5* L UtlINlSCENČŇi' SPEKTZOSM) P/£ PODSTATA LUM1NISCÉNCE F OTOL U M IN/Ô CFNCe - čč ku h cjdhnŕz a!ŕ eh / 'po abs ot/oa' fór,'*ai+ťho FLVOUBSCČNCe F0SR)RB6CENcA podle DOBY T>Q£VITU SC - totev-s«! sien* A- absorpce-K- vnitrní' konucrée im riiiww"»-»<■' ■ .-y ji STAV« ^ TRiPueTo»e OTAVY 11 •'** FRANCK- CONDONUV PRINCIP Sr -f2. 13 s2 -> s, Sf,«t t) EXCITACE ~ 40 & VNTŘNt'líOVVFfíľ.S ** 4ü~ rZ- ^ VKčchovy 34 —* ó* 4J NE2ÁňVA'vWT$yií \TEPLo) 1) lA'ttWÝ PRECHOD - Flt/gggSCENCE -v ^"g- ^0"^ S) I NT ERNSTE H CROSSING S4-*>Ta ~4G'1'- 10~44 S> (k) 2AfČiVÝ PfeCVOD - FQSFQŔB &CBUCE Ta SQ » 10*- 1oh hE2A$lM'vEAUTtVACE - FOTOCH£MICKErXEAľCE - PŘ£MĚHA M* Fk FLUORESCENČNÍ' SPEKTROSKOPIE EHl&E OV, V/S ZA'feNl' PÜt PAECHOÖU 2 VIB/MČW'HLAVIC v-0 ExctTOVAfeHe singletove'uostavus4 ?>o R(7zA/ÝCt/ Ml ZRACÍCH HLADt» ZA'klA VHlHO &TAVO Q0 * B ZE ZMĚNY MVLTt PLfC/TY • 8/fi/QLďT --■* ZivéLeT ^ -*Sfi A2ULEH S% -=> % blbové délce buettďbo Zcítettf (toi>š*k *u*,'m,'t urtťtou řy 777 EXCITACE (ABSORPCE) : S^l0^O->S4i0-=Q SCí/V—Q 4) FLUOPESCEHČHl'SPEKTRUM 3E DL0VHO\/LNNĚ3Š'ŕ ÜB ť EX'C t TACKJt' V PfeCWl>Y(30/ir*C-* Sf4T= 0)a(£i/V~=O -*$>/r=o} í TJ. PÖBCHO O r 0~>0) MAlt'TBORETIClcy zTE-JAsoü TL f LATI si-> 'BEMZA'NrWROM mzAcw &TZ0WOZA' \0 A* _4 ZPeKTXLA , /v VI B. POVHLAVWh zxcír- STAW FLUQgg<;Cl=Kiobha'6eoHer*te ztavv* %<*$< J~?*i*er*icKc Pa'$1 A F Tip (0-0) ^ XA (0-0) batkoeliiro**/ f)o&uh t tutmkt* ~ => FRAHCK-C0N00ND1/ PtoNUP: v oka m i tu \,%bu*ek,'^a'nofeU<«(q \í epořddd*i\ óo ttei^ko u*a(* -yovefde dodtxlcč*é. Z hovuei/di- u$pordda(i*i'doclt4r*i~ A E KteBľ &4 a 5^ fMetfi/fte^foar cstki-oryoď «>^ (0-C,: -1____1___d_- >0*A-ŽIVOTA PLVOKESCENCE *S^r -doba vkkasMht'exit ^p = ■=—■ 7 -ft. - ^cUlotibS keustauiý telaxacrbibU £-J J^a 4o*ocesot( fíkovesc. ý*iíč. kouvetrze /i' nezrz^aí. f>fecUodí zUckf&LieOtrDO $o $ YrZA'Č&Nl'M &70AM/J lNT£M2lTA FLUORESCENCE je u*?*»*'' kirn ttioy^mu Pfie*!