Separace molekul nukleových kyselin centrifugací Relativní odstředivá síla Typy centrifugací • Diferenciální – separace směsi homogenních částic v heterogením roztoku • Zonální – separace směsi částic s podobnými vlastnostmi v gradientním roztoku • A ) Izokinetická – separace dle rychlosti sedimentace - stanovení sedimentačního koeficientu S • B) Izopyknická – separace dle hustoty částic - stanovení % G+C - separace různých forem DNA Příprava lineárního sacharózového gradientu Stanovení sedimentačního koeficientu POLYMERÁZOVÁ ŘETĚZOVÁ REAKCE (POLYMERASE CHAIN REACTION) PCR PCR – Enzymatická syntéza PCR – Složení reakční směsi PCR - Podmínky standardní PCR reakce Proces amplifikace PCR - Optimalizace složek PCR PCR – optimalizace koncentrace MgCl[2 ]PCR – optimalizace reakce PCR – optimalizace teploty PCR – detekce PCR produktu Multiplex PCR (mnohonásobná PCR) PCR - využití metod PCR