jméno: obor: datum provedení: Materiál a vybavení: 10 mmol.l^-1 hexakyanoželezitan draselný – zásobní roztok zkumavky, kádinka, pipety, odměrná baňka 50 ml, vortex, fotometr, kyvety Experimentální výsledky si zapisujte do kontrolního listu (poslední strana). Kontrolní list předkládejte ke kontrole a podpisu vyučujícímu po provedení každé praktické části úlohy (A, B, C, D). Vyhodnocení dat pak provedete do následujícího cvičení. Jako protokol odevzdáte vyplněný návod. Protokol musí být vyplněn ve všech šedých částech a nesmí být zpracován obyčejnou tužkou. Neúplné protokoly budou bez kontroly vráceny k dopracování! PRAKTICKÁ ČÁST A. Příprava zředěného roztoku Postup: Do 50 ml odměrné baňky napipetujte 5 ml zásobního roztoku 10 mmol.l^-1 hexakyanoželezitanu draselného, doplňte destilovanou vodou po značku a dobře promíchejte. Zředěný roztok hexakyanoželezitanu draselného přelijte do kádinky a označte. Do zkumavky odpipetujte 1 ml zředěného roztoku a 1 ml destilované vody. Změřte absorbanci tohoto roztoku na spektrofotometru při vlnové délce 420 nm. Před měřením přístroj vynulujte změřením slepého vzorku (nulová koncentrace měřené látky). Jako slepý vzorek použijte destilovanou vodu. A[420] Výsledek předložte ke kontrole vedoucímu cvičení. Teprve potom používejte zředěný roztok hexakyanoželezitanu draselného k další práci. Vyhodnocení: Z Lambert-Beerova zákona A = e . c . l kde A je absorbance roztoku, e je molární absorpční koeficient [l.mol^-1.cm^-1], c je koncentrace látky ve zředěném roztoku [mol.l^-1] a l je délka optické dráhy v kyvetě, vypočítejte e pro hexakyanoželezitan draselný. Uveďte ředění roztoku (při fotometrii): krát Výpočet: U všech výsledků VŽDY uvádějte fyzikální rozměr veličiny! Pamatujte, že vypočtený výsledek nelze uvádět s vyšší přesností (s vyšším počet platných číslic) než jsou experimentálně získaná data. Zde měříte absorbanci na 3 platné číslice (např. 0,123), proto i vypočtený e musíte uvést na stejný počet platných číslic (např. 12,3 l.mol^-1.cm^-1). Týká se všech výsledků, nejen v tomto cvičení! PRAKTICKÁ ČÁST B. Pipetování skleněnými pipetami Postup: Do sady zkumavek pipetujte podle rozpisu v tabulce: zkumavka č. pipetovaný objem vypočtená c(K[3][Fe(CN)[6]]) [mmol.l^-1] A[420] Ø A[420] zředěný roztok K[3][Fe(CN)[6]] [ml] destilovaná voda [ml] 1 0,5 4,5 2 0,5 4,5 3 1,0 4,0 4 1,0 4,0 5 1,5 3,5 6 1,5 3,5 7 2,0 3,0 8 2,0 3,0 9 2,5 2,5 10 2,5 2,5 11 3,0 2,0 12 3,0 2,0 Vzorky promíchejte na vortexu a změřte jejich absorbanci při vlnové délce 420 nm. Jako slepý vzorek použijte opět destilovanou vodu. Vyhodnocení: Sestrojte kalibrační graf (závislost A[420] na koncentraci K[3][Fe(CN)[6]] ve zkumavce). Například v programu MS Excel použijte graf XY bodový; body proložte lineární spojnicí trendu. Vzhledem k tomu, že jste vynulováním na slepý vzorek přiřadili nulové koncentraci K[3][Fe(CN)[6]] nulovou absorbanci, musí kalibrační přímka procházet počátkem grafu [0;0]. (V programu MS Excel: Formát spojnice trendu/Možnosti/Hodnota Y=0). Z rovnice kalibrační přímky, kterou zobrazíte v grafu, pak odečtěte milimolární absorpční koeficient a přepočtěte jej na molární absorpční koeficient e (přepočet uveďte níže, uveďte fyzikální rozměr!): PRAKTICKÁ ČÁST C. Použití pipety s nastavitelným objemem 0,1 – 1,0 ml (100-1000 ml) Postup: Do sady zkumavek pipetujte 1 ml destilované vody a dále odměřujte pipetou podle rozpisu v tabulce: Návod k použití pipety: Používají se jednorázové špičky, pro rozsah 100-1000 ml zpravidla modré (někdy bílé). Na číselníku nastavte objem v ml. Pipeta má 