•Cyclospora cayetanense •Cystoisospora belli •Microsporidia •Encephalitozoon cuniculi •Trachipleistophora hominis •Ciliata •Balantidium coli •Blastocystis hominis •Fungi •Pneumocystis jiroveci • • • • •Eimeria •Cryptosporidium •Isospora •Cyclospora •Cystoisospora •Toxoplasma •Neospora •Sarcocystis •Plasmodium •Babesia •Theileria Cyclospora cayetanense Cyclospora cayetanensis • • Oocysts of C. cayetanensis shown going from non-infective to infective and multiplying. Further description is below. · Cyclosporiasis je střevní onemocnění působené mikroskopickým cizopasníkem druhu Cyclospora cayetanensis. · Druh Cyclospora cayetanensis byl poprvé jako cizopasník člověka popsán v roce 1994 v Peru. · Lidé se nakazí Cyclosporou po pozření potravy nebo vody kontaminované výkaly. · Lidé často cestující do endemických oblastí jsou vystaveni mnohem většímu riziku onemocnění Cyclospora cayetanensis – epidemiologie ·Lidé se cizopasníkem nakazí polknutím vysporulovaných oocyst Cyclospory, které představují infekční stádium cizopasníka. • ·Infikovaný člověk vylučuje nevysporulované (nezralé, neinfekční) oocysty ve výkalech. Tyto oocysty ve vnějším prostředí sporulují a až po několika dnech až týdnech se stávají vysporulované a tedy infekční. • ·Z tohoto důvodu je přímý přenos • z člověka na člověka a přenos z čerstvě • kontaminované potravy nebo • vody nepravděpodobný. · ·Čtyři oocysty Cyclospory pocházející • z čerstvé stolice- barveno technikou • acid-fast stain from fresh stool stained. • Image: CDC (DPDx) • (Průměr oocyst 8 až 10 μm) • Four Cyclospora oocysts from fresh stool stained using a modified acid-fast stain. Cyclospora cayetanensis Nevysporulovaná oocysta Oocysta se dvěmi sporocystami Life cycle of Cyclospora cayetanensis Cyclospora cayetanensis Životní cyklus začíná pozřením oocysty. Oocysta obsahuje dvě sporocysty a každá pak dva sporozoity. Po vniknutí do člověka dochází v tenkém střevě k emergenci sporozoitů Sporozoiti prodělávají asexuální rozmnožování, čímž vzniká mnoho merozoitů, stejně pak jako prodělávají i rozmnožování sexuální, které vede ke vzniku makro a mikrogametocytů. Gamety spolu fúzují a vzniká zygota, ze které vzniká oocysta. Člověk vylučuje ve stolici nevysporulované oocysty. Za optimálních podmínek tyto oocysty dozrávají a stávají se infekční pro člověka. Cyclospora cayetanensis – životní cyklus •Oocysty vylučované ve stolici nejsou infekční. Přímý tzv oral-fecal přenos je tak nepravděpodobný a odlišuje tohoto cizopasníka od zástupců rodu Cryptosporidium. •Sporulace probíhá ve vnějším prostředí a při teplotě 22°C to 32°C trvá několik dnů až týdnů. •Vysporulovaná oocysta obsahuje dvě sporocysty a v každé z nich jsou vždy dva podlouhlí sporozoiti. •V zažívacím traktu dochází k excystaci a k uvolnění sporozoitů, kteří napadají epiteliální buňky hostitele. •Uvnitř těchto buněk dochází k asexuálnímu namnožení a později také sexuální fázi cyklu a vývoji namnožení oocyst, které jsou vylučovány se stolicí. •Čerstvá zelenina a voda může sloužit jako prostředek přenosu a vysporulované oocysty jsou polknuty s kontaminovanou potravou nebo vodou. •Potenciální mechanismy kontaminace potravy a vody jsou stále předmětem intenzivního výzkumu. Cyclospora cayetanensis – onemocnění • • Symptomy cyclosporiasy začínají v průměru 7 dní po infekci (od 2 dní do 2 týdnů) vysporulovanopu oocystou. • • Mezi tyto symptomy lze zahrnout: • •Vodnatý průjem (diarrhea) – nejčastější příznak •Ztráta chuti k jídlu •Ztráta váhy •Křeče •Nafouknutost •Plynnatost •Nevolnost •Únava • • Další méně časté příznaky: •Zvracení •Horečka • Cyclospora cayetanensis - diagnostika •Mikroskopický průkaz cizopasníka •1. Vlhká komůrka – procházející