Základy faunistického výzkumu  lokalizace  výběr a vymezení lokality  sběr dat v terénu  sběr materiálu, jeho fixace a konzervace  zakládání databází Michal Horsák, UBZ PřF MU Lokalizace nálezů  materiál bez lokalizace je bezcenný! • že si to budete pamatovat? 1. jen na začátku (ztráta počátečních nálezů) 2. lokalizaci “si vezmete do hrobu“  i v začátcích je možné učinit zajímavé a cenné nálezy já nevím Optimální lokalizace  GPS souřadnice, faunistický čtverec síťového mapování  stát, katastrální území (nebližší obec/město)  přesná lokalizace slovně, typ stanoviště, nadmořská výška  datum sběru, nálezce (kdo za správnost lokalizace ručí)  digitální fotodokumentace lokalizace nálezů GPS souřadnice  několik systémů, dají se mezi sebou převádět, nejpoužívanější je systém WGS (48°51’52,2‘‘N, 18°34’33,3‘‘E)  zjištění souřadnic (koordinát) • pomocí GPS přístroje v terénu (různá přesnost, odchylky) • z elektronických map 1. mapy na Seznamu (http://www.mapy.cz/): fotomapa historická (1836-52) a recentní (2002-3), vyhledávání ulic; možnost měření plochy 2. katastrální mapy (http://nahlizenidokn.cuzk.cz) 3. Google Earth (http://earth.google.com/) 4. Geobáze (elektronické turistické mapy ČR 1:50.000, placený produkt): vyhledání sídel, vodstev, horstev, chráněných území, zanášení informací • všude možnost měřit vzdálenosti a další funkce lokalizace nálezů Síťové mapování  dva systémy: • 1) evropská síť: příčné Mercatorovo zobrazení, sférické čtverce 100 x 100 km, 50 x 50 km a 10 x 10 km (Evropské mapování rostlin, Evropský přehled bezobratlých) • 2) středoevropská síť: založená na zeměpisných souřadnicích, sférické lichoběžníky zvané mapové pole měřící 10 minut zeměpisné délky a 6 minut zeměpisné šířky (cca 11,2 x 12 km), naše faunistika i floristika /podrobně viz Pruner L. & Míka P. (1996): Seznam obcí a jejich částí v České republice s čísly mapových polí pro síťové mapování. Klapalekiana, 32 (Suppl.): 1–175./ − číslo mapového pole (kvadrátu): čtyřmístné číslo, možno dále dělit na čtvrtiny (a-d), viz další snímek lokalizace nálezů Síťové mapování  čtení čísla mapového pole (kvadrátu)  automatické hledání: http://www.biolib.cz/cz/toolKFME/ lokalizace nálezů Slovní lokalizace  přesná slovní lokalizace je velmi důležitá! • i když máme souřadnice – stačí jeden překlep a je to v… • pro popis lokalizace volte statické objekty – pamatujte, že některé skutečnosti se v terénu poměrně rychle mění (tůň 300 m jižně od skupiny stromů) • pomístní názvy volte ty, které se vyskytují v mapách, nikoliv ty, které zná pouze váš dědeček! Stanovení nadmořské výšky  v terénu pomocí GPS přístroje: velmi nepřesné pouze družicově, přesnější barometrické měření – vyžaduje kalibraci  z map (www.mapy.cz, turistická; http://nahlizenidokn.cuzk.cz): obvykle přesnější Výběr a vymezení lokality  co už je a co už není lokalita – je to relativní, záleží  co je účelem sběru dat (design studie, inventarizace)  reflektovat heterogenitu ekologických podmínek, důležitých pro sledovanou skupinu • specifické podmínky, vhodné pro výskyt určitého (třeba vzácného druhu) nejsou na celé lokalitě ale jen na omezené ploše (špatně nalezitelném místě) – detailnější lokalizace žádoucí Sběr dat v terénu  zápisník vs. diktafon (elektronická média)  terénní protokol (v případě složitějšího sběru dat) • na všechno si vždy nevzpomenete • vytištěný formulář nebo razítko na zakázku !! záloha dat !! • fotokopie • xerokopie • přepisování z diktafonu Sběr materiálu  každá skupina má svá specifika  metody sběru: 1. ruční / vizuální / kvalitativní: lov pomocí rukou/pinzety nebo nějakého speciálního lovného instrumentu (kuchyňský cedník, smýkací síť, sklepávadlo, prosívadlo atd.) 2. semikvantitativní: