Figure 4-23 (part 1 of 2) Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
figure 4-23 part 1


MNase



Figure 4-23 (part 2 of 2) Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
figure 4-23 part 2


 1      2     3    4     5     6    7     8     9    10
Na SDS polyakrylamidové gelové elektroforéze jsou patrné 3-4 výrazné proužky
odpovídající 11,5 kDa (histon H4), 15,2-15,9 kDa (odpovídá histonům H2A, H2B, H3)
a proužky odpovídající ostatním variantám histonových proteinů.
jamka
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
vzorek
marker
vzorek 1
vzorek 1
vzorek 1
vzorek 1
vzorek 2
vzorek 2
vzorek 2
vzorek 2
marker
koncentrace (ug/ul)
----------
15
15
15
15
19
19
19
19
-----------
objem (ul)
7
0,33
0,66
1,33
2
0,26
0,52
1,05
1,58
7
množství (ug)
----------
5
10
20
30
5
10
20
30
-----------

chromatin fragmentation



Pufr 5xA, 100 ml:
50mM NaCl                                5M NaCl
50mM MES pH 6.0                     0.5M MES
25mM EDTA                               0.5M EDTA
1.25M sacharóza                        Mr = 342.3
3% Triton X-100                          100%
750mM spermidin                        1M spermidin
Pufr 1xA, 100 ml:
pufr 5xA
voda
100mM PMSF                              0.1M PMSF
20mM b-ME                                   14.3M b-ME
1 ml
10 ml
5 ml
43 g
3 ml
75 μl
80 ml
20 ml
140 μl
100 μl

Pufr C, 100 ml:
10mM Tris-Cl pH 7.7     1M Tris-Cl
100mM (NH4)2SO4           2M (NH4)2SO4
10mM MgCl2                    Mr = 203.31 - hexahydrát
5mM b-ME                       14.3M b-ME
1 ml
5 ml
0.2 g
35 μl

chci 0,25M HCl, 10ml
1l…..1,18kg
35%
Mr=36,46
mám    1M………36,46g…....…1 l
chci      0,25M…..9,115g…...….1l
0,09115g.....0,01l
V=m / ρ
=0,09115 / 1 180
= 0,000 077 2 l
=0,077 2 ml
.......100%
=0,220 ml
.......35%
(g / mol)

Vypracované protokoly posílejte e – mailem
na       fojtova@sci.muni.cz
nebo   schpetra@centrum.cz