světlo – DIC nebo UV •2 Fast acid-stain •3. Barvení Safraninem nebo Trichromem Cyclospora cayetanensis - diagnostika Technika Fast acid stain Cyclospora cayetanensis - diagnostika Barvení safraninem Cyclospora cayetanensis – terapie •Nejčastěji se doporučují preparáty Trimethoprim/sulfamethoxazole (TMP/SMX), prodávané pod komerčními názvy Bactrim, Septra, a Cotrim •Žádná alternativní antibiotická léčba Cyclosporosy nebyla doposud k terapii navržena a doporučována. •Řada rutinně pracujících zdravotnických zařízení zatím rovněž nemá vypracované postupy na spolehlivou identifikaci tohoto cizopasníka. Cystoisospora belli • Cystoisospora belli • nevysporulovaná oocysta vysporulovaná oocysta • •Cystoisosporiasis dříve označovaná jako isosporiasis je střevní •parazitární onemocnění postihující člověka. Běžně se vyskytuje v •tropických a subtropických oblastech a v typickém případě se přenáší •pozřením kontaminované potravy a vody. Charakteristkým příznakem •je průjem, nemoc lze léčit a existují také účinná preventivní opatření. Left: Immature oocyst of Cystoisospora belli in an unstained wet mount showing a single sporoblast under ultraviolet (UV) fluorescent microscopy. Right: Immature oocyst of Cystoisospora belli in an unstained wet mount showing two sporoblasts under ultraviolet (UV) fluorescent microscopy. Cystoisospora belli •Patogenní agens: •Parazitická coccidie Cystoisospora belli, napadá epiteliální buňky tenkého střeva a je jednou ze tří coccidií napadajících zažívací trakt člověka. •Ve kterých částech světa se vyskytuje ? •Cystoisospora je celosvětově rozšířena. Běžně se vyskytuje v tropických a subtropických oblastech. Cystoisospora belli •Může být Cystoisospora přenášena z osoby na osobu přímo ? •Cystoisospora je obvykle šířena nepřímo, prostřednictvím kontaminované potravy a vody. To proto, že parazit potřebuje určitý čas, aby ve vnějším prostředí dozrál. Oral-anal kontakt s infikovaným člověkem však riziko přenosu zvyšuje. • •Jaké jsou symptomy infekce vyvolané Cystoisosporou ? •Nejtypičtější projev onemocnění je řídký průjem. Dalšími symptomy jsou bolesti břicha, křeče, ztráta chuti, nevolnost, zvracení a horečka. •Pokud není onemocnění léčeno, tak u lidí s AIDS a s oslabeným imunitním systémem vede ke zdlouhavému a těžkému onemocnění. Cystoisospora belli •Rezervoárový organismus – dobytek, •prasata • •Způsob šíření: potrava (maso), voda • •Geografické rozšíření: celosvětově ? • •Inkubační perioda: 3 – 39 dní • •Diagnostika: oocysty ve stolici • • Cystoisospora belli •Co je to cystoisosporiasis? • •Cystoisosporiasis je onemocnění střeva způsobené mikroskopickým cizopasníkem druhu Cystoisospora belli. Tento cizopasník byl dříve označován jako Isospora belli. •Parazit se přenáší ingescí potravy nebo vody, které jsou kontaminovány výkaly infikovaného člověka. Cystoisospora belli •Jak se člověk může Cystoisosporou nakazit ? •Lidé se nakazí po polknutí zralé oocysty cizopasníka například z kontaminované potravy nebo vody. •Napadení lidé vylučují s výkaly nezralé oocysty cizopasníka, které potřebují obvykle 1 až 2 dny sporulace ve vnějším prostředí. •Za určitých okolností může parazit dozrát i za dobu kratší než jeden den. Life Cycle of C. belli Cystoisospora belli 1)Nevysporulované oocysty jsou vylučovány s výkaly. 2)Člověk se nakazí ingescí kontaminované potravy nebo vody obsahující vysporulované oocysty obsahující sporozoity. 3) Zralé sporocysty ve střevě praskají a uvolňují vždy 8 sporozoitů, které napadají epiteliální buňky. 