Sylabus botanické mikrotechniky

                             1. semestr 0/2 (Dubová)       podzim 2009

1.           Úvod do praktika (24.9.2009): náplň cvičení, doporučená literatura, organizace,
bezpečnost práce. Vývoj stavby mikroskopů (Zeiss, Laboval 3, Biolar, Meopta Bi, Olympus CX31,
Olympus BX 50), Köhlerův princip, Abbeův kondenzor, pankratický kondenzor.

2.           Metody studia neprůhledných objektů (1.10.2009): mikroskopie v dopadajícím světle,
mikroreliéfová metoda pro studium stavby krycích pletiv (epidermální buňky, svěrací buňky průduchů,
vedlejší buňky, klasifikace průduchů podle různých kritérií, trichomy).

3.           Metody projasňování rostlinného materiálu (8.10.2009) a jejich aplikace v rostlinné
embryologii (vývoj samičího gametofytu a embrya) nebo při studiu vývoje cévních svazků ve vývojové
biologii, šikmé osvětlení, rozlišovací schopnost, numerická apertura.

4.           Roztlaky a roztěry (16.10.2009): Rychlé cytologické metody, typy barviv pro jaderné
barvení roztlakových preparátů (acetokarmín, laktopropionový orcein), kořenová čepička,
předpůsobení pro karyologická studia.

5.           Interferenční kontrasty (22.10.2009): fázový kontrast, stavba fázového kondenzoru a
fázových objektivů, pozorování živých (fázových) objektů, Nomarského diferenciální interferenční
kontrast (DIC).

6.           Samčí gametofyt (19.11.2009): Metody určování životaschopnosti pylu, typy pylových
zrn, struktura stěny pylového zrna, barvení pylových zrn, klíčení pylových zrn.

7.           Histologické techniky (29.10.2009): fixace, fixační látky a fixační směsi, jejich
vlastnosti a použití, odvodňování, zalévání do parafínu a do pryskyřice, typy mikrotomů, řezání na
mikrotomu a ultramikrotomu, žehlení a lepení řezů, odparafínování.

8.           Barvení řezů (5.11.2009), typy metod (histologické a histochemické barvení) a barviva
užívaná v botanické mikroskopické technice - klasifikace a příklady použití.

9.           Fluorescenční mikroskopie (3.12.2009): (Olympus BX51), autofluorescence, primární a
sekundární fluorescence (použití např. pro sledování změn vývoje pylu, uspořádání cytoskeletu v
průběhu buněčného cyklu apod.), fluorochromy, imunohistochemie.

10.       Dokumentace mikroskopických objektů (12.11.2009): Kreslení, kreslící přístroje,
mikrofotografie analogová a digitální, videozáznam, analýza obrazu.

11.       Měření mikroskopických objektů (26.11.2009), mikrometrický okulár, mikrometrobjektivní
měřítko.

12.       Kryostatové techniky (10.12.2009): fixace, kryoprotekce, řezání na zmrazovacím mikrotomu,
vybrané histochemické reakce, histochemie enzymů, imunohistochemie.



Doporučená literatura

1.       Bózner A. et al.: Cytológia.- Osveta, 1986.

2.       Braune W., Leman A., Taubert H.: Pflanzenanatomisches Praktikum I.,II., Gustav Fischer,
Jena, 1983, 1982.

3.       Erdelská O.: Embryológia krytosemenných rastlín.- Veda, Bratislava, 1981.

4.       Jásik J.: Praktikum z cytológie rastlín.- Skriptum UKom.,Bratislava,1995.

5.       Kiernan J.: Histological and histochemical methods. Theory and practise, Pergamon Press,
1979.

6.       Knoz J., Opravilová V.: Základy mikroskopické techniky.- Skriptum MU,      Brno, 1992.

7.       Lojda Z. et al.: Enzyme histochemistry. A laboratory manual.- Springer Berlin  etc.,1979.

8.       Němec B. et al. : Botanická mikrotechnika.- ČSAV, Praha, 1962.

9.       Pazourek J.: Pracujeme s mikroskopem.- SNTL Praha, 1961.

10.   Pazourková Z.: Botanická mikrotechnika.- Skriptum UK, Praha, 1986.

11.   Votrubová O.: Anatomie rostlin -Skriptum UK Praha, 1996.

12.   Michalová K. et al. : Vybrané metody studia chromozómů. -  Skriptum UK Praha, 1989.