Dana Pivodová
Martina Rejtharová
Lucie Pokludová
Ústav pro státní kontrolu veterinárních biopreparátů a léčiv
1/12/2021 1
Diagram organizační struktury ÚSKVBL
1/12/2021
Zkušební laboratoř
č. 1219
Akreditovaná
českým Institutem
pro akreditaci (ČIA)
Ředitel
Odbor registrace VLP a schvalování VP
Odbor Inspekce
Odbor: Úřední laboratoř pro kontrolu
veterinárních léčiv
Odbor: Laboratoř pro sledování reziduí
cizorodých látek
2
ÚSKVBL- národní autorita v oblastech:
1/12/2021 3
REGULATORNÍCH
- Registrace veterinárních léčivých
přípravků (= VLP)
- Schvalování veterinárních přípravků
(= VP) a veterinárních technických
prostředků (= VTP)
- Hodnocení biocidů: MZ hlavní garant
INSPEKČNÍCH
- Výroba LL a VLP
- Výroba MK
- Distribuce VLP
- Kontrola trhu
- Farmakovigilance
- Sběr dat o spotřebách VLP
- specificky
ANTIMIKROBIKA
- Podíl na utváření právních předpisů
v oblasti VLP a souvisejících
- ..... A LABORATORNÍCH
VETERINARY
Registrace VLP ... A praktické info pro veterinární lékaře
1/12/2021 4
+ schvalování VP a evidence VTP
Inspekce
1/12/2021 5
Situace a trendy ve spotřebách veterinárních
antimikrobik v ČR
v kontextu Evropy a spotřeb v humánní medicíně
Mohlo by vás také
zajímat
Diskuse: Kdo spotřebuje více antimikrobik ?
Vážený průměr spotřeby antimikrobik z celkové populace lidí a
potraviny produkujících zvířat v EU/EEA – trend (2014-2018)
• Celková spotřeba ATM
nižší u potraviny
produkujících zvířat
než u lidí (27 států
EU/EEA, 2016-2018)
• Statisticky významný
pokles o 32%
váženého průměru
u potraviny
produkujících zvířat
(2014 až 2018)
• Spotřeba v humánní
medicíně mírně
narůstala
https://www.ecdc.europa.eu/en/publications-
data/third-joint-interagency-antimicrobial-
consumption-and-resistance-analysis-report
Spotřeba vet antimikrobik dlouhodobě klesá
8
Kriticky významná antimikrobika
trendy 2010-2020 ČR vet: indikátory kvality používání !
Potraviny produkující zvířata:
Skot:
• Nárůst cefalosporiny 3. a 4.
generace !
Prasata:
• Stále velké množství
hromadných medikací !
• (premixy (MK) a perorální prášky
(medik voda)
• Obava ze zvýšení spotřeb (zejména
kolistinu) po zákazu ZnO
Kur domácí:
• Nárůst - nedaří se snížení
enrofloxacinu !
Jak si stojí ČR ve srovnání s dalšími státy EU/EEA a
Data o prodejích vet ATM zkorigovaná na populace hospodářských zvířat [mg/PCU]
Zdroj dat ESVAC: Sales of veterinary antimicrobial agents in 31EU/EEA countries in 2018
https://www.ema.europa.eu/en/documents/report/sales-veterinary-antimicrobial-agents-31-european-countries-
2018-trends-2010-2018-tenth-esvac-report_en.pdf
• Data je nutno interpretovat obezřetně, mezi jednotlivými státy se liší složení populací
zvířat i portfolio podávaných antimikrobik, více slovní komentář
CH
Již ve
2018
40mg/PCU
AT
Již ve 2018
50mg/PCU
UK
Již ve 2018
30mg/PCU
Spotřeby vybraných skupin antimikrobik:
potraviny produkující zvířata vs lidé
Spotřeba vybraných antimikrobik se
velmi liší mezi státy jak v humánní, tak
ve veterinární oblasti !
data je nutno interpretovat v
kontextu – viz slovní komentář
ZAMĚŘENO na CIAs data 2017:
29 EU/EEA států, které dodaly data jak
za veterinární, tak za humánní oblast:
Srovnání mediány v mg/PCU biomasy
- Cef3/4 lidé 2,8 > zvířata 0,2
- FQ lidé 6,4 > zvířata 1,1
- Makrolidy lidé 6,4 > zvířata 5,7
- Polymyxiny (kolistin)
lidé 0,03 < zvířata 1,7
Nejsme jenom úřad ☺
1/12/2021 12
... Aneb, co by mohl student/absolvent PŘ F MU
poznat v laboratořích ÚSKVBL?