4) V epitelu se sporozoiti transformují v trofozoity, kteří se asexuálně množí (schizogonie) a vznikají merozoiti. Merozoiti napadají další buňky epitelu a množí se v nich. 5) Část trofozoitů prodělává sexuální cyklus, Gamogonií vznikají makro a mikro gametocyty, jejicxh fůzí vzniká zygota a ta Vede ke vzniku nezralé oocysty, která je vylučována z těla ven. V půdě oocysty dozrává a stává se infekční. C. belli tak vyžaduje jen jednoho hostitele. Microsporidia • Microsporidia Microsporidia - spora Microsporidie v hostitelských buňkách Zralé spory microsporidií Microsporidia - charakteriastika •Pojem microsporidia je obvykle používán jako označení pro obligátní intracelulární cizopasníky •náležející do kmene Microsporidia. • •V současnosti je známo přes 1200 druhů náležejících do 143 rodů, které byly popsány jako •paraziti velkého spektra hostitelů a to jak obratlovců tak bezobratlých. • •Mikrosporidia jsou charakteristická produkcí odolných spor, které jsou v závislosti na hostiteli •co do velikosti velmi variabilní. Vyznačují se unikátními organelami, polárním vláknem nebo •polární trubičkou, která je spirálovitě stočená uvnitř spory. Velikost spor mikrosporidií •parazitujících u člověka se pohybuje od 1 do 4 µm a tato velikost je důležitým diagnostickým •znakem. • •Existuje nejméně 15 druhů mikroskoporidíí, které jsou popsány jako patogeni napadající •člověka: Ancaliia (formerly Brachiola) algerae, A. connori, A. vesicularum, Encephalitozoon •cuniculi, E. hellem, E. intestinalis, Enterocytozoon bieneusi Microsporidium ceylonensis, M. •africanum, Nosema ocularum, Pleistophora sp., Trachipleistophora hominis, T. •anthropophthera, Vittaforma corneae, a Tubulinosema acridophagus. • •Encephalitozoon intestinalis byl dříve nazýván Septata intestinalis, ale na základě podobnosti •morfologie, antigenní struktury a molekulárních dat, byl pak přeřazen do tohoto rodu . • •Díky současným údajům je známo, že některá domácí a divoká zvířata mohou být přirozeně •napadena některými druhy mikrosporidií: E. cuniculi, E. intestinalis, E. bieneusi. Ptáci, •především papušci a rajky, jsou přirozeně napadáni E. hellem. E. bieneusi. Druh V. corneae •byl identifikován v povrchových vodách a spory Nosema sp. byly zjištěny ve vodních příkopech, • •Tubulinosema acridophagus, je parazit hmyzu a současně době (2012) byly popsány dva •případy diseminované mikrosporidiosy vyvolané tímto cizopasníkem. Medicínský význam microsporidií Medicínský význam microsporidií Encephalitozoon cuniculi • Encephalitozoon cuniculi Microsporidia – životní cyklus Microsporidia – životní cyklus Microsporidia - vývoj •Infekční stádium mikrosporidií je rezistentní spora, která přežívá dlouho ve vnějším prostředí. • •Po pozření hostitelem, spora vystřelí polární vlákno (trubička) a infikuje hostitelskou buňku. Infekční sporoplasma se tak dostane do hostitelské buňky – eurakyota. • •Uvnitř hostitelské buňky se sporoplasma extenzivně dělí a to bud merogonií (binární dělení) a nebo sporogonií (mnohonásobné dělení). • •Tento vývoj může nastat bud přímo po přímém kontaktu s cytoplasmou hostitelské buňky (e.g., E. bieneusi) a nebo probíhá uvnitř parazitoforní vakuoly (e.g., E. intestinalis). • •Bud přímo v cytoplasmě nebo v parasitoforní vakuole se mikroskoporidie vyvíjejí sporogonií ve zralou sporu. Během sporogonie se kolem spory formuje tlustá stěna, která zajišťuje resistenci vůči podmínkách vnějšího prostředí. • •Když spory navýší svůj počet a kompletně vyplní cytoplasmu hostitelské buňky, bunečná stěna praskne a spora se uvolní do prostředí, které je obklopuje. • •Tyto volné spory mohou infikovat další hostitelské buňky a cyklus tak pokračuje. Microsporidia - vývoj •Infekční stádium mikrosporidií je rezistentní spora, která přežívá dlouho ve vnějším prostředí. • •Po pozření hostitelem, spora vystřelí polární vlákno (trubička) a infikuje