PROJASŇOVÁNÍ ROSTLINNÉHO MATERIÁLU

                                           Princip metody

   Pomocí projasňovacího média se zprůhlední obsah buněk a je pak možné při zaostření na určitou
   rovinu prohlédnout buňky tzv. optického řezu. Materiál tedy není nutno řezat. Metody se často
   využívá v rostlinné embryologii nebo ve šlechtitelství při studiu vývoje embrya.

   Pomůcky:

   Mikroskop, preparační souprava

   Materiál:          plody kokošky pastuší tobolky (Capsella bursa-pastoris L.)

   Fixační směsi:

   Carnoyova fixáž (ethylalkohol : ledová kyselina octová 3 :1)              nebo

   FAA (35% formaldehyd + ledová kys. octová + 70% ethylalkohol                 5 + 5 + 90 dílů)

   Projasňovací média:

   nasycený roztok chloralhydrátu (8 dílů chloralhydrátu a 3 díly destilované vody)      nebo

   5% roztok KOH

   

   Postup:

   1)      Rostlinný materiál fixujeme ve fixační směsi 2 hodiny.

   2)      Fixované objekty propereme v etanolu (jeho koncentrace odpovídá koncentraci etanolu ve
   fixační směsi). V 70% etanolu je možné nafixovaný materiál i uchovávat po delší dobu. Pokud
   chceme sledovat ukládání chlorofylu v buňkách embrya, fixaci vynecháme.

   3)      Na podložním skle vypreparujeme z šešulek různé velikosti mladá semena, zakápneme
   několika kapkami projasňovacího média a asi po hodině můžeme pozorovat obsah zárodečného vaku.

   Výsledky:

   Vyhledáme vhodnou optickou rovinu a schematicky zakreslíme tvar mladého embrya a jeho uložení
   v semeni. Snažíme se najít různé vývojové fáze embrya.

   Literatura:

   Braune W., Leman, A., Taubert H. Pflanzenanatomisches Praktikum II. 2. vyd. Jena: VEB Gustav
   Fischer Verlag, 1982. 426 s. ISBN 261 700-36-82.

   Lux A., Erdelská O. et al. Praktikum z anatómie a embryológie rastlín, Univerzita Komenského
   Bratislava, 1998. 136 s. ISBN 80-223-1229-0.

   Opravilová, V., Knoz, J. Základy mikroskopické techniky. Brno: Masarykova univerzita, Vyd. 1.
   1992.