BiomembrányBiomembrány Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie – 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie – 23.2.2015 prof. RNDr. Renata Veselská, Ph.D., M.Sc. Ústav experimentální biologie Přírodovědecká fakulta MU prof. RNDr. Renata Veselská, Ph.D., M.Sc. Ústav experimentální biologie Přírodovědecká fakulta MU Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 22 • struktura a vlastnosti biomembrán praktické aplikace - imunofenotypizace buněk • fúze membrán a vezikulární transport praktické aplikace - medicínské aspekty praktické aplikace - liposomy a micely • buněčná fúze praktické aplikace - hybridomová technologie • transport látek přes membrány praktické aplikace - dialýza • struktura a vlastnosti biomembrán praktické aplikace - imunofenotypizace buněk • fúze membrán a vezikulární transport praktické aplikace - medicínské aspekty praktické aplikace - liposomy a micely • buněčná fúze praktické aplikace - hybridomová technologie • transport látek přes membrány praktické aplikace - dialýza Program přednášky:Program přednášky: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 33 STRUKTURA A VLASTNOSTI BIOMEMBRÁN STRUKTURA A VLASTNOSTI BIOMEMBRÁN Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 44 Lipidová dvojvrstvaLipidová dvojvrstva Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 55 Fluidita membrányFluidita membrány Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 66 Složení plazmatické membrány:Složení plazmatické membrány: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 77 Stavba plazmatické membrány:Stavba plazmatické membrány: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 88 Funkce transmembránových proteinů:Funkce transmembránových proteinů: • přenašeče (Na+/K+ pumpa...) • spojovací proteiny (intergriny...) • receptory (EGFR, receptory pro FGF, PDGF, TNF...) • enzymy (adenylátcykláza...) • přenašeče (Na+/K+ pumpa...) • spojovací proteiny (intergriny...) • receptory (EGFR, receptory pro FGF, PDGF, TNF...) • enzymy (adenylátcykláza...) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 99 Lokalizace transmembránových proteinů:Lokalizace transmembránových proteinů: střevní epitelstřevní epitel Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 1010 CD markery (antigeny) • glykoproteiny na povrchu lidských buněk • v současnosti cca 250 • imunofenotypizace (zejména v hematologii) • nespecifické: CD47, CD118 • specifické: CD66b - granulocyty CD85, CD205 - dendritické buňky CD133 - kmenové, resp. progenitorové buňky CD141 - vaskulární endotelové buňky CD168 - buňky karcinomu prsu CD207 - Langerhansovy buňky Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 1111 Příklady detekce CD markerů: linie HL-60Příklady detekce CD markerů: linie HL-60 granulocyty: CD66b DAPI granulocyty: CD66b DAPI makrofágy: CD14 DAPI makrofágy: CD14 DAPI Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 1212 Příklady detekce CD markerů: linie derivované z osteosarkomů Příklady detekce CD markerů: linie derivované z osteosarkomů Saos-2: CD133 / DAPISaos-2: CD133 / DAPI OSA-03: CD133OSA-03: CD133 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 1313 CD133 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 1414 Imunofenotypizace myeloidních buněk Imunofenotypizace myeloidních buněk Imunofenotypizace lymfoidních buněk Imunofenotypizace lymfoidních buněk Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 1515 Imunofenotypizace buněk pomocí průtokové cytometrie Imunofenotypizace buněk pomocí průtokové cytometrie Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 1616 FÚZE MEMBRÁN A VEZIKULÁRNÍ TRANSPORT FÚZE MEMBRÁN A VEZIKULÁRNÍ TRANSPORT Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 1717 Průběh fúzePrůběh fúze Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 1818 Intracelulární transport proteinů: • jadernými póry • přes membrány • prostřednictvím vezikulů Intracelulární transport proteinů: • jadernými póry • přes membrány • prostřednictvím vezikulů Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 1919 Schéma vezikulárního transportu:Schéma vezikulárního transportu: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 2020 Gaucherova nemoc • příčinou mutace v genu kódujícím glukocerebrosidázu (= enzym nutný pro rozklad glykolipidů v lysozomech) • AR typ dědičnosti • zvětšení velikosti a