C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png fond_150dpi_bleu
Mikrobiologie ve farmacii
Seminář mikrobiologie a molekulární biotechnologie
Brno, 28.4.2016
M. Bursík

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        2
Úvod
●Úvod – představení mikrobiologie Zentiva
●Požadavky na mikrobiální kvalitu – proč, jak a co kontrolovat
●Zkouška na sterilitu (izolátorová technologie)
●Mikrobiologické zkoušení nesterilních výrobků
●Monitoring čistých prostor
●Další mikrobiologické metody
●Možnosti uplatnění absolventa v Zentivě

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        3
Úvod – Historie Zentivy / Sanofi Generics
●Výrobní závod Praha - Dolní Měcholupy: 85 let výroby léků
●

Adobe Systems
HISTORICAL
ROOTS
SANOFI GENERICS
CORPORATE PRESENTATION
C:\Users\00066491\Desktop\All\PREZI\Umbrella-03.png
Harmonization of the Western European Gx business
Acquisition of Zentiva - a leading Gx company in CEE
Acquisition
of Helvepharm
in Switzerland
Acquisition
of Medley - a leading Gx company
in Brazil
Acquisition
of Kendrick
in Mexico
Joint Venture with Nichi-Iko - a leading Gx player in Japan
Acquisition
of Genfar - a leading Gx company in Colombia
Joint Venture
with Dubai investments in the Middle-East
Creation of Sanofi Generics
Hosting strong, well-established
and recognized  brands for Gx
JV
    1995      2008           2009            2010             2011             2012   2013
   2014 2015
JV
JV
C:\Users\E0214255\Desktop\Genfar_EN.png C:\Users\E0214255\Desktop\globalpharma_EN-wh.png
C:\Users\E0214255\Desktop\nichi-iko_wh.png
C:\Users\E0214255\Desktop\Home\3_Corporate_Identity\1_Sanofi_Generics\Loga\Images\Medley_EN.png
C:\Users\E0214255\Desktop\Home\3_Corporate_Identity\8_Helvepharm\Logo\Helvepharm_EN-wh.png
C:\Users\E0214255\Desktop\Home\3_Corporate_Identity\3_Zentiva\Logo\EN\zentiva-sanofi-eng-wh.png
C:\Users\E0214255\Desktop\Kendrick_logo.png

Adobe Systems
OUR PORTFOLIO
Our Brands
Sanofi Generics operates worldwide using already
strong generics brands like Zentiva, Medley, Genfar, Winthrop and Globalpharma.
SANOFI GENERICS
CORPORATE PRESENTATION
Our Brands
Sanofi Generics operates worldwide using already
strong generics brands like Zentiva, Medley, Genfar, Winthrop and Globalpharma.

Adobe Systems
KEY FIGURES
SANOFI GENERICS
CORPORATE PRESENTATION

Adobe Systems
INDUSTRIAL AFFAIRS BU GX MANUFACTURING ORGANIZATION
SANOFI GENERICS
A WORLDWIDE FOOTPRINT OF COMPETITIVE GX DEDICATED SITES COVERING ALL MARKETS NEEDS
CORPORATE PRESENTATION

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        8
Úvod – představení mikrobiologie Zentiva
●Laboratoře mikrobiologické kontroly Zentiva Praha
●10 zaměstnanců
●součástí kontrolních laboratoří kontroly kvality QC
●
●
●
●Výrobní portfolio, analyzované v mikrobiologické laboratoři
●pevné lékové formy (tablety, potahované tablety, dražé, kapsle)
●polotuhé LF (masti, krémy, čípky), včetně sterilních mastí
●parenterália (injekce, infuzní roztoky)
●tekuté LF nesterilní (kapky, sirupy, suspenze)
●tekuté LF sterilní (oční kapky)
●výroba hormonálních přípravků
●HLP (hodnocené léčivé přípravky – klinické šarže)
●vývoj API (farmaceutické substance)
●
budova 410

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        9
Požadavky na mikrobiální kvalitu – proč, jak a co kontrolovat
●Proč sledovat mikrobiální kvalitu?
●
●
●
●
●
●
●
●
●Podle čeho jí posuzovat?
●lékopisy (Ph Eur, USP, JP, BP, GF...) – v ČR forma zákonné úpravy
●další dokumenty SVP/SLP (metodické pokyny SÚKLu,
●ISO normy, směrnice EU..)
j0315447 PhEur
možná rizika
 - infekce u pacienta
 - znehodnocení léčiva
obrana:  - používání konzervačních látek
 - výroba v kontrolovaném prostředí (čisté prostory)
přítomnost mikrobů v přípravku
poškození zákazníka

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        10
Požadavky na mikrobiální kvalitu – proč, jak a co kontrolovat
tabs develop

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        11
Zkouška na sterilitu (izolátorová technologie)
●Ph. Eur.: sterilita
“Přípravky, u nichž je v platném článku na lékovou formu předepsána sterilita, nebo jiné přípravky,
jež jsou označeny jako sterilní“
●předepsáno např. pro parenterália (injekce, infuze), oční přípravky, přípravky na popáleniny,
chirurgický materiál apod.
●
●Některé látky:”Pokud je určena k výrobě parenterálních přípravků bez dalšího vhodného
sterilizačního postupu…“
●sterilizovaná VNI, radioaktivně značená VNI
●
●Živné půdy pro testy sterility
1m

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        12
Zkouška na sterilitu (izolátorová technologie)
●Test sterility = kvalitativní stanovení mikroorganismů, “….zjistitelných v podmínkách zkoušky.”
●většina běžných aerobních i anaerobních bakterií, kvasinek a plísní
●Metody
●membránová filtrace (často filtrační přístroje)
●přímé očkování do živných půd
●kultivace na dvou různých půdách (thioglykolanová a soja-kasein) při dvou různých teplotách (30-35
a 20-25°C) nejméně 14 dní
●lze využít i alternativní metody (např. produkce CO2 – systém Bact-alert)
steritest bactalert_food_system steritest integral

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        13
Zkouška na sterilitu (izolátorová technologie)
●Sterilní přípravky – kvalita prostředí je klíčová
●Dosažení aseptických podmínek použitím laminárního boxu nebo izolátoru
●izolátorová technologie – ochrana procesu před vnějším prostředím
●izolátor pracuje v přetlaku a využívá transferových systémů
●pracovní prostor sterilizovatelný, bez přístupu personálu
●Hlavní cíl: eliminace člověka jako nejvýznamnějšího zdroje znečištění
ruční plnění ampulí 1930
Ruční plnění ampulí 1930
izolátor léčiva
Izolátorová plnící linka 2016

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        14
Zkouška na sterilitu (izolátorová technologie)
●Izolátor - omezená nutnost převlékání - čas, náklady, pohodlí při práci
vstup do ČP izolátor septodont

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        15
Zkouška na sterilitu (izolátorová technologie)
●Odběr a navažování sterilních substancí v izolátoru
kosmonaut C:\Users\00066444\Documents\MartinB\Presentations\PřF MU Brno
28.4.2016\materials\izolátor výroba Zentiva\izolátor M+Č.JPG

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        16
Zkouška na sterilitu (izolátorová technologie)
●Izolátor pro test sterility v Zentivě Praha
izolátor1

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        17
Zkouška na sterilitu (izolátorová technologie)
●Izolátor pro test sterility v Zentivě Praha
izolátor envair izolátor jirka 1 izolátor jirka

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        18
Zkouška na sterilitu (izolátorová technologie)
●Izolátor pro test sterility v Zentivě Praha
izolátor envair izolátor jirka 1 izolátor jirka

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        19
Mikrobiologické zkoušení nesterilních výrobků
Způsob podání
TAMC (CFU/g
nebo CFU/ml)
TYMC (CFU/g
nebo CFU/ml)
Specifické mikroorganismy
perorální - nevodné přípravky
103
102
nepřítomnost Escherichia coli (v 1 g nebo 1 ml)
perorální - vodné přípravky
102
101
nepřítomnost Escherichia coli (v 1 g nebo 1 ml)
rektální
103
102
-
orální, na dásně, kožní, nosní, ušní
102
101
nepřítomnost Staph. aureus (v 1 g nebo 1 ml)
nepřítomnost Pseud. aeruginosa (v 1 g nebo 1 ml)
vaginální
102
101
nepřítomnost Pseud. aeruginosa (v 1 g nebo 1 ml)
nepřítomnost Staph. aureus (v 1 g nebo 1 ml)
nepřítomnost Candida albicans(v 1 g nebo 1 ml)
transdermální náplasti
(limity pro jednu náplast včetně lepivé a zadní vrstvy)
102
101
nepřítomnost Staphylococcus aureus (v 1 náplasti)
nepřítomnost Pseudomonas aeruginosa (v 1 náplasti)
inhalační podání (zvláštní požadavky se vztahují na tekuté přípravky k rozprašování)
102
101
nepřítomnost Staph. aureus (v 1 g nebo 1 ml)
nepřítomnost Pseud. aeruginosa (v 1 g nebo 1 ml)
nepřítomnost žluč tolerujících gramnegativních bakterií (v 1 g nebo 1 ml)
TAMC – Total Aerobic Microbial Count
TYMC – Total Yeasts/Moulds Count

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        20
Mikrobiologické zkoušení nesterilních výrobků
perorální lékové formy obsahující suroviny přírodního (živočišného, rostlinného nebo nerostného)
původu, které nelze protimikrobně ošetřit a pro něž oprávněná autorita připouští TAMC suroviny
přesahující 103 CFU v gramu nebo mililitru
104
102
nejvýše 102 CFU žluč tolerujících gramnegativních bakterií (v 1 g nebo 1 ml)
nepřítomnost Salmonella sp. (v 10 g nebo 10 ml)
nepřítomnost Escherichia coli (v 1 g nebo 1 ml)
nepřítomnost Staph. aureus (v 1 g nebo 1 ml)
rostlinné léčivé přípravky pro perorální použití:
– určené pro přípravu nálevů a odvarů za použití vroucí vody

– jiný způsob přípravy (např. extrakce), který redukuje hladinu mikroorganismů
(*dle typu extrakce)
107
105/104*
105
104/102*
ne více než 102 CFU Escherichia coli (v 1 g nebo 1 ml)
nepřítomnost Salmonella sp. (v 25 g)
ne více než 104/103* CFU žluč tolerujících gramnegativních bakterií (v 1 g nebo 1 ml)
nepřítomnost Escherichia coli (v 1 g nebo 1 ml)
nepřítomnost Salmonella sp. (v 25 g)
Způsob podání
TAMC (CFU/g
nebo CFU/ml)
TYMC (CFU/g
nebo CFU/ml)
Specifické mikroorganismy
TAMC – Total Aerobic Microbial Count
TYMC – Total Yeasts/Moulds Count

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        21
Mikrobiologické zkoušení nesterilních výrobků
●Kvantitativní stanovení aerobních mikroorganismů (bakterie, kvasinky, plísně)
●membránová filtrace (např. vody, náplasti)
●
●počítání na pevných půdách - zalévání do agaru
●počítání na pevných půdách - očkování na povrch agarové půdy
●metoda nejpravděpodobnějšího počtu
schleicher schuell.jpg total counts.jpg MPN.jpg

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        22
Mikrobiologické zkoušení nesterilních výrobků
●Zkoušky na specifické mikroorganismy
●kvantitativní i kvalitativní stanovení patogenních mikroorganismů
●zkoušky založeny na využití selektivních půd
●možné použití alternativních metod (ATP-bioluminiscence, cytometrie v pevné fázi, průtokové
cytometrie atd.)
Advance latex agglutination.jpg

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        23
Mikrobiologické zkoušení nesterilních výrobků
●Prostředí: “Stanovení se provádí za podmínek, vylučujících nahodilé znečištění zkoušeného
výrobku.”

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        24
Monitoring čistých prostor
●Třídy čistoty
●
●
●
●
●
●Třída čistoty je definována počtem částic a mikroorganismů v 1 m3

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        25
Monitoring čistých prostor
●Každý výrobce musí mít definovaný monitorovací program
●popis (plánky, místa, frekvence)
●metodika
●zodpovědnosti
●způsob vyhodnocování, trendování dat
●nastavení limitů pro hodnocení
●nápravná opatření

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        26
Monitoring čistých prostor

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        27
Monitoring čistých prostor
●Aktivní kontrola
●ovzduší
airideal1 airideal2 RCS MD8filtry

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        28
Monitoring čistých prostor
●Pasivní kontrola ovzduší – spadové plotny
●
spady

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        29
Další mikrobiologické metody
●Simulační testy (Media Fills)
●ověření aseptického výrobního postupu
●místo přípravku se rozplňuje živné medium s cílem zjistit možný zdroj kontaminace ve výrobě
●plánovaná simulace všech možných zásahů do výrobního procesu
●kultivace jako při zkoušce sterility
●
C:\Users\00066444\Documents\MartinB\Presentations\PřF MU Brno 28.4.2016\materials\izolátor výroba
Zentiva\PICT0034.JPG

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        30
Další mikrobiologické metody
●Identifikace mikroorganismů
●hodnocení růstu a morfologie kolonií
●Gramovo barvení
●biochemická identifikace (Enterotest, API)
●latexové aglutinace
●automatické systémy
●
gram porovnání.jpg API2.jpg j0305257

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        31
Další mikrobiologické metody
●Mikrobiologické testování účinnosti antibiotik
●princip: sledování inhibice růstu vybraných citlivých mikroorganismů (srovnání vzorek vs.
standard)
●metody: difuzní, turbidimetrická
●trend: nahrazováno chemickým stanovením
●
Výsledek obrázku pro antibiotic growth inhibition petri dish

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        32
Další mikrobiologické metody
●Účinnost protimikrobní konzervace
●princip: zkoušený přípravek zaočkován testovacím kmenem, kontrola případné změny počtu
mikroorganismů
●provádí se u vícedávkových balení
●součást vývoje léčivého přípravku
●

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Mikrobiologie ve farmacii
|        33
Další mikrobiologické metody
●Příprava a zkoušení živných půd
●ověření růstových a selektivních vlastností
●zkouška sterility, předinkubace
●
DSC00309_Změnit velikost DSC00308_Změnit velikost

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Možnosti uplatnění absolventa v Zentivě
Oddělení vývoje
Inženýr pro farmaceutické procesy
Specialista přípravkové technologie
Analytik kontroly kvality
Technolog
Výroba a logistika
Léková regulace a jištění jakosti
Marketing a obchod
Vývojový analytik
Vývojový chemik
Chemický inženýr
Formulační specialista
Projektový manažer
Produktový manažer
Medicínský reprezentant
Specialista registrací - junior
Specialista DMF (Drug Master File)
Specialista farmakovigilance
Specialista jištění jakosti
Inspektor jištění jakosti
118 _57E1880 085

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
●PhD Program
●pro studenty posledního ročníku magisterského studia / čerstvé absolventy, pro studenty
doktorandského studia
●spolupráce po celou dobu doktorského studia + nabídka pracovní pozice po úspěšném absolvování
●VIE
●International Job Rotation Program – absolventi Mgr. studia (18-28 let)
●Trainee
●pro čerstvé absolventy
●1 rok trainee program + nabídka pracovní pozice po úspěšném absolvování
●Jak se přihlásit:
●Kontaktovat personální oddělení a zaslat životopis
●
_57E1477
Možnosti uplatnění absolventa v Zentivě

Baví vás vědecky pracovat?
Pokud se chcete realizovat v oborech organická syntéza, analytická chemie, farmaceutická
technologie, organická technologie, chemie pevné fáze, přijďte se poradit o vaší budoucí kariéře

C:\Users\00066491\Desktop\Generics_logo_RGB.png
Děkuji vám za pozornost!