C6200-Biochemické metody 14b_kalorimetrie Petr Zbořil Princip •Měření předávaného tepla –Fyzikální a chemické procesy – stav 1 a 2 –Celková – ∆E = Q + W, vnitřní E – ∆U = Q + W –Izobarický děj – ∆H = ∆U + p∆V –∆G0 = ∆H0 - T∆S0 •Kalorimetrická rovnice • Q = m . c . ∆T • • Způsoby a typy •Měření –∆T – stanovení ∆Q –Q a ∆T – stanovení c –Q při T = konst., isotermická kalorimetrie •teplo tání, vypařovací, směšovací •Oblast teplot –nízko- (≈ 20 K), středně- (273-373 K) a vysokoteplotní (slitiny) •Oblast tepla –makro- a mikro- (≈ 1-4 J) •Rychlost a doba měření –rychlé, středně rychlé (≈ 10 min.), pomalé (dny a více) • Jednoduchý kalorimetr •Chemické reakce • • • • • • •Q = ∆T ∑ mi . ci = ∆T . C (vodní hodnota kalorimetru) •Kalibrace Qs = I . U . t Qs/∆T = C • C:\Documents and Settings\Zboril\Dokumenty\Obrázky\kalorimetr-2-bomba.JPG Spalná tepla chem. individua, směsi, potraviny apod. sacharidy, lipidy, bílkoviny ve vzduchu, O2 Metabolická tepla fysiologické podmínky – dlouhodobé (organismus v kalorimetru) ITC mikrokalorimetry •Nádobky umístěné v termostatovaném bloku •Produkce (spotřeba tepla) – DT •Vedení tepla mezi nádobkou a blokem •Průtokové a směšovací (titrační) • Termoelektrické články •Seebeckův a Peltierův efekt • http://fyzika.jreichl.com/data/E_vznik_proudu_termojevy/image022.jpg C:\Documents and Settings\Zboril\Dokumenty\Obrázky\kalorimetr-difer-bok.JPG Mikrokalorimetry •U = kel . (Tk – Tp), dQ/dt = ktv . (Tk – Tp) •U = dQ/dt . kel/ktv ( = 1/K), dQ/dt = K. U Průtokový a směšovací způsob C:\Documents and Settings\Zboril\Dokumenty\Obrázky\kalorimetr-difer-krivky.JPG Průtočný systém • • • • • • • •Schema ITC Titrační způsob • • • • • • • •Schema ITC Titrační provedení •Postupné přídavky • – vyrovnání T Sledování metabolizmu • • • • • • •Fibroblasty (A) produkují teplo, přídavek SDS (B) – lýza, další teplo – pak konec Růst buněk • • • • • • • • •Dostupné substráty jsou využívány postupně, podle výhodnosti – E. coli DSC •Změna T – stejná v obou kyvetách •D C (D I) • • • •DĚkuji za pozornost 5/12/2016 Footer Text 17