Určování velikosti a tvaru makromolekul



   

   

   

   Struktura makromolekul – od primární po kvarterní

   

   V pevném stavu (RTG – absolutní metoda) x v roztoku – vliv hydratace, iontů, asociace atd.

   

   -         hydratační voda – 0,3 dm^3.kg^-1 u bílkovin, 0,5 u NK

   

   Stanovení M[r] různými metodami – rozdíly TH lze posoudit vlivy prostředí

   

   

   Popis částice (molekuly)

   

   Tvar rotačního elipsoidu pouze 2 osy TH 2 jsou stejné

   

                                                                          r[1] = r[2] =
   r[3]        koule             

   

                                                                          r[1] = r[2] <
   r[3]        prolátní - doutník

   

                                                                          r[1] = r[2] >
   r[3]        oblátní - diskový

                                        

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   Aplikace metod separačních a analytických

   

   Metody statické – rovnovážné

             

               určení rovnovážné hodnoty měřením – výpočet z termodynamického vztahu

   

               osmometrie                              П

   rozptyl světla                           R[J

   ]RTG rozptyl v malých úhlech    R[G] = Ö r[m] pro kouli Ö3/5 r^2

   sedimentační rovnováha           dc/dx               M[r

   ]

   

   Metody (hydro)dynamické

   

               sledování pohybu nebo orientace molekul vlivem vnější síly – výpočet z kinetického
   vztahu

   

               sedimetační rychlost                 s          R[s

   ]            difusimetrie translační   D         R[s

   ]                                 rotační                Q         R[s

   ]            viskosimetrie                            h[sp

   ]

               MS                                                      M[r

   ]