TURBIDIMETRIE A NEFELOMETRIE



Rozptyl – koloidní roztoky, suspense (Tyndallův efekt)


-         lom a odraz na částicích

-         λ se nemění, ale ovlivňuje intensitu rozptylu

-         světlo se polarizuje


Prošlé světlo se zeslabí jak absorpcí (nemusí být žádná), tak rozptylem (Σ E[o] = Σ E[p] + Σ E[r] +
Σ E[a])


I[r] = f (ν^4)          Rayleigh


modré se rozptyluje víc – bílé světlo mění barvu



Turbidimetrie – měření prošlého světla


            turbidance        T = log (I[0]/I) = k . c . l . d^3 / (d^4 + α. λ^4)


k – povaha částic, způsob měření, d – průměr částic, α – závisí na metodě


Obdoba L-B zákona (parametry konstantní), odchylka k ose c není-li monochromatické světlo.


Měření spektrofotometry – vysoká citlivost, obtížná reprodukovatelnost.


Nefelometrie – měření rozptýleného světla – jednoduché vs. složité provedení (určování velikosti a
tvaru částic)







Měření - buď nefelometrický nástavec k fotometru, světlo se sleduje pod úhlem 90°,

nebo speciální přístroje - nefelometry – automatická měření.



Konvenční nefelometry používají jako světelných zdrojů žárovku s halogenovou atmosférou nebo
xenonovou výbojku. Optika těchto přístrojů obsahuje navíc interferenční filtr, protože světelný
zdroj poskytuje polychromatické světlo. Detektor je nastaven pod úhlem 70 až 90°, protože stupeň
směrovosti světla z konvenčního zdroje je nízký. Nefelometry mohou měřit také rychlost změny
rozptylu světla - kinetiku, která je přímo úměrná rychlosti vzniku imunokomplexu
antigen-protilátka.


Laserový nefelometr používá jako světelného zdroje helium-neonového laseru. Tento zdroj
monochromatického světla je mimořádně intenzivní a má vysoký stupeň směrovosti. Laserový paprsek
prochází přes kyvetu s měřeným roztokem a rozptýlené světlo se sleduje detektorem nastaveným pod
úhlem 5 až 35° (fotonkou nebo fotonásobičem).