Datum:

   Jméno:                                                                 

   

Téma:                Mikromnožení kultivarů miniaturní růže

   

Kultivary miniaturních růží se velmi dobře rozmnožují metodou in vitro. Iniciace kultury a její
další  růst a vývoj je silně ovlivňován genotypem zdrojové rostliny.

   

   Materiál:      Prýty in vitro kultury miniaturní růže (Rosa sp.).

   

   Médium:

   RR = MS medium, vitamíny B5, 3% sacharosa, 0,8% agar, 0,5 mg.l^-1 BA, 0,1 mg.l^-1  IAA, pH 5,5

   

   Postup:

   1.    Přenes kultivační nádoby s kulturou miniaturní růže do sterilního laminárního boxu.

   2.    Připrav kultivační nádoby s čerstvým médiem a sterilní nástroje (pinzety, skalpely).

   3.    Ožehni okraj uzávěru  kultivační nádoby s kulturou a po otevření ožehni znovu hrdlo 
   nádoby plamenem.

   4.    Vyjmi kulturu z kultivační láhve a polož na  sterilní  Petriho  misku ve flowboxu.

   5.    Rozřež prýty na 2nodální segmenty a odstraň listové čepele sterilním skalpelem. Ponech
   pouze 3 mm řapík od každé čepele.

   6.    Odtrhni sterilní pinzetou zbytky řapíků a odhal axilární pupeny.

   7.    Zapíchni bázi segmentu do  pevného RR media a láhev uzavři uzávěrem.

   8.    Popiš kulturu.

   9.    Zapiš počet segmentů v kultivační nádobě a počet inokulovaných kultivačních nádob.

   10.  Kultivuj na světle (cool white, 30μmol.m^-2.sec^-1, fotoperioda 16/8hod) při 25-oC
      po dobu čtyř týdnů.

   

   Hodnocení:

   V následujících týdnech kontroluj kontaminaci a růst a vývoj kultur. Odstraňuj kontaminované
   kultury.

   Po čtyřech týdnech zaznamenej koeficient množení (průměrný počet prýtů na 1 explantát).

   www.aseanbiotechnology.info/scripts/count_article.asp?Article_code=21018038