Organizační struktura zkušební laboratoře
1/12/2021
Zkušební laboratoř
Odbor: Laboratoř pro sledování reziduí cizorodých látek
Oddělení administrativní podpory:
Vedení registru vzorků
Oddělení instrumentálních metod I
Oddělení instrumentálních metod II
Odbor: Úřední laboratoř pro kontrolu veterinárních léčiv
Oddělení administrativní podpory:
Vedení registru vzorků
Oddělení analytické chemie
Oddělení biologických metod
Mikrobiologie
Imunologie, virologie, PCR a zvířetník
13
Zkušební laboratoř OMCL
Vedoucí laboratoře MVDr. Dana Pivodová
1/12/2021 14
Zkušební laboratoř
OMCL
1/12/2021 15
Aktivity zkušební laboratoře
1/12/2021
• Fyzikální, fyzikálně chemické a chemické analýzy léčiv a
biologik/imunologik
• Zkoušky VLP, včetně zkoušek léčivých/účinných látek , excipinecií a
adjuvans nebo meziproduktů
– Mikrobiologické zkoušky
– Biologické zkoušky, excipients and adjuvants or intermediate products
Všechny tyto zkloušky jsou nezávislými testy a zkoušeními uskutečňovanými
nezávisle na analýzách uskutečněných výrobci jednotlivých VLP nebo výše
uvedených položek
• Analýzy v souladu s požadavky lékopisu European Pharmacopoeia
a/nebp Czech Pharmacopoeia), kde zkoušky zatím nebyly zavedeny
do příslušných lékopisů, postupuje s metodikami poskytnutými
výrobci, nicméně analýzy jsou prováděny nezávisle a kriticky
zhodnoceny
16
Zkušební laboratoř OMCL
1/12/2021
• Oddělení analytické chemie:
HPLC/UPLC – DAD s fluorescenční detekcí
AAS; Karl-Fisher titrace;
automatické potenciometrické titrace;
vybavení pro zkoušky disoluce
vybavení pro zkoušení rozrušitelnosti tablet
rotační viskozimentrie
UV/Vis – spektrometrie etc.
17
Analytická chemie - disoluce
1/12/2021 18
Analytická chemie: KF a TLC
1/12/2021 19
Analytická chemie – HPLC a UPLC
1/12/2021 20
Zkušební laboratoř další činnosti
• Zkoušení vzorků pro další účely
– Národní program dozoru nad trhem a studie/vzorky odebrané
odborem inspekce
– V případě potřeby zkoušení nově registrovaných VLP – spolupráce s
odborem registrace
– Vzorky nutné přezkoušet v rámci farmakovigilančních hlášení
/signálů ve spolupráci s odborem inspekce
– Testování materiálů používaných v laboratořích v souvislosti se
zajištěním standardů kvality
• Zkoušení vzorků na základě požadavku externích subjektů
– V rámci mezinárodních procedur registrace – postupy MRP/DCP (
spolupráce s ostatními zkušebními laboratořemi)
– Testování medikovaných krmiv
– Testování biologických materiálů ( kontaminace Mycoplasma spp.)
– Imunologické VLP retestování vzorků v OCABR postupu (pro držitele
rozhodnutí o registraci) – testování každé šarže pro uvolnění na trh v rámci
propouštění šarží imunologik – vydávání OCABR certifikátu platného v EU (bilingvální
verze EN/CS 1/12/2021 21
Zkušební laboratoř – aktivity spojené s tzv. Oficiálním
posouzením protokolu kontroly šarží (OBPR)
1/12/2021
OBPR – Official Batch Protocol Review
• Návaznost na legislativu (dříve směrnici, nově nařízení o VLP a související právní
normy)
• Jedná se o posouzení záznamů výrobní dokumentace předmětné
šarže daného přípravku, kterou na ÚSKVBL předkládá držitel
rozhodnutí o registraci, případně výrobce.
