Kazuistika Alagillův syndrom Alagillův syndrom je vysoce variabilní, autozomálně dominantní multisystémové onemocnění • •Alagillův syndrom 1, ALGS1 (MIM#118450), který je způsoben mutací v genu JAG1 na chromozomu 20p12, s incidencí 1:30 000 živě narozených dětí, 98% pacientů s ALGS • •Alagillův syndrom 2, ALGS2 (MIM#610205), který je spojen s mutací v NOTCH2 genu na chromozomu 1p12 a představuje vzácnější formu postižení (1:70 000 živě narozených dětí), 1-2% pacientů s ALGS • Základním příznakem syndromu je redukce intrahepatálních žlučových cest v kombinaci s 5 diagnostickými znaky: •Cholestáza (ikterus s konjugovanou hyperbilirubinémií, ↑ GGT, ↑ Chol, ↑ TGL, 10-20% pacientů s rychlou progresí jaterního postižení) • •Vrozená srdeční vada (nejčastěji periferní stenóza plícnice, Fallotova tetralogie, atrézie plícnice, defekt síňového nebo komorového septa) • •Abnormality skeletu (nejčastěji motýlovitý obratel, fúze obratlů, spina bifida occulta, hemivertebra, anomálie 12.žeber) • •Postižením oka (nejčastěji embryotoxon posterior – prominence Schwalbeho prstence na rozhraní duhovky a rohovky) • •Charakteristický vzhled obličeje ve tvaru trojúhelníku s širokým čelem, hluboce posazenýma očima, hypertelorizmem, níže posazenýma ušima a delším cibulovitým nosem ALGS-typická tvář D:\Dokumenty\ala3.JPG D:\Dokumenty\ala2.JPG • • •Embryotoxon posterior • •Redukce intrahepatálníchžlučových cest •Motýlovitý obratel •K potvrzení diagnózy musí být přítomny 3 z uvedených 5 znaků • •Asi 39% pacientů trpí postižením ledvin, nejčastěji renální dysplázií • •Růstová retardace • •Insuficience pankreatu (40%) • •Hypotyreóza • •Opakované infekce • •Mentální retardace?, poruchy učení (delece 20p12) • •Alagillův syndrom je geneticky heterogenní postižení • •Fenotyp 4 probandů s ALGS1, jejichž postižení bylo potvrzeno molekulárně-genetickým vyšetřením • • •Metoda: technika next generation sequencing (MiSeq, Illumina) s následným přímým sekvenováním PCR produktů na genetickém analyzátoru. Na úrovni genomové DNA sekvenována kódující oblast genu JAG1 včetně exon/intronových hranic. Získané sekvence byly srovnány s referenčními sekvencemi genu JAG1 NG_007496.1 a NM_000214.2. Analýza nalezených variant byla provedena na základě referenční databáze (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/SNP). Fenotyp pacientů s ALGS1 Pac. Věk dg. Atypický obličej Cholestáza Jaterní biopsie Vrozená srdeční vada Postižení oka Abnormity skeletu Postižení ledvin Dg./jiné 1 16 mesíců ano ano, laboratorně paucita intrahepatálních žlučovodů lehká stenóza obou větví plícnice v normě motýlovitý obratel Th4 v normě 2 6 let ano ano, laboratorně paucita intrahepatálních žlučovodů bilat. periferní stenóza plícnice nevýznamná v normě nevyšetřen v normě 3 7 měsíců ano ano, laboratorně paucita intrahepatálních žlučovodů periferní stenóza plícnice vlevo v normě ne ren arcuatus agresivita 4 3 měsíce ano ano, laboratorně paucita intrahepatálních žlučovodů periferní stenóza plícnice vlevo embryotoxon vlevo hypoplazie 12. žeber cysty prolongovaný ikterus,růstová retardace, hypotyreóza, infekce Výsledky molekulárně-genetického vyšetření JAG1 genu Pacient zjištěné sekvenční varianty DNA 1 gen JAG1 (NM_000214.2):c.3189dupG v heterozygotním stavu dosud nepopsaná mutace, duplikace 2 gen JAG1(NM_000214.2): c.2039delG v heterozygotním stavu dosud nepopsaná mutace, delece 3 gen JAG1 (NM_000214.2):c.1913delG v heterozygotním stavu dosud nepopsaná mutace, delece 4 gen JAG1 (NM_000214.2):c.2230C>T p.(Arg744Ter) v heterozygotním stavu popsaná substituce, vznik "de novo" Family screening • • •Matka probanda č.2 sledována na gastroenterologii pro blíže neobjasněnou hepatitidu • •Molekulárně - genetickým vyšetřením zjištěna také dg.ALGS1 • •Při kardiologickém vyšetření nález insuficience aortální chlopně • •Další sourozenec - molekulárně-geneticky ALGS1 vyloučen • •Význam: stanovení diagnózy a genetické poradenství v rodině • •Péče o tyto pacienty je multidisciplinární • •Zahrnuje pediatra, hepatologa, kardiologa, oftalmologa, nefrologa, endokrinologa, nutričního terapeuta, rentgenologa, genetické pracoviště a v některých případech transplantační tým • •Molekulárně-genetické vyšetření x klasický skórovací systém • •Molekulárně - genetické vyšetření má význam u nejasných případů •