*« §0- dojoa daj/ď tok, $~ 2e&LJ. 2,303-ß-e-S'Z'3P'S' 3l y J -£-------------------------------- T S 4) Z HA SE AJ /FLVOZe&CE-hJCE F \^ * MOLEKULVAKCFPTVtÜ, fCTERÝ 0DVfMAr E WE Ač// EXCITOVANÉ molekule , ^AtCEP70r^ MifiEMťrVLA&TJjť C- FLVORE&CEKJCI ZVAŕŠEfj/- OEHO PAAVDPPOfloBW&rACHTES Do BOO %*- S, KOP/M >C«*4 OfvtotfoouttědfedJ l O wry ; viupeu 2ltto*bdcS AN f o a/t f: F< NO'^so*^ acc (coo)z ol^eu^ tioírtreu* zeU* ^yf t je -11' pče £>* v extfbzČHťlto Cab*0&č*ťl*o) * Hi* ore scenario s^eUij^ *=> 2? slabôt«/ Tp éb{sieä*»t4 ŕecib*orfoctf. /- exei taCni'i^ /#«J emisní z-flteJ HAT)''FftO ďtSTOV LAfTVv- 7&TOICRfTB^ßßürf élSTOTf TR03#02MtRAtďDlASXAMy JL 9^(\u.t7lex^ Fluorescence a chphicic/C stmutvaa ?£eX>FV£LAI>: joh'totohObť ZfrskShi.u subdue delok&lfi-o- v#icli*ucti elelériotitf- koejufioyatt/ťo s(fštJu4t< Or-ekkiťcu? st EMPIRICICA 'PfZtVlVLA PRO FWORE&CENCI 4) Ne*ť-fi' síLkA absorpce <2sOhi»=) »eh*'flnoiv&ceuce C2/oiraýŕdU ľte/rolŕk h* de k lotet, <, cd fed e h @@) 3) Jesŕl/Če yi€fydlo^ovlkH^it'/oQfs absorpča f * /n-^fr* => l/ŕ/tof' siaha' filttOhescrttCf^tltoťtočila'fofecCioGtoiŕq' foírarde'fodobnost^oo/aak ISC'SS'> Tj =>&&fc£bscevce (GrotKaírcke'afofettjdff keton* kat-bokovSkyselte«,) 4) č/t« je réfei'E^Ax Htfdleo t*oUť«ŕ/9)%o dbs. /~ors^ fr-^Tr*- % ->^ a d,'ut /e fate foo's is/oe poi*uui~ Hefa ztefš,' fofrkltcL: ;/ koí^cíe^2ůyaux.cUi fade h " faiaMtru, X^~ 5 *7?A u* ***** toH/uflOC* a Zw'seu' fluorescence X vteKcíce b"*ŕhe"i>nr Z) STABlUZACe ľOPLAA/ARjOt'PoLoHY <3) VQžbou nebo k*i?$tíreui => z#(oiAs*ft*á*.ť SlFÉVíl PLVOXEhJ "2X 0 Qt$ Ä S) Substituce (n) subsh'+i+euté-, kietSpoiLzL/iun' BATHOCH^Mkj/ 4 HYPFRCHPOhlvŕ POSUM ?oŕQd7i/lSru: CJR < CH* £ 2ktx&oi/ďi ene*je/y\!lr*' 2**Kiý íha**? S MV~*-f g Iľfr* - />,*>« /ý/bb/ooÄu//' -*=■> heŕ/uoreslsuje v Hepc/a^*/** a^/uofir^/e umpofctl*/^ CH/AJCUV ~<& i, /téMASCS fli***€slr. i/ CeHrOH INSTRUMZNTACE Plo FLUORESCE N ČN( SPEKTROSKOPII *FL (ZOR/METR Y EXCITAČNÍCH * SPEKTRALNi'FL(/OR/M£TKY - metem' speldeŕ ^FLUORESCENČNÍCH V2 \IZ- VZOREK D^ - MOMPCHR0«/rOR p . FOTüMASCBIf' cm Ml U, Mhau •w. .' <-» fOrCHKAT ČUHEtc *Udsieltie barvivové lasery ?Dl3PEft9N>' * interferencí r<^l JEDNoduch-e" ^ rHvtlkovtfMuooUisVKcíit* f>*0 íhon*ce*ewt. . # Zmüzlcofe'wfiocUo»*- f>*oexe#. i-fluor- &P- DETEKTOR y PMT (FN) -rno'vtÄsi^SpcW. cW^teir^frk, c m i'sm' spektrum ovíivnino ptomeuU'vou ďilŕva&tt ru s vlnovou délkou- Ha, k\ vstup. ftŕ*i*i'(& tattmefw* hETVDIk-A MÍČE U ť tíehio rm^istrujt p C,' pokut. H S* nástavci«,' Af£m) & J? (et*)m+x Ztuhnou /t <*Gr\)*****, DO l>OSfi,2EKjí KONST- POLOHY %C*l*+*)Ě?l-tex) H*«-&1 C^-CH-r^S <0> modto', c\ío\je 6m „ „__ L*°&4™ J» 11SOLFÁT CHihUHV W.U STANOÝEHl'KVŔHTOVCHOVÝTĚŽKU FLUORESCENCE €Z (CHBS-standard) AexusT) '^excOO Ä- 9 JF* . Ast LPAHke'fi.) A^absotbance^ nebi SR JF> sr S F* flocke fluor**. $f. S y '^rf^' 4^r- ^^'eu<) ( BA B *oj JFST /»y nST(n*Lxxeiu) Kay/Htm*« a ~fli«oirescekr*i'rHAxiyumM Wťz^e'ht'íce./ f*jY? kv&t+i. vefičtek se určuj e. APUVACE FLUORl Oblast vzokk^ AMR. b AU KUVIlCM eleHyoľuiu C*ioCh€h) sieýoŕdL. tť prd ty aiMiholŕflZ. muiAvl&jlľc. CI\2k\Mty directum Méh fooh'tfr. i/i'řak«i'<í V HETRIE r'Zi'KLAV'f CM" S»p*~ S0^') F" e$ttoveu^ f>ro kifewtťcttkir, footrjfrťťt. auii'bŕottke o^ifmalosťkt\ OBLAST (EKOlOek) PfífateL BKPERVžY 2hj£ČiŠVĚk)i' VODY A l/BDUCNO k&titatoť\*ol/ať* mat. bakie frblof. 1/3. iktoxikPf Soli'cUa'tp, fOČÍÝO ZeuQ ' fluOlre*C*l*Cf 2>pr Girotuaifr, vety»/. /0Hteuf cUruSfk>f freuzfyrev, stop. iieUki'k*, TĚÍKLAĎY HBTOP l)s>rANOvekíŕ Rkv*&na *Ačl Che/J&äs 0R€> CWDLY NCfbO TZRNARNiCH KOflPLExÔ ČINIDLA: ?OLVHVDR.(?xyPL^Vc?fjy/ g- HYt>RoxyCh)MoUv h 2>iHYP£o*Y AZO&AMlVA A20Heiftl^Y OD ACHATIeti'chf třY&čOXYALVBHYtX? C $AllCrlAi~VEHYľ>)( ti*tDZOKtA-ttL H\&ßAZoU*r, RHopAHthiß, ?OLt(FB)Joi\/ FčlooiKAíZ.&OKJové £YSELi/Vr } &EVZOUU VHCDneT IOUTV Pf*l/<(J; e/. kö<+fauK\cf S^ sfyW0 ?a^a€ tobtet*/ d- ohriaty ; M*+ &a *% T*3tt He2*, 30>ö Br(10), tťf(lV)f TU(f{/)i Sc3* &e (M, Sh(f(/) g u* Gq*> Afo2* Lau Í* LaMaxotelu . Lonitefoŕctk, (ry,£+J sV^^J, *,*(?--fa*«*"*/''*?«, 4,3 -e»otŕi. d,'kET)CKV VÝTĚŽEK dl čfi & - i-em ' a Etc ch eh etc exc *«c >** ^£* »%*. «—»>-»&»<«&! pluokihetííická' indikace: ekvivalehČHi'ho 3ot>(} ' ^~ Pit £DTA TI TR AC h Sit\Hovei«ť Co.2* Sir'* BaíÝ v pH-fou*uoi,h' ■f/uotexoiH.r pri- faU= 4 Z j ■f l <* o t es hjť ohe/oYc iuclíh/ic** yFiuouesceA/ČA/t 'acipo ba a cice ind*ka '70*. Y X- A/A Fm AUIV pH |4- ¥/ , ty. -f.C-) -•> ^llc.