C6200-Biochemické metody 08B_Atomová spektroskopie Petr Zbořil Možnosti absorbce •Atomy resp. ionty –Jednoduché částice, žádné vazebné elektrony •Počet energetických hladin je omezen –disperze nevýznamná •Dovolené přechody dány –Dm = 0, ±1, ±2 ..., Dl = ±1, Dml = 0, ±1 –kvantová čísla m hlavní, l orbitalové, ml magnetické –dle složitosti elektronového obalu Energetické hladiny a přechody •Výběrová pravidla omezují •počet hodnot ν, linie jsou ostré •čarové spektrum •ΔE = h ν, ν = R.c(1/n2 – 1/m2) •R = Rydbergova konstanta •(1,097 373 177 107 m-1) •m, n = hl. kvant. čísla • •n – konečná > m – výchozí •ΔE < 0 – emise • Způsoby měření • •Absorpce x emise (excitace jiným zdrojem – tepelně – plamen, oblouk) •Absorpce stejných ν jako může emitovat (Kirchhoff). •AAS x AES • • Absorbce a emise záření Schema AAS • • • • • • • Zdroje záření • •Monochromatické světlo, jednoúčelové • •Výbojka s dutou katodou • •Laser • • Atomizace plamenem Palivo Oxidovadlo Teplota/(°C) Propan Vzduch 1 900 Acetylen Vzduch 2 300 Acetylen Kyslík 3 100 Acetylen Oxid dusný 3 000 Vodík Kyslík 2 600 Roztok rozprášen v plameni Hořák Acetylen-N2O Atomizace – grafitová pícka Atomizace – ICP •Užití V klinické biochemii nejčastěji Na, K, Ca, Mg, dále Cu, Zn, popřípadě Fe (výjimečně další) •Korekce •Eliminace záření •plamene •