hostitelskou buňku. Infekční sporoplasma se tak dostane do hostitelské buňky – eurakyota. • •Uvnitř hostitelské buňky se sporoplasma extenzivně dělí a to bud merogonií (binární dělení) a nebo sporogonií (mnohonásobné dělení). • •Tento vývoj může nastat bud přímo po přímém kontaktu s cytoplasmou hostitelské buňky (e.g., E. bieneusi) a nebo probíhá uvnitř parazitoforní vakuoly (e.g., E. intestinalis). • •Bud přímo v cytoplasmě nebo v parasitoforní vakuole se mikroskoporidie vyvíjejí sporogonií ve zralou sporu. Během sporogonie se kolem spory formuje tlustá stěna, která zajišťuje resistenci vůči podmínkách vnějšího prostředí. • •Když spory navýší svůj počet a kompletně vyplní cytoplasmu hostitelské buňky, bunečná stěna praskne a spora se uvolní do prostředí, které je obklopuje. • •Tyto volné spory mohou infikovat další hostitelské buňky a cyklus tak pokračuje. Microsporidia: Encephalitozoon •Infekce nastává po pozření nebo • vdechnutí spory. • •Ve dvanacterníku je obsah spory • polárním vláknem injikován do • hostitelské buňky. • •V ní se parazit opakovaně binárně • množí a vzniká velké množství spor. • •Spory se uvolňují z hostitelské buňky • a napadají další buňky. • • Life cycle of Microsporidia Životní cyklus: Encephalitozoon cuniculi 1)Imunodeficientní pacient (AIDS) je orálně nakažen kontaminovanou potravou (např. z moči zvířete) 2)Ve střevě člověka dojde injikování parazita do epiteliální buňky střeva. 3) V ní se tvoří parazitoforní vakuola, ve které se parazit binárním dělením opakovaně množí. 4)Poslední binární dělení ve ke vzniku dvou jednojaderných sporoblastů, které se dále diferencují v infekční spory. 5) Spory jsou vylučovány z těla stolicí. Klinické příznaky mikrosporidióz •Druh mikrosporidie Klinický příznak • •Anncaliia algerae Keratoconjunctivitis, skin and deep muscle infection •Enterocytozoon bieneusi Diarrhea, acalculous cholecystitis •Encephalitozoon cuniculi and E. hellem Keratoconjunctivitis, infection of respiratory and genitourinary tract, disseminated infection •Encephalitozoon intestinalis Infection of the GI tract causing diarrhea, and dissemination to ocular, genitourinary and respiratory tracts •Microsporidium ceylonensis and M. africanum Infection of the cornea •Nosema sp. (N. ocularum), Anncaliia connori Ocular infection •Pleistophora sp. Muscular infection •Trachipleistophora anthropophthera Disseminated infection •Trachipleistophora hominis Muscular infection, stromal keratitis, (probably disseminated infection) •Tubulinosema acridophagus Disseminated infection •Vittaforma corneae (syn. Nosema corneum) Ocular infection, urinary tract infection Laboratorní diagnostika •Mikroskopické vyšetření •Transmisní elektronová mikroskopie TEM •Imunofluorescence IFA •Molekulární metody – především PCR • • Mikroskopické vyšetření stolice spory Encephalitozoon cuniculi barveno Chromotropem • Encephalitozoon cuniculi stained with Gram Chromotrope Encephalitozoon cuniculi stained with Gram Chromotrope Microsporidia in stool stained with Chromotrope 2R Mikroskopické vyšetření stolice spory mikroskopridií, barveno Gram chromotropem • microsporidia stained with Giemsa microsporidia stained with Giemsa Mikroskopické vyšetření stolice barveno Giemsou • Encephalitozoon cuniculi stained with Ryan's modified trichrome Encephalitozoon cuniculi stained with Ryan's modified trichrome Elektronová mikroskopie TEM Enterocytozoon bieneusi - spora • Electron micrograph of an Enterocytozoon bieneusi spore Encephalitozoon intestinalis inside a septated parasitophorous vacuole • IFA of Encephalitozoon hellem Monoclonal antibody-based immunofluorescence identification of Encephalitozoon hellem. Spores are present in a