Design terénních studií You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) data výsledek Proč terénní studie plánovat? • chceme získat spolehlivé a použitelné výsledky • zobecnitelnost - statistická průkaznost • kombinace selského rozumu, biologického vhledu a pečlivosti, žádná složitá matematika • není pravda, že: – nezáleží na tom, jak data sbírám, statistika si se vším poradí – pokud nasbírám hodně dat, určitě zjistím mnoho zajímavého včetně jemných rozdílů • máme jen omezené zdroje (čas a peníze) - kolik dat nasbírat, kde a kdy? (omezit zabíjení) You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Variabilita a matoucí faktor • Variabilita mezi jedinci - základní úkaz v přírodě – některá variabilita nás přímo zajímá - chceme z ní vytěžit informaci – náhodná variabilita, šum - nedá se vysvětlit nebo nesouvisí s naší otázkou, snažíme se ji odstranit designem • Matoucí (zavádějící, třetí) faktor - neznámý nebo nesledovaný faktor, který ovlivňuje studovaný systém a ztěžuje interpretaci výsledků. Designem se snažíme minimalizovat jejich počet. velikost těla množství potravy kompetice přítomnost predátorů dědičnostvěk You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Cíle studie • na začátku každé studie musí stát jasně formulovaná otázka • popisné otázky: Co, kde, kdy, kolik? Které druhy obývají dané území? • deduktivní otázky: Jaké vztahy a proč? Jaké jsou ekologické nároky druhu? Jak se mění společenstva v závislosti na prostředí? • aplikovatelné otázky: Jak poznatek využít? Jak druh chránit? Jak udržet či zlepšit ekologický stav lokality? • zásady – čím víc do problému vidíme, tím smysluplnější můžeme mít otázky (a odpovědi) – pro své otázky hledáme nejjednodušší možné vysvětlení (tzv. Occamova břitva) a snažíme se omezit počet neznámých na nutné minimum – raději dostat jasnou odpověď na jedinou otázku než mnoho dohadů na více otázek – špatně položené otázky - ty, na které je odpověď známá, předem jasná nebo prakticky nemožná (Roste velikost snůšky ptáků s rostoucím věkem nebo zkušeností? Je více žouželí na stromě nebo v trávě?) You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Vytváření hypotéz • pozorování  teorie  ověření teorie (pozorováním nebo experimentem) • hypotéza = jasné tvrzení (domněnka), které se snaží vysvětlit pozorovaný jev (Plankton v lesních tůních je tvořen většími jedinci než v lučních tůních. Proč?) • pro jeden jev je možno vytvořit více hypotéz (Rozložené listí dodává více živin - v lesní tůni jsou jedinci vyžraní. Rozklad listí způsobuje úhyn ryb - v luční tůni jsou velcí jedinci sežráni.) • hypotézu se snažíme potvrdit nebo vyvrátit (hypoteticko-deduktivní způsob myšlení) • testovatelný předpoklad - pravděpodobnost platnosti teorie se zvyšuje, pokud se naše předpoklady potvrdí (Plankton v lučních tůních, kde ryby prokazatelně nejsou, bude mít stejné velikostní složení jako v lesních tůních. Plankton v lučních tůních, kde sice jsou ryby, ale i makrovegetace, bude mít podobné velikostní složení jako v lesních tůních.) • pojmy: nulová hypotéza a alternativní hypotéza (Je rozdíl mezi lučními tůněmi bez ryb a s rybami?) • vyplatí se počítat dopředu se všemi možnými výsledky • snažit se uspokojit pana šťourala You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Typy (terénních) studií • pozorovací (korelační) – bez aktivního vměšování – výhodou je jednodušší provedení, nevýhoda: korelace neznamená příčinný vztah!!! Nelze odhalit třetí faktor a poznat příčinu od následku (Vztah mezi prodanou zmrzlinou a počtem utopených během roku) • manipulativní - studujeme vliv zásahu, nutnost mít s čím porovnat!!! – pokusný zásah a kontrola (tj. místo bez zásahu) (Jaký má vliv management bělokarpatských luk (kosení, pasení, ponechání bez zásahu) na společenstva ploštic a křísů?) – přirozené - zničení lokality živlem, pozorování sukcese, nutnost znát počáteční stav! – výhoda: odpadá vliv třetího faktoru, lépe odhalíme příčinnou souvislost „korelace“ - přímá či nepřímá úměra You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Typy dat a zjišťovaných parametrů • předmět výzkumu - 1 druh (populace), taxonomická skupina až celé společenstvo • Závislá proměnná – vlastnosti lokalit: druhová bohatost, početnost (= abundance) jedinců na lokalitě, hustota (= denzita), biomasa… – vlastnosti jedinců: hmotnost, rozměry, stáří, pohlaví… – vlastnosti populací (druhů): početnost, počet vajíček u samic, denní aktivita, potravní preference, ekologické nároky… • Nezávislá proměnná – vlastnosti prostředí: teplota vzduchu a vody, množství určitých látek ve vodě či půdě (pH, rozp. O2, org. látky), charakter vegetace, dostupnost lokality a potravních zdrojů, stupeň znečištění či narušení… – vlastnosti lokalit, jedinců, populací a druhů • Kvalitativní - přítomnost/nepřítomnost (druhu, jevu) • Kvantitativní – spojitá, nespojitá (počet) • Kategoriální – stupnice, procentické odhady (pokryvnost, zastínění) You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Př. Jak se mění druhová bohatost společenstev na prameništích podél minerálnětrofického gradientu? Jaké faktory prostředí sledovat? Faktory jsou často vzájemně korelované. • vícerozměrná analýza - vyžaduje údaj ke každému vzorku • dbát na přesnost měření (kalibrace), nedopustit aby se čas měření stal matoucím faktorem (měření teploty vody lokalit v různém pořadí) You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Výběr jedinců z populace • vhodná vzorkovací (pozorovací, měřicí) metoda • ideálem je provést náhodný výběr = každý jedinec má stejnou šanci dostat se do výběru (vzorku) • reprezentativní vzorek – kvalitativně i kvantitativně zachycuje skutečný stav na lokalitě • ve skutečnosti však často vzorkujeme selektivně (lapací pasti odchytí spíše jedince s vyšší aktivitou než abundancí, velikostní selekce – při sběru často podhodnotíme abundance malých (juvenilních) jedinců) • prostorové uspořádání jedinců odráží jejich prostorové nároky a heterogenitu prostředí a) pravidelné – vzácné, teritoriální zvířata b) náhodné – ve skutečnosti vzácné c) agregované – běžné, např. plankton v rybníce, hmyz na louce • odběry bodové a směsné (podvzorky) • zvolit vhodnou velikost vzorku (náklady vs. zisk) a) c)b) You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Př. Tekoucí vody - velmi heterogenní biotop • jednotlivé druhy (popř. vývojová stádia) vykazují různé stanovištní preference • typ proudění: peřej, tůň; typ substrátu: kameny, štěrk, „debris dams“, bahno, příbřežní vegetace • zajímá-li nás celková diverzita (např. její srovnání mezi lokalitami), musíme odebrat vzorek reprezentativní pro celou lokalitu - vzorkování proporcionálně dle heterogenity prostředí • srovnání složení společenstev mezi stanovišti na jedné lokalitě – v každé skupině odebrat stejný (podobný) počet vzorků - platí obecně pro statistické porovnávání skupin!!! – pozor, abychom si nekladli otázku, na kterou je odpověď již notoricky známá (např. v peřeji žijí rheofilní druhy), pozor na důkaz kruhem You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Pilotní studie • předběžná studie, v malém rozsahu • pokud o zájmovém území nic nevím nebo slouží k vyzkoušení a doladění metod, lepšímu časovému rozvržení práce a přehodnocení hypotéz • vyplatí se vždy provést!!! • při plánování maximálně využít literárních zdrojů a zkušeností jiných lidí, ale vše si prověřit a sám vyzkoušet You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) • zvolená prostorová (časová) škála zcela zásadně ovlivňuje výsledek studie - co platí v jednom měřítku nemusí platit v jiném! • velké měřítko (geografický region), střední měřítko (jednotlivé lokality až habitaty - nejjednodušší, nejčastější), malé měřítko (mikrohabitat jednotlivé kameny v řece, zrna substrátu v sedimentu, části rostliny) • i jinak známá otázka získá na zajímavosti, studuje-li se v jiném měřítku než obvykle • pokrytí celého gradientu nebo jeho části (prameniště: minerálně-trofický gradient, gradient rychlostí proudu v toku) Měřítko studie rozsah výskytu druhu početnost podmínky prostředí 0výskyt 0výskyt optimumlineární nárůst lineární pokles – nepřítomnost druhu na lokalitách nemusí být známkou podobnosti lokalit anébrž naopak!!! • vzorkování v oblasti optima druhu behaviorální studie, studie na reprodukční strategie, vývojové cykly druhů • časové měřítko You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Opakování (replikace) • Kolik vzorků odebrat, kolik měření provést? • nestačí popsat jednotlivé případy, chceme