-f i^lotn'h CH I Hl U BI SULFÁT pHZp-Sp lcejš.1 -«odra'-ycilki. fo/ai, AKllblV pH tt,f-6tC tys. f. Zffa«ŕ-9 Ck/f-. f. iŕaovLi Někieve'ľont*, ftčeoíod. fot-vkú" poiredukcľ NUzCh who au^/a.Fct C' GuS) Fe** V**) redukuj,'arem»xlvUJJ Karbonové kbseft'Uy, C ty S. fhlovo^ Ioeu2oovo' /, ? - b^-tct, dtkafltrOHoíra') na Irodťfceí —} fo&roXokuselťbQ (tt«.odl*i ' $io*o vei*.ť loara (*>.a^^e ^t'clc^c^ řotťhf xíoačvi' r 1 ) m& %f+ďnroin (A- y&T/l NO VEAJt' ORÔAM&ryCH &1.0 u c e NI M XQuiketoOvZ'oterľiŕcŕíu fŕfuorpsce.'u rCoc/a«*.th) fCOrÍ!(ŕrľin/ alkaloidu hohttOUt i/i'ÍOiui'tiu awfi-fiačfír -fe^aufUtrgh salŕctflah, ace^/^Z/cj/ot/o'/tj-J-e/ľctct D KVA 21Č A MVA MOLEKULOVÁ FLUOQesCF^ (EFEKrôP0L5KÉH0) Nl'2KE TEPLOTY CfV/S 40- 4Sk-) - 3i=»m'stM(£T(jÁa\ EŕftSfJ/'Cff CFLVOME&CEMČM'CH) MAXIM V A- ro2A p,' emism'ho pa'so. ARom/ty, P0lÝŕ0A//>FA/2A'7y *> ■< w MEČEUi VE ZTVŽEtíEtl STAVU ROZPOUŠTĚDEL ( AJ-AL#A F ? ) Si'tZA MÁKIH JOcu,'! Hťäl'SE : NAFTALEV 1/ A/-PB/UTAaJU BeiJZ PHEW, ANTRA CPU 1/ ÁJ-HEPTAW VOiH KONDENZOVANÉ' ajaftac^ „ »-ncuaFo ttANCeROQENHl'UHl OVODÍKY Pf #ev ľ to- HFxaahs Cd m iO'^9" o*f.alůUfitfif/ry* čoRoFejl u to- oxtaaiu EXPEfUHFtJrfLPť VSPOČXdSvi 'í v e Ká TAČAjťzDto a : LAS, F/z y'DlS>PFRSAJť'ZA/t/gEAjF: MrYíFOVE' MoAJOCfŕFo MA^TO/ZY KWb7a> 0ímm tCjě&HmJM*''trubička (do de ma?. to*'t>o, VHoDUEf4kro VFTFľCF kĹ SEPARACMM MFtOP/h4 TIC, G>Ct NPLC FL U ORE&CEUCE V PEVAflf FA 'l! O,) TAVEMHj Ihiel*B-i vh i''zelenoj/uio 'fJuorefCŕHC-f UOf* " &*■«*''*a roĹt 3oX Na F r T^OXfio-K) CQ . 3ŠX A>aFr $% LíF. 40?o AhF-h ^5% ^2^°i ■ v~ozůxrc»o/'at«ŕs ser $akj/*eť JOmfauťpfrť o^O'C et i*eol*o se /o <£, raVeuťity ir«ii'»ŕlefarJ'kot/r^ &£OL06f£. 0/OC- TEŕU7/AJy &) yo&iöB PoLovooioovEffo Tyro ľ p/t/'ronvosr/ 3 r O PO \AfCH AKDVA 'TÓRO* C10 »Ft PŔECIfODtf&U PRV K J) Vznik. ll*mŕitŕS&§mt íoo tyoravei*/''mrí/Ao r* hoFíÍiS/' (knakit, jnko Cik-lťi/ato*« do hosi'c"e foofo &><>//'co vrue t-upcfcc ýoo jeUo vy ž'ha'hťfofr Zto/ŠH**'utlto ifysokS teplotf. o UV ^~> ewťs-t* ělufoietetoCk'pro Sb (Hf) M vdťO í t Q f Q Va'jOirO B ť &$Ů t p O t/% Š> 'kaftof to 4 ftoflŕ. Iŕaka-ebT Cct Q fch'tŕOVa nt/* po šOu*t% if i pl>, iOCOX, Labil** Moiety =? &n*/£i<ŕ>. «**' - 7>J í40 A 90o*c- kru i+«*i VHKLAO 3EVO* Akiirftor vjovfovoeítrovJ* *os.