Postup při přípravě agarem ztuženého média

                                               1 litr

   1.    Navážíme 6,5 g agaru, vsypeme do 250 ml destilované vody v SIMAX láhvi, promícháme a
   necháme rozvařit v autoklávu.

   2.    Do Erlenmayerovy baňky odměříme 500 ml destilované vody.

   3.    Přidáme koncentrát makroelementů (100 ml), mikroelementů (10ml) a chelát železa (5 ml).

   4.    Přidáme vitamíny (1 ml zamraženého koncentrátu).

   5.    Navážíme 100 mg inositolu.

   6.    Navážíme 20 g sacharózy.

   7.    Podle potřeby doplníme další látky jako aktivní uhlí, růstové regulátory apod.

   8.    Slijeme rozvařený agar s roztokem v EM baňce a doplníme v odměrném válci na 1000 ml.

   9.      Změříme pH a upravíme na 5,7 pomocí 0,1 M KOH nebo 0,1 M HCl.

   10.   Médium dobře promícháme přeléváním z válce do EM baňky a rozlijeme asi po 40 ml do
   kultivačních nádob.

   11.   Kultivační nádoby s médiem uzavřeme vhodným uzávěrem.

   12.   Následující den sterilizujeme při 121°C v autoklávu po dobu 20 minut.

   13.   Krátkodobě média uchováváme při laboratorní teplotě, při skladování po delší dobu
   používáme lednici.

   

   Poznámka:

   V případě, že používáme komerčně dodávanou směs pro přípravu média, nepoužíváme koncentráty,
   ale navažujeme doporučenou navážku podle údajů výrobce.

   

   http://www.sigmaaldrich.com/Area_of_Interest/Life_Science/Plant_Biotechnology/Tissue_Culture_Protocols.html