C6200-Biochemické metody
12c_osmometrie
Petr Zbořil

Princip metody
•pV = nRT
•P = c . R. T (Pa) c  = cm (g/L) / Mr
•P = cm . R. T / Mr  μ = RT.ln c
•P /cm = R. T/ Mr
•
•Stanovení Mr nebo c
•

Princip měření
•Kryoskopické a ebulioskopické „osmometry“
–Snížení bt, zvýšení bv
•Snížení tenze par
•Koligativní jevy + osmotický tlak
•Snížení chemického potenciálu rozpouštědla
•Zvýšení chemického potenciálu látky = P
–Krystalizace, vypařování
–Malé molekuly – c dostatečně vysoká
–Analytická metoda
–
•
•

Princip měření
•Membránové
–Nesplňují definici koligativních metod – separační
–Vhodné pro makromolekuly
•
•
•
•
•
•
•Chemický potenciál x hydrostatický tlak

Princip měření
•Membránové osmometry
•Výběr membrán
–Tenká, rychlý přestup
–Velikost pórů, uniformní
•Od 15 do 1000 kDa
–Asymetrie – tlak v nulových koncentracích
•Kvalita roztoku
–Nečistoty, polydisperzita
–Dostatečná c – extrapolace na 0
•Určení rovnováhy
–Otevřené osmometry – klasické, s aktivním vyrovnáním,
–Uzavřené (piezzoelektrická detekce)
•
•
•
•
•
•
•
•
•

Princip měření



Vliv tvaru částic
•P /cm = R. T/ Mr  = konst. (ideální roztok)
•P /cm= R. T/ Mr  (1+B.cm)
•
•
•
•
•
•
•Viriální koeficient B – tvar, hydratace aj.