• Pokyn:
“EU Administrative Procedure for a Harmonised Application of Article 81 for Official
Batch Protocol Review of Immunological Veterinary Medicinal Products“
Např. v roce 2021, OBPR postup byl uplatněn pro imunologický VLP:
Živá a inaktivovaná vakcína proti Dermatofytozám
Pozn: Od září 2014, v souladu s ustanovením § 32 odst. 4 písm. c) zákona č. 378/2007 Sb., o
léčivech, implementujícím ustanovení článku 81 směrnice 2001/82/ES ve znění směrnice
2004/28/ES, je i nadále platné rozhodnutí ÚSKVBL o zahrnutí imunologických veterinárních
léčivých přípravků proti dermatofytózám do programu úředního uvolňování šarží IVLP na trh
formou OBPR (nově návaznost na nařízení o VLP 2019/6 a dále bude novelizace zákona o léčivech)
22
Zkušební laboratoř - OCABR a související činnosti
1/12/2021
OCABR – Official Competent Authority Bath Release
(úřední uvolnění šarže a vydání certifikátu)
• Dle článku 82 - směrnice 2001/82/EC amended by Directive 2004/28/EC
(Nově od 28.2. 2022 bude dle nařízení o VLP a navazujících právních norem)
Pokyn:
„EU Administrative Procedure for Application of Article 82 for Official Control Authority Batch
Release of Immunological Veterinary Medicinal Products“
+ Specifické pokyny pro imunologické VLP vhodné pro postup OCABR
V roce 2021, the OCABR postup uplatněn pro následující imunologické VLP:
• Vakcína proti července prasat živá (relevant EDQM document PA/PH/OMCL
(2003) 10, DEF 2CORR) (od roku 2008)
• Vakcína proti vzteklině pro lišky a psíky mývalovité živá (relevant EDQM
document PA/PH/OMCL (04) 5, DEF 3CORR) (od 2009)
• Equinní Influenza vakcína inaktivovaná(relevant EDQM document PA/PH/OMCL
(04) 4, DEF 2 CORR) (od 2009)
• Vakcína proti vzteklině pro veterinrání použití inaktivovaná (relevant EDQM
document PA/PH/OMCL (2011) 209 DEF 2 CORR) (od 2015)
celkem bývá ročně otestováno přes 100 šarží !
23
Virologie – čisté prostory
1/12/2021 24
Expert ze zkušební laboratoře
• Jako člen pracovní skupiny pro Official Medicinal Control
Laboratories – General European OMCL Network at EDQM
– a jako člen „Veterinary Batch Release Network“ (VBRN)
• Účast zástupce ÚSKVBL na pravidelných
jednáních skupin expertů Evropské lékopisné
komise konané na EDQM:
• skupina 7 antibiotika
• skupina 10A chemické látky
1/12/2021 25
OMCL – další aktivity
• EDQM
– CAP Programmes – testing VMPs authorized through centralized
procedure (since 2004)
– MSS – testing studies for VMPs - active substance + dosage form
– Collaborative studies for establishment of international
biological and chemical standards (since 1999)
– Testing of new methods (alternative)
– Sharing information in OMCLs Database (- information about
individual laboratories)
– Contribution to the European Pharmacopoeia
The Institute participates in the elaboration of the European
Pharmacopoeia through the activities of its experts in the groups
- 15V (MVDr. R. Smítalová PhD),
- 7 and 10A (PharmDr.Jaroslav Maxa PhD).
1/12/2021 26
1/12/2021
Zkušební laboratoř: Mikrobiologie
Testy sterility (Ph.Eur.2.6.1.)- čisté prostory třídy A/B
Mikrobiologické zkoušení nesterilních léčivých přípravků( čisté prostory třídy A/B)
- microbial enumeration tests – stanovení celkového počtu zárodků (Ph.Eur.2.6.12.)
- test for specified micro-organisms – zkouška na specifické mikrorganismy (Ph.Eur.2.6.13.)
Testování přítomnosti Mycoplasma spp.
– kultivační metoda (Ph.Eur.2.6.7)
Stanovení antibiotik mikrobiologickou metodou
- difuzní metoda (Ph.Eur.2.7.2.)
Bakteriální endotoxiny – LAL test
– kinetická chromogenní metoda (Ph.Eur. 2..6.14.)
Stanovení počtu životaschopných zárodků
- (Ph.Eur.-Mon. 0062) – živé bakteriální vakcíny
Kultivace a identifikace mikroorganizmů
Stanovení účinnosti protimikrobních konzervans
- Efficacy of antimicrobial preservation (Ph.Eur.5.1.3)
27
OMCL
1/12/2021
Biologická zkoušení – immunologie a virologie:
Detekce cizorodých komponent ve vakcinách – PCRs (Ph.Eur.2.6.21.)