množství vzorku je standardizováno na jednotku úsilí (20 máchnutí smýkačkou) nebo čas (odběr po dobu 3 minut) 3. kvantitativní: množství vzorku je standardizováno na objem nebo vzorkovací plochu • pozn.: nelze porovnávat vzorky nestejně velké, početnost můžeme přibližně srovnat, ale druhovou bohatost nikoliv – nutno sjednotit matematickými metodami jako rarefaction (ředění) na velikost nejmenšího vzorku Sběr materiálu - pomůcky  pinzeta: měkká nebo tvrdá, nosit na šňůrce nebo gumě (omezení ztráty)  kovová síta (nerezový kuchyňský cedník)  smýkací síť (více typů)  sklepávací síť  prosívadlo  ruční síť na rámu  vrhací síť  exhaustor  prodejci pomůcek: • www.kabourek.cz • www.entosphinx.cz Sběr materiálu - pomůcky smýkací síť prosívadlo exhaustor sklepávadlo Sběr materiálu - pomůcky ruční síť na rámu = „bentoska” vrhací síť Sběr materiálu - vzorkovnice a popisky  v terénu jsou praktičtější plastové  smrtička na hmyz: těsnící lahvička naplněné pilinami nebo korkovou drtí (lepší skleněná – octan, viz dále, některé plasty leptá)  trvalé ukládání do epruvet • skleněných: průhledné, stabilnější, ale dražší • plastové: neprůhledné, materiál mění vlastnosti, levnější  požadavek na těsnost epruvet, závisí na těkavosti a toxicitě fixáže  dlouhodobější ukládání do těsných nádob (tzv. masovky)  popisky dovnitř nejlépe vždy (smazání popisků na povrchu), popisovat zásadně tužkou (kvůli rozpíjení)  vytištěné štítky, ale na laserové tiskárně! Fixace a konzervace materiálu  každá skupina má svá specifika, přesto jsou obecná pravidla  tři nejčastější fixační i konzervační činidla jsou: 1. etanol: organismy s vápnitými schránkami a povrchy, odbarvuje a odvodňuje tkáně, měkké organizmy macerují a hnijí, malá schopnost pronikat dovnitř tkání, nejčastěji se používá 70% roztok, (měkkýši, mnohonožky, imaga méně sklerotizovaného hmyzu, pavoukovci, ploštěnky) 2. formaldehyd: silně toxický!, fixace měkkých organizmů, dobrá schopnost konzervace větších organizmů, ztuhnutí tkání vede k jejich vetší pevnosti, nejčastěji se používá 4% roztok, odbarvuje méně než etanol (pijavky), častý postup je po fixaci převedení do ethanolu (běžně stejnonožci) 3. octan etylnatý (= etylacetát, etylester kyseliny octové): fixace a pouze dočasná konzervace sklerotizovaného hmyzu, pak se hmyz preparuje a ukládá nasucho Fixace materiálu pro genetické analýzy  fixace vzorků závisí na analýzách, které budou prováděny a na typu organizmy nebo tkáně; dva základní postupy: • zmražení (tekutým dusíkem nebo pevným CO2) • uložení do etanolu (čistý, nejlépe 96%)  méně vhodný je denaturovaný etanol (často benzínem, který znesnadňuje extrakci DNA) https://nm2018- cz.nm.netservis.cz/file/71c5444b95d55c9df9d9c9e6f07ad3ec/8427/Metodika%20spr%C3%A1vy%20a%20evide nce%20tk%C3%A1%C5%88ov%C3%A9%20zoologick%C3%A9%20sb%C3%ADrky%20a%20determinace.pdf Nová metodická příručka pro sběr, fixaci a ukládání materiálu nejen pro genetické analýzy  zcela nevhodný je formaldehyd (izolace DNA a PCR amplifikace takových vzorků je velmi náročná, protože časem dochází k postupné degradaci DNA Zakládání databáze nálezů  jednoduchá databáze v programu Excel • v řádcích druhy (případy) • ve sloupcích sledované proměnné (lokalizace) • do sloupců samostatně všechny typy informací, které mohou být chtěny filtrovány odděleně: druh, počet jedinců, zeměpisná délka, zeměpisná šířka, kvadrát, nejbližší sídlo, název lokality, slovní lokalizace, typ stanoviště, nadmořská výška, datum sběru, nálezce, další podle potřeby • POZOR: automatický filtr v Excelu 1997-2003 dokáže na jednom listu vyhledávat pouze do 1000 různých položek v jednom sloupci (většinou to je lokalita) (ukázka databáze: údaje jsou smyšlené)