C6200-Biochemické metody
12F2_RTG krystalografie
Petr Zbořil

Princip metody
•Difrakce RTG záření na mřížce
•Odraz a interference
•
•
•
•
•Δl = 2d.sinΘ - interference
•zesílení pro 2d.sinΘ = nλ

Využití
•Studium krystalů
–Anorganické monokrystaly – 1915
–Práškové metody
•Organická chemie – 1920
•Biochemie – 1950 …
–Makromolekuly
•bílkoviny (myoglobin)
•DNA (Franklinová)
•Absolutní metoda určení struktury
–Určení pozice atomů v molekule
•

Podmínky
• Krystalická struktura
–pravidelné mřížky elementárních jednotek
–l srovnatelné s rozměry jednotek (též elektronová a neutronová difrakce)
•Problém krystalisace biopolymerů - metody
•Čistota preparátů
–krystal může být směsný, ale nativní
•Rozptyl podle elektronové hustoty
–těžké atomy – vyšší intensita
–modifikace kovy (Hg aj.)
•
•
•

Schema
•
•
•
•
•
•
•
•Jednoduché schema

Interferenční obrazce
•Detektor – film aj.
•
•
•
•

Diagram elektronových hustot
•Hem
•
•Těžký atom Fe
•- vyšší el. hustota

DNA krystalografie
•
•
•
•
•
•
•
•Franklinová

•2D krystalografie
•Využití v biochemii
–lakasa
•
•
•
•

Záznam a výsledek
•Oscilační snímek a struktura lakasy
–Trimer, pozice Cu

•
•
•
•DĚkuji za pozornost
•4/19/2017
•Footer Text
•11