bronchoalveolar lavage specimen of an AIDS patient Agarose gel (2%) showing the diagnostic bands for species-specific PCR diagnostic primers designed for microsporidia that infect humans • Agarose gel - PCR for microsporidia Trachipleistophora hominis • Trachipleistophora hominis Ciliophora - nálevníci Nálevnící - morfologie Nálevnící rozmnožování - konjugace Balantidium coli • Balantidium coli •Balantidium coli, je málo se vyskytujícím střevním cizopasníkem člověka. Přenáší se fecal-oral přenosem pozřením kontaminované potravy a vody. •Infekce Balantidium coli probíhá většinou bez příznaků, ale lidé silněji napadeni trpí průjmy a bolestmi břicha a může dojít až k perforaci tlustého střeva. •Šíření infekce lze omezit preventivní dobrou hygienou a umýváním ovoce a zeleniny na cestách. Left: Balantidium coli cyst. Right: B. coli trophozoite in a wet mount at 1000x magnification. Balantidium coli – vznik potravní vakuoly Endemický výskyt B. coli •Balantidium je vzácně se vyskytujícím parazitem člověka v mírném pásmu. Mnohem častěji se vyskytuje u prasat v teplejším klimatu a u opic v tropech. • •Napadení člověka nastává především tam, kde se lidé neřídí správnými hygienickými návyky. • •Balantidium coli je rozšířeno celosvětově, ale největší prevalence dosahuje v tropech a v subtropech a v rozvojových zemích. Intestinální balantidiosa a amebiosa: léze stěny tlustého střeva (a,b) léze působené E. histolytika (c) Fagocytoza červených krvinek (d) Balantidium coli – trofozoiti, roztěr stolice (3.15) cysty – roztěr stolice (3.16) Trofozoiti Cysty Balantidium coli – trofozoiti SEM Balantidium coli – peristomální cilíe a vakuoly Balantidium coli – životní cyklus Balantidium coli – trofozoiti a cysty Balantidium coli – životní cyklus Balantidium coli – životní cyklus •Balantidium coli se přenáší cystami. Hostitel se obvykle nakazí pozřením kontaminované potravy a vody. • •Po polknutí cysty dochází v tenkém střevě k její excystaci a trofozoiti pak kolonizují tlusté střevo. • •Trofozoiti zůstávají ve lumenu tlustého střeva člověka a zvířat a množí se zde binárním dělením s konjugací. • •Trofozoiti prodělávají encystaci a vznikají infekční cysty. Někteří trofozoiti invadují stěnu tlustého střeva a množí se. • •Zralé cysty opouštějí hostitele s výkaly. •1) Napadeni lidé vylučují cysty • ve stolici. 2)Člověk sed nakazí ingescí • kontaminované potravy nebo vody. 3)V tenkém střevě se s cyst uvolňují • trofozoiti. 4)Ti se binárním dělením množí. 5)Encystují se a odcházejí do • tlustého střeva a odtud ven se • stolicí. • •Balantidium coli vyžaduje pouze •jednoho hostitele. Lidé získávají •infekci nejčastěji od prasat, které je •rezervoárem této nemoci. •Balanditiosa je proto tzv. zoonosa. Life cycle of Balantidium coli Balantidium coli – přenos a šíření Balantidium coli – životní cyklus a patogenita Balantidium coli - patogenita Balantidium coli – dělící se trofozoit ve stěně střeva Blastocystis hominis • Blastocystis hominis •Blastocystis je běžně se vyskytující mikroskopický organismus s celosvětovým rozšířením. • •Plné poznání biologie Blastocystis a jejího vztahu k dalším organismům zůstává zatím nejasné a je předmětem intenzivního výzkumu. B. spp. cyst-like forms in wet mounts under differential interference contrast (DIC) microscopy. Blastocystis hominis Blastocystis hominis •Taxonomická klasifikace Blastocystis hominis je stále velmi kontroverzní. V minulosti byl tento organismus považován za kvasinky, houby, améby, bičíkovce a sporozoa. • •V současné době díky studiím na molekulární úrovni genů SSUrRNA byla B. hominis umístěna do neformální skupiny nazvané Stramenopila (Silberman et al. 1996). • •Tato skupina Stramenopila