C6560 – Biochemie – laboratorní cvičení (4 kr)
Úloha 1. Úvodní cvičení
Pravidla bezpečnosti práce v biochemické laboratoři
Organizace laboratorního cvičení z biochemie
Obsluha základních laboratorních přístrojů
Zásady správného vyhodnocování dat, tvorba grafů
Praktická část – pipetování, používání dávkovačů, fotometrie
Úloha 2. Kvalitativní a kvantitativní stanovení sacharidů
(A) Barevné reakce sacharidů
(B) Rozdělovací chromatografie sacharidů
Úloha 3. Kvalitativní a kvantitativní stanovení aminokyselin
(A) Barevné reakce aminokyselin
(B) Rozdělovací chromatografie aminokyselin
(C) Stanovení koncentrace glycinu alkalimetrickou titrací
Úloha 4. Kvantitativní stanovení proteinů
(A) Spektrofotometrické stanovení proteinů v UV oblasti
(C) Stanovení koncentrace proteinů metodou dle Folina
(D) Stanovení koncentrace proteinů bicinchoninovou metodou
Úloha 5. Izolace, analýza a stanovení deoxyribonukleové kyseliny (DNA)
(A) Izolace deoxyribonukleové kyseliny
(B) Identifikace DNA specifickou barevnou reakcí
(C) Stanovení čistoty a koncentrace DNA měřením absorbance v UV oblasti
Úloha 6. Sacharasa – imobilizace, substrátová specifita, stanovení aktivity
(A) Příprava enzymového mini reaktoru (imobilizace sacharasy v alginátovém gelu)
(D) Stanovení koncentrace redukujících sacharidů Somogyiho metodou
Úloha 7. pH optimum enzymové reakce
(A) Stanovení aktivity alfa-amylasy (pouze kal. křivka pro stanovení maltosy)
(B) pH optimum alfa-amylasy
Úloha 8. Enzymová kinetika I
(A) Stanovení počáteční rychlosti enzymové reakce
Úloha 9. Enzymová kinetika II
(A) Závislost rychlosti enzymové reakce na koncentraci substrátu (Km a Vmax)
Úloha 10. Analytické využití enzymů
(A) Stanovení koncentrace močoviny pomocí ureasy
(B) Substrátová specifita alkoholdehydrogenasy
Úloha 11. Biologické řetězce přenosu elektronů
(A) Respirační řetězec aerobních organismů
(B) Fotosyntéza