Bi6120c Rostlinné explantáty           Sylabus cvičení                       Jaro 2011


01. (23.2.2011) Úvod do praktika: podmínky axenické kultury a požadavky na vybavení laboratoře,
typy kultur, kultivační nádoby a různé způsoby kultivace, seznámení s kultivačním systémem RITA®,
bezpečnost a organizace práce, protokoly, literatura.

02. (2.3.2011) Nácvik práce ve sterilních podmínkách: sterilizace nástrojů, vody, nádob, živných
médií, pracovního prostoru, metody povrchové desinfekce semen, sterilní výsev semen, spor kapradin
apod. (Nicotiana, Daucus, Drosera, Linum, Phalaenopsis, Pteris).

03. (9.3.2011) Příprava živného média: různé varianty tekutého a agarem ztuženého média (MURASHIGE
– SKOOG 1962, GAMBORG a kol. 1968, atd.), příprava a rozlití do kultivačních nádob.

04. (16.3.2011) Nácvik práce ve sterilních podmínkách: pasážování (přesazování explantátů do
čerstvého média) sterilních kultur (Drosera, Dionaea, Saintpaulia, Streptocarpus, Nephrolepis).

05. (23.3.2011) Mikropropagace: Odvození primární kultury bylin, různé zdroje explantátů - list,
stonek, rhizom , regenerace de novo: Saintpaulia, Streptocarpus, Begonia, Nephrolepis, reprodukce:
množení nodálními segmenty (Rosa), srovnání multiplikačního koeficientu a vitrifikace na agarem
ztužené půdě a v kultivačním systému RITA®, porovnání kultivačních podmínek za různých režimů
osvětlení (PAR, teplota) v obou kultivačních systémech.

06. (30.3.2011) Kalusové kultury: A. iniciace kalogeneze- založení primární kultury kambiálních
segmentů kořene (Daucus), založení kalusové kultury (Ajuga reptans). B. Vliv různého poměru
auxinových a cytokininových růstových regulátorů na organogenezi na segmentech hypokotylu tabáku
(Nicotiana tabacum).

07. (13.4.2011) Meristémové kultury: A. Izolace apikálních a axilárních meristémů bylin a dřevin
(Dianthus, Clematis, Rubus); B. indukce tuberizace na nodálních segmentech (Solanum
tuberosum);      C. převod rostlin do nesterilních podmínek, aklimatizace (Saintpaulia,
Streptocarpus, Nephrolepis, Drosera, Dionaea). Detekce stresu v průběhu aklimatizace rostlin
fluorometrickými metodami.

08. (20.4.2011) A. Izolace zygotických embryí: založení kultury – desinfekce semen, izolace embryí
a jejich inokulace do živného média (Picea, Zea, Capsella). B. Kultury nižších rostlin: kultivace
dřevokazných hub (Pleurotus ostreatus, Lentinus tigrinus)– udržovací kultury a příprava očkovacího
inokula jako příklad suspenzní kultury.

09. (27.4.2011) Somatická embryogeneze: indukce přímá – apikální meristémy hrachu (Pisum), poupata
úborů cinerárie (= popelivky) (Senecio cruentus – hybrid), indukce nepřímá – kalus mrkve (Daucus
carota), srovnání produkce somatických embryí na agarem ztužené půdě a v kultivačním systému RITA®.

10. (4.5.2011) A. Indukce haploidních rostlin: Založení prašníkové kultury, srovnání regenerační
kapacity různých linií tabáku (Nicotiana). B. Fytopatologie in vitro: certifikace čistoty kultur,
test čistoty kultury Solanum tuberosum a Nicotiana tabacum.

11. (11.5.2011) Kryoprezervace: izolace axilárních meristémů brambor (Solanum tuberosum),
enkapsulace meristémů do alginátu, dehydratace alginátových perel a jejich následné rychlé
zmrazování v N2.

12. (18.5.2011) Exkurze do Laboratoře rostlinných explantátů Mendelovy univerzity v Brně a
Botanické zahrady a arboreta Mendelu.

13. (18.5.2011) Kontrola protokolů a zápočet.

                                    změna programu vyhrazena (podle potřeby kultur)