2 polohy (vyzkoušejte stisknutím pístu). Při nabírání stiskneme píst do 1. polohy, ponoříme špičku do zásobního roztoku a píst opatrně pustíme. Tím máme ve špičce odměřený požadovaný objem roztoku. Pro vytlačení roztoku ze špičky vložíme špičku do zkumavky a stiskneme píst do 2. polohy. zkumavka č. pipetovaný objem vypočtená c(K[3][Fe(CN)[6]]) [mmol.l^-1] A[420] Ø A[420] zředěný roztok K[3][Fe(CN)[6]] [ml] destilovaná voda [ml] 1 0,2 0,8 2 0,2 0,8 3 0,4 0,6 4 0,4 0,6 5 0,6 0,4 6 0,6 0,4 7 0,8 0,2 8 0,8 0,2 9 1,0 0,0 10 1,0 0,0 Vzorky promíchejte na vortexu a změřte jejich absorbanci při vlnové délce 420 nm. Jako slepý vzorek použijte destilovanou vodu. Vyhodnocení: Sestrojte kalibrační graf (závislost A[420] na koncentraci K[3][Fe(CN)[6]] ve zkumavce). Například v programu MS Excel použijte graf XY bodový; body proložte lineární spojnicí trendu. Vzhledem k tomu, že jste vynulováním na slepý vzorek přiřadili nulové koncentraci K[3][Fe(CN)[6]] nulovou absorbanci, musí kalibrační přímka procházet počátkem grafu [0;0]. (V programu MS Excel: Formát spojnice trendu/Možnosti/Hodnota Y=0). Z rovnice kalibrační přímky, kterou zobrazíte v grafu, pak odečtěte milimolární absorpční koeficient a přepočtěte jej na molární absorpční koeficient e (přepočet uveďte níže, uveďte fyzikální rozměr!): PRAKTICKÁ ČÁST D. Použití pipety s nastavitelným objemem 0,01 – 0,1 ml (10-100 ml) Postup: Do sady zkumavek pipetujte 1,9 ml destilované vody a dále odměřujte pipetou podle rozpisu v tabulce: Návod k použití pipety: Používají se jednorázové špičky, pro rozsah 10-100 ml zpravidla bílé (někdy žluté). Na číselníku nastavte objem v ml. Pipeta má 2 polohy (vyzkoušejte stisknutím pístu). Při nabírání stiskneme píst do 1. polohy, ponoříme špičku do zásobního roztoku a píst opatrně pustíme. Tím máme ve špičce odměřený požadovaný objem roztoku. (Při dávkování malých objemů (pod 50 ml) otřeme špičku čtverečkem buničité vaty, abychom odstranili kapky roztoku mimo špičku a snížili tak chybu pipetování). Pro vytlačení roztoku ze špičky vložíme špičku do zkumavky a stiskneme píst do 2. polohy. zkumavka č. pipetovaný objem vypočtená c(K[3][Fe(CN)[6]]) [mmol.l^-1] A[420] Ø A[420] zásobní roztok K[3][Fe(CN)[6]] [ml] destilovaná voda [ml] 1 0,02 0,08 2 0,02 0,08 3 0,04 0,06 4 0,04 0,06 5 0,06 0,04 6 0,06 0,04 7 0,08 0,02 8 0,08 0,02 9 0,10 0,00 10 0,10 0,00 Vzorky promíchejte na vortexu a změřte jejich absorbanci při vlnové délce 420 nm. Jako slepý vzorek použijte destilovanou vodu. Vyhodnocení: Sestrojte kalibrační graf (závislost A[420] na koncentraci K[3][Fe(CN)[6]] ve zkumavce). Například v programu MS Excel použijte graf XY bodový; body proložte lineární spojnicí trendu. Vzhledem k tomu, že jste vynulováním na slepý vzorek přiřadili nulové koncentraci K[3][Fe(CN)[6]] nulovou absorbanci, musí kalibrační přímka procházet počátkem grafu [0;0]. (V programu MS Excel: Formát spojnice trendu/Možnosti/Hodnota Y=0). Z rovnice kalibrační přímky, kterou zobrazíte v grafu, pak odečtěte milimolární absorpční koeficient a přepočtěte jej na molární absorpční koeficient e (přepočet uveďte níže, uveďte fyzikální rozměr!): ZÁVĚR Srovnejte výsledky získané v jednotlivých částech úlohy a uveďte, který z nich považujete za nejméně přesný – zdůvodněte. část úlohy molární absorpční koeficient e (uveďte fyzikální rozměr) A B C D KONTROLNÍ LIST jméno: obor: datum provedení: ÚLOHA 1A A[420] Podpis vedoucího cvičení: ÚLOHA 1B ÚLOHA 1C ÚLOHA 1D zkumavka č. A[420] A[420] A[420] 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Podpis vedoucího cvičení: