14.                        P R Ů T O K O V Á  CH R O N O P O T E N C I O M E T R I E


Stanovení kyseliny askorbové C[6]H[8]O[6]

V coulometrii a chronopotenciometrii se měří elektrický náboj potřebný k úplné přeměně stanovované
látky na jinou formu v rozdílném oxidačním stupni.

Při stanovení kyseliny askorbové se měří náboj potřebný na úplný průběh kvantitativní oxidace
kyseliny askorbové na dehydroaskorbovou kyselinu uvnitř porézní uhlíkové elektrody E53C pomocí
konstantního proudu.


                             C[6]H[8]O[6]  - 2e^- ® C[6]H[6]O[6]+ 2H^+


14.1.        Příprava zásobního roztoku kyseliny askorbové


c (C[6]H[8]O[6]) = 100 mg/l
M(C[6]H[8]O[6]) = 147,13 g/mol

tj. m(C[6]H[8]C[6]) = 50 mg → převést do V[0] = 500 ml, doplnit dest. H[2]O


14.2.        Příprava kalibračních roztoků kyseliny askorbové


Ze zásobního roztoku C[6]H[8]C[6 ]o c = 100 mg/l připravit do 50 ml odm.baněk následující
koncentrace kyseliny askorbové, doplnit po rysku elektrolytem R-020T (NaCl < 1%, C[2]H[4]C[2 ].
2H[2]O < 1%, Triton X100 < 1%, dest. H[2]O).


                                                č.

                                             c (mg/l)

                                            V[pip] (ml)

                                          Δτ/ΔE (counts)

                                                1.

                                                10

                                                 5


                                                2.

                                                20

                                                10


                                                3.

                                                30

                                                15


                                                4.

                                                40

                                                20


                                                5.

                                                50

                                                25


                                                6.

                                                60

                                                30



14.3.        Příprava neznámého vzorku


Tabletu zvážit → rozpustit v cca 25 ml dest. H[2]O a přefiltrovat do 100 ml odm.baňky + H[2]O

↓

pipetovat 5 ml do 50 ml odm.baňky + dest. H[2]O

↓

pipetovat 10 ml do 50 ml odm.baňky + elektrolyt R-020T (změřit 3x, příp. 6x)


Postup měření  C[6]H[8]C[6] pomocí EcaFlow 150GLP
 1. Spustit program EcaFlow Autosampler
 2. Nastavení → Parametry → Všeobecné → zvolit číslo metody – metoda č.36 Ascorbic Acid a vybrat
mód měření Bezkalibračně, mód měření pozadí  Před každým měřením
 3. Nastavení → Parametry → Měření → změnit hodnotu průtoku na 6 ml/min
 4. Nastavení → Parametry → Kalibrace → rozkliknout modré políčko a změnit jednotky na mg/l
 5. Nastavení → Parametry → Vzorky → Přidat → v zobrazené tabulce uvést číslo nádoby, název (kód)
vzorku, počet opakování (1x) a zatrhnout Analyzuj → OK
 6. Barevně označené hadičky ponořit do příslušných roztoků:

·       modrá hadička → roztok základního elektrolytu R-020T (dle aplikač. listu)

·       červená hadička → roztok blanku (elektrolyt R-020T)

·       žlutá  hadička → roztok C[6]H[8]C[6]
 7. Přítlačné rameno peristaltického čerpadla přitlačit (zacvaknout) k hadišce
 8. Pod držák filtru umístit kádinku → kliknout na možnost Naplnění
 9. Po naplnění systému elektrolytem odstranit kádinku a zapojit hadičky cely
10. Stisknout možnost Preparace (příprava elektrody k měření)
11. Spustit měření →  ! a Start
12. Naměřenou křivku porovnat se vzorovým záznamem v aplikačním listě. Pokus záznam vyhovuje
(kontrola porézní uhlíkové elektrody) lze přistoupit k analýze vzorku a měření kalibračních
závislostí

13. Nastavení → Parametry → Všeobecné → vybrat mód měření Kalibrační přímka, mód měření pozadí
Před každým měřením
14. Nastavení → Parametry → Kalibrace → vypsat políčka Kalibrační přímky Cstd1, Cstd2, Cstd3 (první
tři kalibrační roztoky)
15. Nastavení → Parametry → Vzorky → Přidat → v zobrazené tabulce uvést číslo nádoby, název (kód)
vzorku, počet opakování měření standardů (1x), počet opakování měření vzorku (3x) a zatrhnout
Analyzuj → OK, pravým tlačítkem zrušit měření srovnávacího vzorku (předchozí vzorek)
16. Spustit měření →  ! , označit měření standardů a stlačit Start
17. Po ukončení měření → Nastavení → Parametry → Vzorky → pravým tlačítkem zrušit měření prvních
tří kalibračních roztoků → OK → spustit měření →  ! , označit měření vzorků a stlačit Start
18. Uložit naměřená data → File → Export
19. Hodnoty uložené v PC převést do souboru v Excelu, sestrojit kalibrační závislost

      f(c) = Dt/DE .