7. TRÁVENÍ

                               Stanovení činnosti trávicích fermentů


Úkol č. 1: Orientační stanovení pH slin

Materiál: univerzální pH papírek, sliny

Pracovní postup:

Krátkým vložením univerzálního pH papírku do úst určíme po srovnání s barevnou

stupnicí pH slin.

Výsledek


Úkol č. 2: Trávení škrobu ptyalinem

Materiál: roztok škrobu, zkumavky, sliny, Fehlingovo činidlo (I a II)

Pracovní postup:

Do jedné zkumavky dáme zředěný roztok škrobu a přidáme sliny, do druhé zkumavky

dáme pouze škrobový maz. Po 1/2 hodinové temperaci při 37 – 38 °C provedeme Fehlingovu

zkoušku (přidáme 2 ml směsi Fehlingu I a II).

Pozn.: Ve zkumavce se slinami se objeví červené (žlutočervené) zbarvení dokladující přítomnosti
glukózy.

Výsledky

-

-


Interpretace (závěr)


Úkol č. 3: Trávení bílkovin pepsinem

Materiál: 2 % pepsin (2 – 3 g pepsinu rozpustíme v 50 ml vody), zkumavky,    0,4 % HCl, destilovaná
voda, bílek (bílkovinný roztok BR)

Pracovní postup:

Do zkumavek napipetujeme následující roztoky (v ml):

pepsin             HCl                 BR                  H[2]O

1.                     3                      2                      3                      7

2.                     3                      2                      3
7          povařit BR s vodou

3.                     3                      2                      -                      7

4.                     3                      -                      3                      9

5.                     -                      2                      3                      10


Zkumavky temperujeme v termostatu při 38 °C asi 40 minut.

V každé provedeme biuretovu reakci (důkaz peptidové vazby za pomoci roztoků NaOH a CuSO[4]).

Výsledky

Interpretace

Pro sebe:

(Biuretová reakce je reakce, při níž se dokazuje bílkovina pomocí směsi roztoků hydroxidu sodného
NaOH a síranu měďnatého CuSO4. Bílkovina se při důkazu zbarví modrofialově. Biuretovou reakcí
dokážeme peptidové vazby, kterými se navzájem váží aminokyseliny. Ty tvoří v alkalickém prostředí
se solemi mědi charakteristicky barevný komplex-biuret. Do zkumavky dáme cca 2 ml odfiltrovaného
mléka, přidáme cca 10% roztok hydroxidu sodného, min 1 ml, aby se směs silně zalkalizovala. Poté
přidáváme po kapkách roztok síranu měďnatého a lehce promícháme skleněnou tyčinkou. Poté vložíme do
zkumavky a začneme pozvolna zahřívat. reakcí by měl vznikat biuret odlišné barvy.)






Úkol č. 4: Trávení bílkovin trypsinem

Materiál: zkumavky, kádinka, 2 – 3 g pankreatinu (rozemletá slinivka břišní), destilovaná voda, 0,2
% uhličitan sodný Na[2]CO[3], BR

Pracovní postup:

Do zkumavek napipetujeme následující roztoky (v ml):

trypsin             Na[2]CO[3]           BR

1.                     5                      3                      3

2.                     5                      3                      -

3.                     5                      -                      3

4.                     -                      3                      3

Zkumavky temperujeme při 37 °C (vodní lázeň, termostat). Reakci je možné provádět s čerstvým i
koagulovaným bílkem (natráveným). U koagulovaného bílku vzniká biuretovou reakcí červenofialové
zbarveni, u čerstvého bílku zbarvení modrofialové.

Výsledky

Interpretace