počtu lysozomů s nedegradovaným materiálem • základem terapie podávání chybějícího enzymu (např. preparát Cerezyme) • kandidát pro genovou terapii (začlenění cDNA kódující daný enzym do kostní dřeně) Gaucherova nemoc • příčinou mutace v genu kódujícím glukocerebrosidázu (= enzym nutný pro rozklad glykolipidů v lysozomech) • AR typ dědičnosti • zvětšení velikosti a počtu lysozomů s nedegradovaným materiálem • základem terapie podávání chybějícího enzymu (např. preparát Cerezyme) • kandidát pro genovou terapii (začlenění cDNA kódující daný enzym do kostní dřeně) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 2121 Typ I: • není zasažen nervový systém • zvětšení sleziny, jater, poruchy struktury kostí • neohrožuje život člověka Typ II: • nervový systém je zasažen, poruchy jsou zřejmé od raného dětství, pacienti umírají velmi brzy Typ III: • nervový systém je zasažen (demence), poruchy se začnou projevovat přibližně od 10. roku věku Typ I: • není zasažen nervový systém • zvětšení sleziny, jater, poruchy struktury kostí • neohrožuje život člověka Typ II: • nervový systém je zasažen, poruchy jsou zřejmé od raného dětství, pacienti umírají velmi brzy Typ III: • nervový systém je zasažen (demence), poruchy se začnou projevovat přibližně od 10. roku věku Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 2222 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 2323 Gaucher cells • makrofágy • vyskytují se izolovaně v postižené tkáni • pozitivní po obarvení činidlem PAS (Periodic Acid Schiff) Pseudo-Gaucher cells • výskyt u onemocnění spojených s vysokým turnoverem membrán (chronická granulomatózní leukémie, mnohočetný myelom, Hodgkinova choroba, AIDS…) • ve tkáni se vyskytují ve shlucích Gaucher cells • makrofágy • vyskytují se izolovaně v postižené tkáni • pozitivní po obarvení činidlem PAS (Periodic Acid Schiff) Pseudo-Gaucher cells • výskyt u onemocnění spojených s vysokým turnoverem membrán (chronická granulomatózní leukémie, mnohočetný myelom, Hodgkinova choroba, AIDS…) • ve tkáni se vyskytují ve shlucích Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 2424 Gaucher cellsGaucher cells Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 2525 Příklad endocytózy: LDL (low-density lipoprotein)Příklad endocytózy: LDL (low-density lipoprotein) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 2626 Poruchy příjmu cholesterolu • příčinou porucha struktury LDL-receptoru • buňky nepřijímají cholesterol • cholesterol se hromadí v krvi a napomáhá vzniku aterosklerózy • většina pacientů umírá v raném věku na srdeční záchvat (důsledek ucpání tepen zásobujících srdce) Poruchy příjmu cholesterolu • příčinou porucha struktury LDL-receptoru • buňky nepřijímají cholesterol • cholesterol se hromadí v krvi a napomáhá vzniku aterosklerózy • většina pacientů umírá v raném věku na srdeční záchvat (důsledek ucpání tepen zásobujících srdce) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 2727 Tvorba liposomů:Tvorba liposomů: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 2828 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 2929 Liposome-delivery systems:Liposome-delivery systems: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 3030 Využití liposomů a micel pro cílenou aplikaci léčiv a dalších látek do organismu • transport přes BBB (blood-brain barrier) / tight junctions Yang H: Nanoparticle-Mediated Brain-Specific Drug Delivery, Imaging, and Diagnosis. Pharmaceutical Research, 2010. Yang H: Nanoparticle-Mediated Brain-Specific Drug Delivery, Imaging, and Diagnosis. Pharmaceutical Research, 2010. Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 3131Yang H: Nanoparticle-Mediated Brain-Specific Drug Delivery, Imaging, and Diagnosis. Pharmaceutical Research, 2010. Yang H: Nanoparticle-Mediated Brain-Specific Drug Delivery, Imaging, and Diagnosis. Pharmaceutical Research, 2010. liposomy micely liposomy micely Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 3232 Možnosti zacílení liposomů do nádorové tkáně (maligní melanom) Možnosti zacílení liposomů do nádorové tkáně (maligní melanom) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 3333 Target-specific multimodal liposome (for combined angiogenesis imaging and therapy) Target-specific multimodal liposome (for combined angiogenesis imaging and therapy) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 