ŕ#ť u lofafraaet e*eircch'c{afc(* h lad 11* v Zak^'a****** foakuX LťUtťtoť&efbŕttf'ceufra C L) - dohohu, efektivu«" htfosfabiltiShlGdľtiu^CM) -akceptar* ekkfrotu Wŕ&KCľt&tt* u*l*i'HL fe&teHtľ íerV ZpeíttSu« ýočecU&clcf pŕrs {/odľyoUu,' fDčŕstoo clo CU. & '** FOSFORESCEUCHt' SPEKTROSKOPIE ma (rosßroRI METRIC) E H'SE W-lŕ/S ZAŕČ£AJt' péi'p/tecHoou Z ASVLOVZ' VlBMČAJ/'tíLA&ftJY exaTOVAHE^HO ÍR/PLEŤOVÉHO STaW\ Zf 2)0 RolVY'čŕ/ \ŕtBMČ~A/>'CH HLADIk/ ZA'ľLA 1>AJť//0 S I N6 L £ TO VEHO «S TAV(ß S0. ZHEtNA MVLTíPLIC/TY - zakázaný'PČBCHod X SP/il» 0*8/TA LAJ/' /A/rEAAľCď ^> íÄFpšFTw PVA/trCE S U/SČlrTŕl &PIHČM 2/SM i SLOÍKU <7We MOLT/PUC/TT --> Z/ubi WVE A TňtPL&7DVE' STAl/f SB SN/sľ WLVO(l£ÓC£AJC;pl'(/U// FOl.FOfiCS.CEAJČ/Jť)sPE£rAOn ASF2AÍ//S A/A VlMovE? D^LCE BVDi'cŕ/iO ZAr£SV/'. vs,FOfi5&eEv&J(' spetrpoM fosowtv k. vtšsŕ/i Pi .miPLeTDvef'stai/y maoS m£š/sveaé// a>£*~s//j6.ls-/diM 1/ FO&FOR- SPEZTROh HA''I//Ö&KX//''S77tveTlJ*c> CJAkrOPl\ VVoba š/uoTA Yo'^s A ě40*s. -? velca'r&wp& podobnost zm/ŕry e»eR£/E A/ezA'&vť/r p/tea/o * vuiTtv/Kevvmi,' j* SMÍŠKA*/ S HO Us KOLÁM i * FOTOCt/eHJCXOU REA£C/' t\ ~J Netze héč/tpri L.A &CKA TOR MI' TE/fflĚ •:;:: ZUA^sSiß/- PAWHASAJer/Ce/H/ LA'rtCAfli CtĹisWk.) =? Nisrvé roztop y domcaj/h.ď odvzduŠNiT. ht&eui': PtT/ ?~?K (čapalkj/Nz) => tu Hr'sxlov/t\ PRIESVITNÝ' ROZTOK. SHts fi»**?(^^0, liOPEMTAh,J'M £4 »a'stavcem vžorzk v fote K&MeNviT KYver&uLDŠčvď u vEmeouř M 'j)G 8P (Á/2A Ojoo L ý) ľfW2l TÍDLooMŕttO TRVA'fi/ŕ FO&FOZESCEk)CE it&OßBZ. Sč SJŮ/dA l/ž FXCIT V JE 4 PA£ EHfTOJE-. a) 2FCQ0ERELUI/ FOS>FOZtMETZ- HFCH-AJV/CtcY'ZOTUvľč, PŔECWtoVAC +> JOOO of/*,'*, kp»7)WAÍvf2P60D -^teotOTLAtA' H6 LAMPA /lj/>/juDA ! cASOVé APLIKACE AĹlĹALOlbY PESTfCtfyLČ&W/l, AWVO&SEUhY PčOTElJJ)' ^f - si ŕedc< t 'olefac* t y vo'* /' c4o%l/ľt^ C ýos fviresceuc e) y ~t pŕť %= /£/e. F-prCi-j^rc-tMl f=OS FO K ESCE MCE SMESl AA/ALrľl/ -/terOM- dAS0frf/o RoZUŠŠMl'