zákonitosti zobecnit • je potřeba provést nezávislé opakování = odebrání nezávislých vzorků – nesmí být součástí časové řady na stejném místě – ve vhodném měřítku – dostatečná vzdálenost vzorků od sebe (autokorelace), při měření v čase dostatečné intervaly mezi záznamy (např. stanovištní preference) • pseudoreplikace = opakovaná měření jednoho objektu – velmi častá chyba studií, je třeba mít znalosti biologie – behaviorální studie: zvířata sdílející klec (prostředí) se nechovají nezávisle; příbuzní jedinci jsou si podobnější • „opakování“ v sezóně – vzorky opakovaně odebrané na stejné lokalitě během sezóny nejsou nezávislé!!! – jen pokud nás přímo zajímá sezónní vliv – často je naopak výhodné vliv sezóny ve studiích omezit • někdy nelze nezávislé opakování provést (objekt je neopakovatelný nebo opakování příliš nákladné), potom ale odpovídáme na popisnou otázku, ne na obecnou You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Př. Plankton lesních vs. lučních tůní • Plankton v lučních tůních, kde prokazatelně nejsou ryby, bude mít stejné velikostní složení jako v lesních tůních. • Plankton v lučních tůních, kde sice jsou ryby, ale i makrovegetace, bude mít podobné velikostní složení jako v lesních tůních. • je třeba porovnávat jen sezóny mezi sebou nebo průměry ze všech sezón • pokud skutečně T1=T2=T4>T3, hypotéza stejně není spolehlivě potvrzena, jen popsán jeden případ, kdy tak nastalo • co s tím? – přidat opakování - 3-5 tůní od každého typu (ale pozor zda nezvyšuji variabilitu!)  36-60 vzorků – přidat opakování, nechat jen sezónu s nejvyšší diverzitou (podzim) – přidat opakování, ubrat typ (např. T4) a uskromnit hypotézu les louka T1 T2 T3 T4 • směsné vzorky odebrané litorální trubicí • sezónní změny - jaro, léto, podzim: 3x4=12 vzorků, které ale nejsou nezávislé, nemám žádné opakování!!! You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Náhodný výběr • výběr lokalit či vzorkovacích míst zásadně ovlivňuje výsledek studie (výběr stromů v lese, umístění lapacích pastí) • zcela náhodný výběr (randomizace) – cílem je vyhnout se pseudoreplikacím a omezit vliv matoucích faktorů – nahodilý výběr není náhodný!!! – objekty (plochy) označit čísly a vylosovat (tahání z klobouku, program) – výběr lokalit z mapy pomocí náhodně vygenerovaných souřadnic, čtverců nebo uzlů sítě - nevýhoda: pravděpodobně nezachytím vzácné biotopy (xerotermní vápencové výchozy - vysoká diverzita hmyzu) • stratifikovaný náhodný výběr - náhodný v rámci typu biotopu, složitější vyhodnocení • nenáhodný preferenční výběr - např. na základě předchozí studie, často výhodný (prameniště podél minerálnětrofického gradientu; botanický průzkum pro studium hmyzu) You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Design experimentů • laboratorní i terénní • hledání rozdílů mezi pokusnými skupinami jedinců či lokalit (treatments) (př. efekt působení látky o různých koncentracích, reakce zvířat na různé podněty, kolonizace nově vzniklých prostředí...) • výběr jedinců do pokusu i pokusných skupin musí být náhodný • pokusy vyžadující kontrolu (závisí na hypotéze) – negativní kontrola - pokusná skupina bez zásahu (plocha ponechaná ladem) – dbát na spolehlivost kontroly!!! (vliv umělého zvětšení snůšky na péči o mláďata - zahrnout vliv disturbance při instalaci) – historická kontrola u dlouhodobých studií • celkově náhodné uspořádání - nejjednodušší • uspořádání v pokusných blocích - odstraňují třetí faktor, který má výrazný vliv (vliv potravní nabídky na růst jedinců - věk) – podle vlastností jedinců (věkové skupiny, pohlaví) – v prostoru (poloha pokusné plochy či nádoby) – v čase (vliv denní doby na chování zvířat) – snaha o vyrovnaný design - v každém bloku stejný počet jedinců – kdy je lépe více bloků a méně opakování? pokud opakování v průběhu pokusu neztrácím (úmrtí či únik jedinců, zničení či krádež nádoby) You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Př. Mikrodistribuce meiofauny na prameništi • 4 mezohabitaty • Rám 1x1 m se sítí 10x10 cm • Umístění rámu na střed mezohabitatu • Losování souřadnic x,y • 9 vzorků z každého mezohabitatu • 3 přebírači → bloky: pro každého se náhodně vybere třetina vzorků z každého čtverce You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com)