3434 FÚZE MEMBRÁNFÚZE MEMBRÁN Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 3535 50 nm Přirozená fúze: • fertilizace • vznik syncitia Indukovaná fúze: • fúzogeny: elektrické pole chemikálie (polyethylenglykol) virusy (Sendai virus) Přirozená fúze: • fertilizace • vznik syncitia Indukovaná fúze: • fúzogeny: elektrické pole chemikálie (polyethylenglykol) virusy (Sendai virus) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 3636 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 3737 Princip mezidruhové fúzePrincip mezidruhové fúze Heterokaryon = hybridní buňka se 2 jádry Synkaryon = hybridní buňka se zfúzovaným jádrem Heterokaryon = hybridní buňka se 2 jádry Synkaryon = hybridní buňka se zfúzovaným jádrem Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 3838 Frye a Eddidin, 1970Frye a Eddidin, 1970 Využití fúze buněk k průkazu fluidity membrán:Využití fúze buněk k průkazu fluidity membrán: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 3939 Využití fúze buněk k průkazu fluidity membrán:Využití fúze buněk k průkazu fluidity membrán: t = 0 min myší antigeny lidské antigeny t = 0 min myší antigeny lidské antigeny t = 40 min lidské antigeny t = 40 min lidské antigeny t = 40 min myší antigeny t = 40 min myší antigeny Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 4040 Hybridomová technologie = využití indukované buněčné fúze pro výrobu monoklonálních protilátek Hybridomová technologie = využití indukované buněčné fúze pro výrobu monoklonálních protilátek Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 4141 Přirozená role protilátek v obraně proti infekcím nebo toxinům Přirozená role protilátek v obraně proti infekcím nebo toxinům Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 4242 Struktura a specifita protilátekStruktura a specifita protilátek Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 4343 Polyklonální protilátky: • produkovány velkým počtem klonů plazmocytů (aktivovaných B-lymfocytů) • směs stovek až tisíců odlišných molekul imunoglobulinů • vazba na různé epitopy téhož antigenu Monoklonální protilátky: • produkovány jedním klonem plazmocytů (aktivovaných B-lymfocytů) • jediný typ imunoglobulinu • vazba na jediný epitop příslušného antigenu Polyklonální protilátky: • produkovány velkým počtem klonů plazmocytů (aktivovaných B-lymfocytů) • směs stovek až tisíců odlišných molekul imunoglobulinů • vazba na různé epitopy téhož antigenu Monoklonální protilátky: • produkovány jedním klonem plazmocytů (aktivovaných B-lymfocytů) • jediný typ imunoglobulinu • vazba na jediný epitop příslušného antigenu Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 4444 Příprava polyklonálních protilátekPříprava polyklonálních protilátek • imunizace pokusného zvířete • izolace směsi protilátek z krve imunizovaného zvířete • imunizace pokusného zvířete • izolace směsi protilátek z krve imunizovaného zvířete Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 4545 Princip hybridomové technologie (příprava monoklonálních protilátek) Princip hybridomové technologie (příprava monoklonálních protilátek) myelomová buňka myelomová buňka aktivovaný B-lymfocyt aktivovaný B-lymfocyt HYBRIDOMHYBRIDOM Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 4646 Výsledek hybridomové technologie: monoklonální protilátky jsou produkovány buňkami téhož buněčného klonu, vážou se na stejnou antigenní determinantu a mají identické složení molekuly Výsledek hybridomové technologie: monoklonální protilátky jsou produkovány buňkami téhož buněčného klonu, vážou se na stejnou antigenní determinantu a mají identické složení molekuly Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 4747 Využití monoklonálních protilátek v buněčné biologii a v medicíně Využití monoklonálních protilátek v buněčné biologii a v medicíně • morfologické a funkční studie v základním výzkumu (exprese proteinu, lokalizace, transport...) • imunofenotypizace buněk a tkání (CD antigeny, intracelulární markery...) - patologie, hematologie, onkologie • nová léčiva (biologická léčba) Metodické přístupy: • imunodetekce pro mikroskopii (imunocytochemie, imunofluorescence, imunogold-labelling) • Western-blotting a následná imunodetekce • imunoafinitní sloupcová chromatografie • imunoprecipitace • morfologické a funkční studie v základním výzkumu (exprese