Detekce Mycoplasma - PCR (Ph.Eur.2.6.7.)
Zkoušky účinnosti:
Swine Erysipelas Vaccine inact.–ELISA (Ph.Eur.5.2.1.+mon.0064)
Equine influenza vaccine inact. – HIT, SRH (Ph.Eur. mon.0249 + OIE 2.5.7)
Newcastle Disease vaccine inact. (Ph.Eur. mon.0870)- ELISA
Rabies vaccine for vet. use inact. (Ph.Eur. mon.0451)- serological method
- NIH test (challenge test)
virus titre: Rabies vaccine for foxes live (Ph.Eur. mon.0746)
Newcastle disease vaccine live (Ph.Eur. mon.0450)
Infectious bursal disease (Gumboro) vaccine live (Ph.Eur. mon.0587)
Myxomatosis disease vaccine live (Ph.Eur. mon.1943)
28
Mikrobiologie
1/12/2021 29
Mikrobiologie – čisté prostory
1/12/2021 30
Mikrobiologie – stanovení účinnosti antibiotik
mikrobiologickými metodami
1/12/2021 31
Využití počítačové analýzy
obrazu pro vyhodnocování
výsledků - makrosnímání
Napojení na vyhodnocovací SW
- Protokol o výsledku
stanovení
Využití počítačové analýzy
obrazu pro mikroskopii
Laboratoř PCR
1/12/2021 32
Laboratoř PCR: flow box –příprava vzorků
1/12/2021 33
Parazitologická vyšetření
(mimo zkušební laboratoř OMCL)
1/12/2021 34
Laboratoř pro sledování reziduí
cizorodých látek ÚSKVBL
Pracoviště: Brno, Palackého 174
Národní referenční laboratoř pro
rezidua anabolických látek a
zakázaných léčiv
Vedoucí: Mgr. Martina Rejtharová
Laboratoř pro sledování reziduí
cizorodých látek ÚSKVBL
• Úplná rekonstrukce bývalých laboratoří SVÚ
Brno v prostorách KVS pro Jihomoravský kraj
v roce 2009
Laboratoř pro sledování reziduí
cizorodých látek ÚSKVBL
• Nezpochybnitelná stanovení velmi malých
množství reziduí ve složitých biologických
matricích.
• Stanovované koncentrace:
µg/kg, µg/l (ng/g, ng/ml)
• Matrice: moč, sval, mléko, vejce, med, játra,
ledvina, krmivo, krevní sérum, srst, peří
• Zvířata: skot, prasata, drůbež, ryby …
• 2500 vzorků / rok
Laboratoř pro sledování reziduí
cizorodých látek ÚSKVBL
• Analytická technika:
důraz na přesnost a citlivost
• Chromatografie s hmotnostní detekcí
– LC-MS/MS
– GC-MS
– GC-MS/MS
Laboratoř pro sledování reziduí
cizorodých látek ÚSKVBL
• Vysoké nároky na přípravu vzorků
Laboratoř pro sledování reziduí
cizorodých látek ÚSKVBL
• Investice do obnovy přístrojů
– 2020 LC-MS/MS 12 milionů Kč
Laboratoř pro sledování reziduí
cizorodých látek ÚSKVBL
• Investice do obnovy přístrojů
– 2014 GC-MS 3 miliony Kč
Laboratoř pro sledování reziduí
cizorodých látek ÚSKVBL
• Pro plnění požadavků Evropské Komise
prostřednictvím Evropských referenčních
laboratoří na citlivost analytických metod je
nutné průběžně inovovat přístrojové vybavení
podle nejnovějších technologických poznatků.
1/12/2021
Poděkování kolegům z ÚSKVBL, včetně kolegů z laboratorních sekcí ÚSKVBL,
Poděkování MVDr. D. Pivodové a Mgr. M. Rejtharové za poskytnutí materiálů a snímků pro prezentaci !
Poděkování současnému (MVDr. Jiří Bureš) i předchozímu (Prof MVDr. Alfred Hera CSc) za udržení
vysokého standardu a kvality práce ÚSKVBL v národním i mezinárodním kontextu
A Vám Děkuji za pozornost ☺
Dotazy/komentáře ?
Pokludova@uskvbl.cz
43