHINON ̶Většinou nekontrolované substance prodávané ve formě čistých látek i tablet v internetových obchodech. Opět Čína. Nejsou dostupné žádné relevantní farmakologické informace. Pouze popisy uživatelů. ̶Metylon- od r.2004 na trhu. Běžná dávka 50-300 mg. Údajně účinky podobné extázi, ale 3x slabší. ̶Butylon- od r.2008 na trhu. Běžná dávka 50-200 mg. Účinky opět podobné extázi ̶MDPV- tzv. nový mefedron Běžná dávka v jednotách max. desítkách mg. Je to mírné stimulancium. ̶Metcathinon- MCAT, derivát efedrinu, v EU již kontrolován. Účinky podobné metamfetaminu. Užívá se šňupáním i intravenózně. Běžná dávka 50 -300 mg.Syntetizuje se z pseudoefedrinu. ̶Průkaz GC-MS, LC-MS [USEMAP] [USEMAP] [USEMAP] ZÁVISLOST MORFINOVÉHO TYPU (opiáty ) charakteristika závislosti : psychická závislost, rychlý rozvoj somatické závislosti tolerance morfin - analgetické účinky kodein (metylmorfin) - tlumí kašel heroin (diacetylmorfin) opioidy - ethylmorfin (Diolan), folcodin (Neocodin), dihydrokodein (DHC continus), hydrokodon, oxykodon (Oxycontin), hydromorfon náhražky morfinu : pethidin (Dolsin), tilidin (Valoron), methadon BRAUN = hydrokodon (po domácky vyrobený z léčiv obsah. kodein) příměsi kodein, dihydrokodein, hydromorfin [USEMAP] účinky (heroin): intravenózně akutní stav: zvýšená frekvence dýchání, zúžené zornice, sucho v ústech, omezená fce peristaltiky po 10 - 15 min. flash (záblesk), intenzivní návaly radosti, srdečnost, uvolnění, pocit dobrého zdraví ztráta bolesti tělesné i psychické, (euforie - ze zklidnění až otupení, tlumení stresu, starostí, tísně, impulsy vnější i vnitřní jsou vnímány bez naléhavosti ) abstinenční příznaky: vodnaté oči, silně rozšířené zornice, slinění, nevolnost, zvracení, G.I. potíže, průjmy, třes Užívání heroinu - snižování potřeby jídla, sexu, křeče, u žen poruchy menstruace. Vedl. příznaky: trvalá malátnost, apatie, poruchy spánku, úpadek fyzické kondice, mezi dávkami návaly úzkosti s int. emocionálními konflikty.. farmakokinetika heroinu: heroin ® 6-MAM ® morfin T1/2 3 - 20´ 2 - 3 hod. v moči po poslední dávce detekce 3 dny [USEMAP] [USEMAP] [USEMAP] ZÁVISLOST KOKAINOVÉHO TYPU kokain . HCl = bílý prášek (řezaný mastkem, jasanovým cukrem, (z listů koky) amfetaminy ) charakteristika závislosti : silná psychická závislost aplikace: šňupání, injekční (sůl HCl - vodný roztok) kouření (CRACK = volná baze - kouření ve zvláštních dýmkách ve směsi s tabákem ev. marihuanou) účinky: euforie = stimulační, dráždivé, zvýšená představivost, rozhodnost. tlumí pocity hladu i únavy, zvyš. psych. i fyzické výkonnosti negativní účinky: výbušné chování, agresivita, poškození tkání v místě aplikace, podráždění (neklid, excitace), sluchové i zrakové halucinace uživatel se dostává do stavu úplného fyzického vyčerpání [USEMAP] předávkování : na psychické úrovni: podrážděnost, neschopnost se soustředit, pocity stresu, vzrušení, nervozita, ztráta vědomí, paměti, pocity zmatenosti, pronásledování halucinace na fyzické úrovni: neobvyklé držení těla, chvění rtů a hlasu, neuróza, silné pocení s třesem, rozšířené zorničky, nepravidelný tep, pocity nevolnosti, nespavost, impotence, bolesti svalů CRACK- nebezpečí předávkováni, vysoká návykovost farmakokinetika kokainu: T1/2 = 0,7 - 1,5 hod (BE 5 - 8, ME 3,5 - 6 hod.) v moči po jednorázové dávce: 3 - 6 hod. při chronickém užívání: až 5 dnů [USEMAP] Základní příznaky testu bdělosti [USEMAP] Informační toxikologická služba Praha tel.: 224 91 92 93 [USEMAP]