proteinu, lokalizace, transport...) • imunofenotypizace buněk a tkání (CD antigeny, intracelulární markery...) - patologie, hematologie, onkologie • nová léčiva (biologická léčba) Metodické přístupy: • imunodetekce pro mikroskopii (imunocytochemie, imunofluorescence, imunogold-labelling) • Western-blotting a následná imunodetekce • imunoafinitní sloupcová chromatografie • imunoprecipitace Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 4848 Avastin (bevacizumab) • MoAb proti VEGF (vascular endothelial growth factor) • protinádorová léčba: inhibice angiogeneze • kolorektální karcinom, karcinom plic, karcinom ledviny, glioblastom Avastin (bevacizumab) • MoAb proti VEGF (vascular endothelial growth factor) • protinádorová léčba: inhibice angiogeneze • kolorektální karcinom, karcinom plic, karcinom ledviny, glioblastom Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 4949 Herceptin (trastuzumab) • MoAb proti HER2 (= receptor pro EGF) • protinádorová léčba: zablokování signální dráhy EGF • HER2+ karcinom prsu, HER2+ metastatický karcinom žaludku Herceptin (trastuzumab) • MoAb proti HER2 (= receptor pro EGF) • protinádorová léčba: zablokování signální dráhy EGF • HER2+ karcinom prsu, HER2+ metastatický karcinom žaludku Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 5050 TRANSPORT LÁTEK PŘES MEMBRÁNY TRANSPORT LÁTEK PŘES MEMBRÁNY Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 5151 Mechanismy membránového přenosu • difúze • osmóza • iontové kanály • přenašečový transport • transportní váčky, resp. endocytóza / exocytóza Mechanismy membránového přenosu • difúze • osmóza • iontové kanály • přenašečový transport • transportní váčky, resp. endocytóza / exocytóza Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 5252 OSMOTICKÉ JEVYOSMOTICKÉ JEVY Difúze • permeabilní membrána (prochází rozpuštěná látka i rozpouštědlo) Osmóza • semipermeabilní membrána (prochází pouze rozpouštědlo) Difúze • permeabilní membrána (prochází rozpuštěná látka i rozpouštědlo) Osmóza • semipermeabilní membrána (prochází pouze rozpouštědlo) Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 5353 Hypotonické prostředí • prostředí s nižším osmotickým tlakem • voda proniká do buněk • plazmoptýza (erytrocyty: hemolýza) Hypertonické prostředí • prostředí s vyšším osmotickým tlakem • voda uniká z buněk do prostředí • plazmolýza (rostlinné buňky) • plazmorýza (živočišné buňky) Izotonické prostředí • prostředí o stejném osmotickém tlaku Hypotonické prostředí • prostředí s nižším osmotickým tlakem • voda proniká do buněk • plazmoptýza (erytrocyty: hemolýza) Hypertonické prostředí • prostředí s vyšším osmotickým tlakem • voda uniká z buněk do prostředí • plazmolýza (rostlinné buňky) • plazmorýza (živočišné buňky) Izotonické prostředí • prostředí o stejném osmotickém tlaku Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 5454 Porovnání osmotických jevů u živočišné a rostlinné buňky: Porovnání osmotických jevů u živočišné a rostlinné buňky: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 5555 Reakce živočišné buňky na změny osmotického tlaku: Reakce živočišné buňky na změny osmotického tlaku: Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 5656 PRAKTICKÉ APLIKACE: DIALÝZA U PACIENTŮ S NEFUNKČNÍMI LEDVINAMI PRAKTICKÉ APLIKACE: DIALÝZA U PACIENTŮ S NEFUNKČNÍMI LEDVINAMI Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 5757 Dialýza = parciální difúze (přes membránu prochází voda a nízkomolekulární látky) Dialýza = parciální difúze (přes membránu prochází voda a nízkomolekulární látky) hemodialýza (umělá ledvina) hemodialýza (umělá ledvina) peritoneální dialýza peritoneální dialýza Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 5858 Princip hemodialýzyPrincip hemodialýzy Dialyzační roztok: voda, NaCl, KCl, CaCl2, MgCl2, acetát sodný Dialyzační roztok: voda, NaCl, KCl, CaCl2, MgCl2, acetát sodný Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 5959 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 6060 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 6161 Peritoneální dialýzaPeritoneální dialýza Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 6262 Princip peritoneální dialýzyPrincip peritoneální dialýzy Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 6363 Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015Bi8120 Aplikovaná buněčná biologie / 02 / 23.2.2015 6464