DŮKAZ TUKŮ
Úkol č. 1: Rozpustnost tuků
Materiál: rybí tuk (1 ml), éter, destilovaná voda, zkumavky
Pracovní postup:
• Smícháme 0,5 ml tuku s 2 ml éteru.
• Tuk se rozpustí. Smícháme 0,5 ml tuku s 2 ml vody.
• Tuk se nerozpustí ani po protřepání, vzniká tuková emulze.
Úkol č. 2: Důkaz tuků Sudanem III
Materiál: tuková emulze ve vodě, Sudan III
Pracovní postup:
• K tukové emulzi přidáme 3 – 5 kapek Sudanu III.
• Důkladně zamícháme.
• Barvivo se absorbuje na tuk a tukové kapénky se výrazně odliší od základního roztoku.
Úkol č. 3: Kvantitativní stanovení tuků Saxhletovým extrakčním přístrojem (teoreticky)
• Známé množství tukové tkáně vložíme do extrakční patrony (s pískem).
• Éter ve zvážené extrakční baňce zahříváme.
• Unikající páry kondenzují v chladiči, stékají do patrony a s rozpuštěným tukem zpět do baňky.
• Tuk se hromadí v baňce. Po skončení extrakce (2 – 3 hodiny) odpaříme éter do rezervní nádoby.
• Rozdíl hmotností vyjadřuje množství tuku, které je možno v tkáni charakterizovat procentuálně.
Úkol č. 4: Izolace a důkaz lecitinu ve vejci.
Materiál: vaječný žloutek, etanol (96 %), éter, kádinky, filtrační papír, elektrické topné těleso, mikroskop
Pracovní postup:
• Vaječný žloutek rozmícháme se 100 ml etanolu, který přidáváme zahřátý a po kapkách.
• Sražené bílkoviny oddělíme filtrací.
• Filtrát, který obsahuje v alkoholu rozpustný lecitin, odpaříme.
• Bělavě-žlutou lecitinovou směs dáme na podložní sklo a přidáme kapku destilované vody.
• Pod mikroskopem pozorujeme tvorbu tzv. „myelinových“ figur.
• Z okraje směsi vyrůstají různě propletená vlákna.
• Jev souvisí s heteropolární stavbou molekuly lecitinu (jeden pól je hydrofilní, druhý lipofilní).
• Vlivem vody se molekuly stavějí tak, že vody obklopuje hydrofilní pól a lipofilní se odvrací.