je definována na základě molekulární fylogeneze jako heterogenní evoluční seskupení jednobuněčných a mnohobuněčných protistů včetně hnědých řas, rozsivek, chrysophyta, vodní plísně atd. (Patterson, 1994). • •Cavalier-Smith (1998) považuje Stramenopila za identické s jeho infraříší Heterokonta součástí říše Chromista. Z tohoto důvodu je podle Cavalier-Smitha, B. hominis označována jako heterokontní chromista. Blastocystis hominis Blastocystis hominis •Průběh životního cyklu a šíření B. hominis je stále předmětem výzkumu. Z tohoto důvodu je zde uvedený cyklus spíše hypotetický. •Typickou formou nacházenou v lidské stolici jsou cysty, které dosahují velikosti od 6 do 40μm. •Tlusto-stěnné cysty, které jsou přítomny ve stolici jsou považovány za prostředek přenosu cizopasníka uskutečňovaného zřejmě v cestou fecal-oral pozřením kontaminované vody nebo potravy. •Cysty napadají epiteliální buňky zažívacího traktu a asexuálně se množí. Vznikají vakuolární formy parazita, ze kterých vznikají multivakuolární a amoeboidní formy. •Multivakuolární forma se vyvíjí v pre-cystu, která dává vznik tenko-stěnné cystě, která je zřejmě zdrojem autoinfekce. •Amoeboidní forma dává vznik pre-cystě, která se vyvíjí schizogonií v tlustostěnnou cystu. •Tlusto-stěnná cysta je vylučována s výkaly. Blastocystis hominis: vakuolizovaná forma binární dělení Blastocystis: mikrofoto (a) diagram dělení trofozoita (c) Proposed life cycle of blastocystis hominis Blastocystis hominis B. hominis se množí sporulací a nebo binármím dělením. Organismus prodělává několik morfologických forem B. hominis se vyznačuje sexuálním i asexuálním rozmnožováním. B. se může pomocí pseudopodií protahovat. Životní cyklus není ještě úplně popsán. Jak se člověk nakazí ? •Jak je přesně Blastocystis přenášena není dosud s •určitostí známo, ale počet infikovaných lidí stoupá •v oblastech s nízkou úrovní hygieny. • •Současné studie naznačují především tyto cesty přenosu: •Polknutí kontaminované potravy nebo vody •Pobyt v denních stacionářích poskytujících péči např. bezdomovcům •Kontakt se zvířaty • Jaké jsou způsoby prevence ? •Umývat si ruce mýdlem a horkou vodou po použití záchodu, výměně plen a před manipulací s potravinami. • •Učit děti důležitosti umývání rukou jako prevence vůči infekci. • •Vyhnout se konzumaci kontaminované potravy a vody. • •Umývat a loupat syrovou zeleninu a ovoce před jídlem. • •Při cestách do exotických zemí se vyhnout pití vody z rizikových zdrojů jako je nepřevařená vodovodní voda a vyhnout se konzumaci neuvařeného jídla umývaného v nepřevařené vodovodní vodě. • •Pít jen originál balené a pasterizované nápoje a nápoje připravované z převařené vody jako je káva a čaj, které jsou k pití bezpečné. • Pneumocystis jiroveci Pneumocystis jiroveci Celosvětově rozšířený parazit plic. Jméno na počest prof O. Jírovce. Poprvé jej popsal u člověka. Druh P. carini se vyskytuje spíše u zvířat. Vyskytuje se asi u 40% imunodeficientní pacientů. Dříve problém u nedonošených dětí. Podle molekulární analýzy RNA je příbuzný houbám. Podle přítomnosti organel mitochondrie, jádro, Golgiho aparát a podle způsobu dělení se jedná u blízce příbuzného amébám. Je to zřejmě představitel velice staré skupiny protozoí. Pneumocystis pneumonia Pneumocystis jiroveci – životní cyklus 1) Imunokompromitovaný člověk vdechne drobné cysty. Uvnitř každé je 8 haploidních trofozoitů které se líhnou z cysty. 2) Vždy 2 trofozoiti fúzují a vzniká zygota (diploidní) , která se dělí na dvě nová stádia. 3) Zygota se začíná encystovat a formuje se v ní 8 jader. 4) Ty se mění na 8 mladých trofozoitů. 5) Vzniká zralá s novou generací intracystických tělísek. Děkuji za pozornost Děkuji za pozornost